细胞程序性坏死抵抗参与肺癌顺铂耐药的机制研究
发布时间：2021-09-24 03:38
研究背景和目的:癌症是全球最主要的公共卫生问题。肺癌的发病率和死亡率在众多类型的癌症中一直位居前列,是对人类健康威胁最大的肿瘤之一。化疗是肺癌治疗的重要手段,而顺铂目前仍作为肺癌治疗的一线用药被广泛使用。对顺铂细胞毒性机制以及耐药机制的研究由来已久,现如今程序性坏死这一新的细胞程序性死亡形式的出现,给顺铂相关机制的研究带来了新的方向。已有研究表明,顺铂可以诱导细胞发生程序性坏死,但能否通过诱导程序性坏死杀伤肺癌细胞仍无报道。众所周知,细胞凋亡抵抗是顺铂耐药的重要机制,细胞程序性坏死抵抗是否促进肺癌细胞对顺铂产生耐药目前却并不完全清楚。本课题拟针对以上两个关键问题进行研究。本课题分为三个部分:第一部分,顺铂诱导肺癌细胞程序性坏死及机制研究研究方法:1)光镜或电镜观察死亡细胞情况与形态;2)MTT法、LDH释放实验和流式细胞术检测药物处理的细胞毒性;3)Western blotting检测相关分子蛋白水平的改变;4)q-PCR检测相关分子mRNA水平的改变;5)细胞免疫荧光染色检测药物处理后相应分子表达或分布的改变;6)ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α含量;7)免疫组织化学染色检测...
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
程序性坏死信号通路示意图[18]
空军军医大学博士学位论文-18-图2小鼠MLKL蛋白结构示意图[20]MLKL蛋白N端四螺旋束用品红色显示，支柱区域用青色显示，C端激酶样结构域用绿色显示。活性氧（Reactiveoxygenspecies，ROS）对于程序性坏死的贡献一直是程序性坏死研究的重要方面。线粒体的有氧呼吸和代谢过程是机体产生ROS的主要途径，因此线粒体ROS与程序性坏死之间的关系更是研究重点。有研究表明，TNF-α介导的RIPK1活化可导致线粒体功能障碍以及ROS的产生，这一过程参与TNF-α诱导的细胞程序性坏死[28]。相应地，用抗氧化剂清除ROS可抑制程序性坏死[29]。除此之外，诱导程序性坏死后，RIPK3可作用于线粒体上与细胞呼吸或代谢相关的酶，如丙酮酸脱氢酶复合体（Pyruvatedehydrogenasecomplex，PDC）和谷氨酸脱氢酶1（Glutamatedehydrogenase1，GLUD1），并提高它们的活性，进而使得ROS水平上升[30,31]。事实上，程序性坏死发生时ROS的产生并不完全来源于线粒体，质膜相关的NADPH氧化酶1（NADPHoxidase1，NOX1）复合物也可成为ROS的来源[32]。RIPK3也可与位于细胞浆的代谢酶发生相互作用，如谷氨酰胺连接酶（Glutamate-ammonialigase，GLUL）和肝糖原磷酸化酶（Glycogenphosphorylase,liverform，PYGL），使得ROS增加[31]。ROS的增加反过来也会促进程序性坏死，其可能机制为ROS激活RIPK1第161位丝氨酸的自磷酸化，继而促进坏死小体的形成[33,34]。不过值得注意的是，也并非所有研究都支持ROS特别是线粒体ROS在程序性坏死中的作用。有研究发现，抗氧化剂丁基羟基茴香醚（Butylatedhydroxyanisole，BHA）不能抑制Jurkat细胞发生程序性坏死，说明氧化应激可能不在程序性坏死信号通路中发挥重要作用[7]。另外也有研究认为，线粒体ROS的产生只是程序性坏死的伴随现象，?
程序性坏死与癌症关系示意图[78]
【参考文献】：
博士论文
[1]CD147-Annexin A2相互作用调控肿瘤细胞运动的分子机制研究[D]. 崔洪勇.第四军医大学 2015
本文编号：3407019
【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
程序性坏死信号通路示意图[18]
空军军医大学博士学位论文-18-图2小鼠MLKL蛋白结构示意图[20]MLKL蛋白N端四螺旋束用品红色显示，支柱区域用青色显示，C端激酶样结构域用绿色显示。活性氧（Reactiveoxygenspecies，ROS）对于程序性坏死的贡献一直是程序性坏死研究的重要方面。线粒体的有氧呼吸和代谢过程是机体产生ROS的主要途径，因此线粒体ROS与程序性坏死之间的关系更是研究重点。有研究表明，TNF-α介导的RIPK1活化可导致线粒体功能障碍以及ROS的产生，这一过程参与TNF-α诱导的细胞程序性坏死[28]。相应地，用抗氧化剂清除ROS可抑制程序性坏死[29]。除此之外，诱导程序性坏死后，RIPK3可作用于线粒体上与细胞呼吸或代谢相关的酶，如丙酮酸脱氢酶复合体（Pyruvatedehydrogenasecomplex，PDC）和谷氨酸脱氢酶1（Glutamatedehydrogenase1，GLUD1），并提高它们的活性，进而使得ROS水平上升[30,31]。事实上，程序性坏死发生时ROS的产生并不完全来源于线粒体，质膜相关的NADPH氧化酶1（NADPHoxidase1，NOX1）复合物也可成为ROS的来源[32]。RIPK3也可与位于细胞浆的代谢酶发生相互作用，如谷氨酰胺连接酶（Glutamate-ammonialigase，GLUL）和肝糖原磷酸化酶（Glycogenphosphorylase,liverform，PYGL），使得ROS增加[31]。ROS的增加反过来也会促进程序性坏死，其可能机制为ROS激活RIPK1第161位丝氨酸的自磷酸化，继而促进坏死小体的形成[33,34]。不过值得注意的是，也并非所有研究都支持ROS特别是线粒体ROS在程序性坏死中的作用。有研究发现，抗氧化剂丁基羟基茴香醚（Butylatedhydroxyanisole，BHA）不能抑制Jurkat细胞发生程序性坏死，说明氧化应激可能不在程序性坏死信号通路中发挥重要作用[7]。另外也有研究认为，线粒体ROS的产生只是程序性坏死的伴随现象，?
程序性坏死与癌症关系示意图[78]
【参考文献】：
博士论文
[1]CD147-Annexin A2相互作用调控肿瘤细胞运动的分子机制研究[D]. 崔洪勇.第四军医大学 2015
本文编号：3407019
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3407019.html
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