MicroRNA-539在胰腺癌中的表达及其调控机制研究
发布时间：2021-09-29 13:01
胰腺癌是高度恶性的消化道肿瘤,被发现时患者往往处于癌症晚期,只有极少部分患者早期能得到诊断,并进行下一步的根治性手术治疗。在临床上目前还没有敏感性高特异性强的诊断标志物来对胰腺癌进行早期诊断,同时也没有一个有效的手段来延长胰腺癌患者的生存期。胰腺癌患者仅不到20%可行手术,对于无法手术的患者,介入与常规的细胞毒性化学治疗效果不佳,寻找新的治疗手段已迫在眉睫。在人类的恶性疾病中,microRNA出现了不同程度的表达的异常,这些结果显示其在肿瘤发生发展过程中可能起着重要作用。本研究拟采用相关的生物学技术及方法来初步探讨miR-539在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌生物学行为影响的调控机制。第一部分microRNA-539表达下调提示胰腺癌患者预后不良本研究拟分析miR-539表达水平与胰腺癌患者临床病理特征及预后的相关性。我们用RT-qPCR技术检测了 56例胰腺癌患者中miR-539的表达水平,并将它与癌旁组织进行比较,我们发现,胰腺癌患者中miR-539表达水平显著下调。miR-539的表达水平与淋巴结转移（有VS无）、临床分期（Ⅲ-Ⅳ与Ⅰ-Ⅱ）、CA 199（≥200与<200）和...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：150 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－４?ＣＹ３转染胰腺癌细胞荧光显微镜图片??
（ＨＰＤＥ６－Ｃ７）检测值作为对照，结果表明：ｍｉＲＮＡ－５３９在ＡＳＰＣ－１、ＢＸＰＣ－３??和ＰＡＮＣ－１这３株人胰腺癌细胞中的表达水平均显著下调，同对照细胞相比，??其结果有显著性差异（Ｐ?＜０．０５）。（图２－３）??１．４－??議＋…??Ｉ－?＿幽Ａ幽??ｉ－ｉｙ?■?■?ｉｌｌ??ＨＰＤＥ６－Ｃ７?ＡＳＰＣ－１?ＢＸＰＣ－３?ＰＡＮＣ－１??图２－３?ｍｉＲ－５３９在胰腺癌细胞系和正常人胰腺细胞系ＨＰＤＥ６－Ｃ７中的相对表达水平。??Ｆｉｇｕｒｅ．２－３?Ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９?ｉｎ?ＰＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ａｎｄ?ｎｏｒｍａｌ?ｈｕｍａｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ??ｄｕｃｔ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｌｉｎｅ?ＨＰＤＥ６－Ｃ７．??３．４?ＣＹ３转染胰腺癌细胞的最佳转染条件??胰腺癌细胞在ｌ〇ｎＭ，?２０ｎＭ，?３０ｎＭ，?５０ｎＭ，ｌＯＯｎＭ下梯度配制转染Ｍｉｘ，??转染２４小时后，用荧光显微镜观察细胞情况，进行拍照，并做相关记录分析。??最后确定最佳转染条件，从结果可以看出，其２４小时转染后，用荧光显微镜图??片见图２－４，于转染前图片对比分析，胰腺癌细胞转染ＣＹ３最佳梯度为３０ｎＭ。??１０ｎｍ?２０ｎｍ?３０ｎｍ?５０ｎｍ?ｌＯＯｎｍ??■■■■■??图２－４?ＣＹ３转染胰腺癌细胞荧光显微镜图片??Ｆｉｇｕｒｅ．２－４?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＹ３?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ??３４??
示：成功转染ｍｉＲＮＡ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ?４８ｈ后人胰腺癌ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３细胞中??ｍｉＲＮＡ－５３９的表达水平明显高于空白、阴性两个对照组，统计学有显著性差异??（Ｆ?＜０．０５）（图２－５）；该结果表明：ｍｉＲＮＡ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ已经成功转染入胰腺癌细??胞，可用于后续的细胞实验研究。??＾３?Ｃｏｎｔｒｏｌ??■?ｍｉＲ－５３９?ＮＣ??ｒ－?Ｉ?Ｉ?ｍｉＲ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ??〇?２５－??１￥）?＊＊＊??〇＞?２〇－?＊＊＊?ｊｒ??＆?ｒｈ?广??＾?１５－?Ｉ?Ｉ??Ｓ？?｜??＾?１０－??Ｉ??＞?５－??｜?ｏ?ｒ＾Ｊ＿＿??ＰＡＮＣ－１?ＢｘＰＣ－３??图２－５在转染ｍｉＲ－５３９后，通过ＲＴ－ｑＰＣＲ证实胰腺癌细胞系ＰＡＮＣ－ｌ和ＢＸＰＣ－３中ｍｉＲ－５３９??的表达显著升高。??Ｆｉｇｕｒｅ．２－５?Ｅｃｔｏｐｉｃ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９?ｉｎ?ＰＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ＰＡＮＣ－１?ａｎｄ?ＢＸＰＣ－３?ｗｅｒｅ?ｅｖｉｄｅｎｃｅ??ｂｙ?ＲＴ－ｑＰＣＲ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９．??３．６?ＭＴＴ增值实验：ｍｉＲＮＡ－５３９过表达对人胰腺癌细胞株ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３??细胞増殖的影响。??３５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Long term oncological outcome of laparoscopic techniques in pancreatic cancer[J]. Trond Buanes,Bj?rn Edwin. World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 2018(12)
[2]Pancreatic cancer: A review of clinical diagnosis, epidemiology, treatment and outcomes[J]. Andrew McGuigan,Paul Kelly,Richard C Turkington,Claire Jones,Helen G Coleman,R Stephen McCain. World Journal of Gastroenterology. 2018(43)
[3]Nano albumin bound-paclitaxel in pancreatic cancer: Current evidences and future directions[J]. Guido Giordano,Massimo Pancione,Nunzio Olivieri,Pietro Parcesepe,Marianna Velocci,Tania Di Raimo,Luigi Coppola,Giuseppe Toffoli,Mario Rosario D’Andrea. World Journal of Gastroenterology. 2017(32)
[4]MicroRNA in pancreatic ductal adenocarcinoma and its precursor lesions[J]. Yasmin G Hernandez,Aimee L Lucas. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(01)
本文编号：3413749
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：150 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－４?ＣＹ３转染胰腺癌细胞荧光显微镜图片??
（ＨＰＤＥ６－Ｃ７）检测值作为对照，结果表明：ｍｉＲＮＡ－５３９在ＡＳＰＣ－１、ＢＸＰＣ－３??和ＰＡＮＣ－１这３株人胰腺癌细胞中的表达水平均显著下调，同对照细胞相比，??其结果有显著性差异（Ｐ?＜０．０５）。（图２－３）??１．４－??議＋…??Ｉ－?＿幽Ａ幽??ｉ－ｉｙ?■?■?ｉｌｌ??ＨＰＤＥ６－Ｃ７?ＡＳＰＣ－１?ＢＸＰＣ－３?ＰＡＮＣ－１??图２－３?ｍｉＲ－５３９在胰腺癌细胞系和正常人胰腺细胞系ＨＰＤＥ６－Ｃ７中的相对表达水平。??Ｆｉｇｕｒｅ．２－３?Ｔｈｅ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９?ｉｎ?ＰＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ａｎｄ?ｎｏｒｍａｌ?ｈｕｍａｎ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ??ｄｕｃｔ?ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ?ｌｉｎｅ?ＨＰＤＥ６－Ｃ７．??３．４?ＣＹ３转染胰腺癌细胞的最佳转染条件??胰腺癌细胞在ｌ〇ｎＭ，?２０ｎＭ，?３０ｎＭ，?５０ｎＭ，ｌＯＯｎＭ下梯度配制转染Ｍｉｘ，??转染２４小时后，用荧光显微镜观察细胞情况，进行拍照，并做相关记录分析。??最后确定最佳转染条件，从结果可以看出，其２４小时转染后，用荧光显微镜图??片见图２－４，于转染前图片对比分析，胰腺癌细胞转染ＣＹ３最佳梯度为３０ｎＭ。??１０ｎｍ?２０ｎｍ?３０ｎｍ?５０ｎｍ?ｌＯＯｎｍ??■■■■■??图２－４?ＣＹ３转染胰腺癌细胞荧光显微镜图片??Ｆｉｇｕｒｅ．２－４?Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＣＹ３?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ??３４??
示：成功转染ｍｉＲＮＡ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ?４８ｈ后人胰腺癌ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３细胞中??ｍｉＲＮＡ－５３９的表达水平明显高于空白、阴性两个对照组，统计学有显著性差异??（Ｆ?＜０．０５）（图２－５）；该结果表明：ｍｉＲＮＡ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ已经成功转染入胰腺癌细??胞，可用于后续的细胞实验研究。??＾３?Ｃｏｎｔｒｏｌ??■?ｍｉＲ－５３９?ＮＣ??ｒ－?Ｉ?Ｉ?ｍｉＲ－５３９?ｍｉｍｉｃｓ??〇?２５－??１￥）?＊＊＊??〇＞?２〇－?＊＊＊?ｊｒ??＆?ｒｈ?广??＾?１５－?Ｉ?Ｉ??Ｓ？?｜??＾?１０－??Ｉ??＞?５－??｜?ｏ?ｒ＾Ｊ＿＿??ＰＡＮＣ－１?ＢｘＰＣ－３??图２－５在转染ｍｉＲ－５３９后，通过ＲＴ－ｑＰＣＲ证实胰腺癌细胞系ＰＡＮＣ－ｌ和ＢＸＰＣ－３中ｍｉＲ－５３９??的表达显著升高。??Ｆｉｇｕｒｅ．２－５?Ｅｃｔｏｐｉｃ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９?ｉｎ?ＰＣ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ?ＰＡＮＣ－１?ａｎｄ?ＢＸＰＣ－３?ｗｅｒｅ?ｅｖｉｄｅｎｃｅ??ｂｙ?ＲＴ－ｑＰＣＲ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－５３９．??３．６?ＭＴＴ增值实验：ｍｉＲＮＡ－５３９过表达对人胰腺癌细胞株ＰＡＮＣ－１、ＢＸＰＣ－３??细胞増殖的影响。??３５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Long term oncological outcome of laparoscopic techniques in pancreatic cancer[J]. Trond Buanes,Bj?rn Edwin. World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 2018(12)
[2]Pancreatic cancer: A review of clinical diagnosis, epidemiology, treatment and outcomes[J]. Andrew McGuigan,Paul Kelly,Richard C Turkington,Claire Jones,Helen G Coleman,R Stephen McCain. World Journal of Gastroenterology. 2018(43)
[3]Nano albumin bound-paclitaxel in pancreatic cancer: Current evidences and future directions[J]. Guido Giordano,Massimo Pancione,Nunzio Olivieri,Pietro Parcesepe,Marianna Velocci,Tania Di Raimo,Luigi Coppola,Giuseppe Toffoli,Mario Rosario D’Andrea. World Journal of Gastroenterology. 2017(32)
[4]MicroRNA in pancreatic ductal adenocarcinoma and its precursor lesions[J]. Yasmin G Hernandez,Aimee L Lucas. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2016(01)
本文编号：3413749
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3413749.html
教材专著
