LncRNA尿路上皮癌胚抗原1调控滋养层细胞生物学行为机制
发布时间：2021-10-12 04:30
复发性流产是由于多种生物因素或者非生物因素导致的病理性妊娠,对孕妇的生理及心理都会产生不同程度的影响,但是目前复发性流产发生的原因还很不清楚。长链非编码RNA-尿路上皮癌胚抗原1（UCA1）最初被发现在子宫内膜癌、膀胱癌、肝癌和乳腺癌等多种癌症中上调表达,其高表达对癌细胞增殖、迁移、侵袭和耐药都具有重要作用。研究表明,与妊娠期子宫内膜重塑最为相关的滋养层细胞有着类似癌症的生物学行为且与复发性流产的发生密切相关,而不明原因的复发性流产可能也影响了子宫内膜相关良恶性疾病的演变。但UCA1在妊娠早期滋养细胞中的作用极其与复发性流产的关系仍不清楚。在本项目中,我们结合UCA1过表达/敲减、绒毛外植体培养分析等手段,解析UCA1在母-胎界面的滋养层侵袭中的功能;应用明胶酶谱法、蛋白质印迹和染色质免疫共沉淀等方法揭示UCA1在滋养层细胞侵袭功能维持中的分子机制。我们的研究结果显示:使用UCA1 siRNA处理的人滋养层细胞可以减少UCA1表达,并明显抑制滋养层细胞的增殖和侵袭能力;过表达野生型UCA1则可以显著促进滋养层细胞的增殖和侵袭能力;敲低UCA1也可以明显降低绒毛体外培养模型中滋养层细胞的...
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：博士
【图文】：
UCA1促进滋养层细胞MMP9表达过表达质粒转染滋养层细胞，并在36h后结合实时定量PCR金属蛋白酶家族的基因表达水平；B-D）利用UCA1siRNA转染滋养层细胞gure3.UCA1promotesMMP9expressionintrophoblasts检测方法分析
图6.敲低绒毛外植体中Figure6.KnockdownUCA1inhibitstrophoblastgrowthA）从妊娠期手术流产（妊娠期基质包被的培养皿上培养，使用对照组织，在24h和72h使用荧光显微镜拍摄图片胞的侵袭能力；C）免疫荧光检测结果显示信号代表MMP9，红色荧光信号代表已有研究提示滋养细胞究的结果显示人早孕期母滋养细胞表达UCA1促进自身侵袭的同时，是否又通过调节绒毛外滋养层细胞表达MMP9来控制自身侵袭呢流产的绒毛组织，发现绒毛组织经降低（图6）。然后我们将完全培养基更换成上清进行ELISA实验检测上海交通大学博士学位论文-31-绒毛外植体中UCA1表达可抑制滋养层细胞的侵袭能力gure6.KnockdownUCA1inhibitstrophoblastgrowthinextravillousexplantcultures妊娠期6-10周）的正常人绒毛组织中分离绒毛组织培养使用对照siRNA和特异敲低UCA1基因表达的使用荧光显微镜拍摄图片；B）使用Image-Proplus6.0UCA1敲低组MMP9表达显著降低CK7，使用DAPI复染细胞核。（放大倍数滋养细胞能以自分泌的方式分泌MMP9而促进自身侵袭人早孕期母-胎界面滋养层细胞表达UCA1控制滋养细胞侵袭，那么自身侵袭呢?为了回答这一问题，我们用UCA1siRNA流产的绒毛组织，发现绒毛组织经UCA1siRNA沉默后，滋养细胞侵袭能力显著将完全培养基更换成1%低血清继续培养16h实验检测。结果显示：敲低UCA1绒毛组织分泌的抑制滋养层细胞的侵袭能力inextravillousexplantculturesinvivo绒毛组织中分离绒毛组织培养并在胶原siRNA转染绒毛Pro软件来评估细达显著降低。绿色荧光放大倍数：x100）促进自身侵袭，本研处理人工并收取培养基MMP9显著降
低，而MMP2分泌水平并未发生的改变可以上调MMP9表达从而调控滋养层细胞的侵袭能力（图图7.在绒毛外植体中敲低Figure7.KnockdownUCA1inhibitsMMP9expressioninextravillousexplantculturesA-B)从妊娠期手术流产（妊娠期基质包被的培养皿上，使用对照收集培养48h后的绒毛培养基为阐明在体内绒毛组织中UCA1siRNA处理人工流产的绒毛组织培养基上清进行明胶酶谱实验检测MMP9酶活显著降低，而滋养层细胞中UCA1可以上海交通大学博士学位论文-32-分泌水平并未发生的改变，说明在体内绒毛组织滋养层细胞中7）。UCA1可抑制MMP9表达妊娠期6-10周）的正常人绒毛组织中分离绒毛组织使用对照siRNA和特异敲低UCA1基因表达的siRNA毛培养基，用于酶联免疫吸附实验检测MMP9和MMP2UCA1是否调控MMP9蛋白酶活性，我们处理人工流产的绒毛组织，并在48h后更换成无血清培养基培养基上清进行明胶酶谱实验检测。结果表明：敲低UCA1绒毛组织分泌的，而MMP2酶活水平并未明显改变，提示在体内绒毛组织可以维持MMP9酶活而调控滋养层细胞的侵袭能力（图说明在体内绒毛组织滋养层细胞中UCA1invivo的正常人绒毛组织中分离绒毛组织并培养在胶原转染绒毛组织，的表达。蛋白酶活性，我们使用更换成无血清培养基以收取在体内绒毛组织控滋养层细胞的侵袭能力（图8）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]北京市某三级甲等医院复发性流产患者焦虑抑郁状况及影响因素调查[J]. 宋东红,王巧红,陆虹,王海燕. 中华现代护理杂志. 2014 (08)
本文编号：3431892
【文章来源】：上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：博士
【图文】：
UCA1促进滋养层细胞MMP9表达过表达质粒转染滋养层细胞，并在36h后结合实时定量PCR金属蛋白酶家族的基因表达水平；B-D）利用UCA1siRNA转染滋养层细胞gure3.UCA1promotesMMP9expressionintrophoblasts检测方法分析
图6.敲低绒毛外植体中Figure6.KnockdownUCA1inhibitstrophoblastgrowthA）从妊娠期手术流产（妊娠期基质包被的培养皿上培养，使用对照组织，在24h和72h使用荧光显微镜拍摄图片胞的侵袭能力；C）免疫荧光检测结果显示信号代表MMP9，红色荧光信号代表已有研究提示滋养细胞究的结果显示人早孕期母滋养细胞表达UCA1促进自身侵袭的同时，是否又通过调节绒毛外滋养层细胞表达MMP9来控制自身侵袭呢流产的绒毛组织，发现绒毛组织经降低（图6）。然后我们将完全培养基更换成上清进行ELISA实验检测上海交通大学博士学位论文-31-绒毛外植体中UCA1表达可抑制滋养层细胞的侵袭能力gure6.KnockdownUCA1inhibitstrophoblastgrowthinextravillousexplantcultures妊娠期6-10周）的正常人绒毛组织中分离绒毛组织培养使用对照siRNA和特异敲低UCA1基因表达的使用荧光显微镜拍摄图片；B）使用Image-Proplus6.0UCA1敲低组MMP9表达显著降低CK7，使用DAPI复染细胞核。（放大倍数滋养细胞能以自分泌的方式分泌MMP9而促进自身侵袭人早孕期母-胎界面滋养层细胞表达UCA1控制滋养细胞侵袭，那么自身侵袭呢?为了回答这一问题，我们用UCA1siRNA流产的绒毛组织，发现绒毛组织经UCA1siRNA沉默后，滋养细胞侵袭能力显著将完全培养基更换成1%低血清继续培养16h实验检测。结果显示：敲低UCA1绒毛组织分泌的抑制滋养层细胞的侵袭能力inextravillousexplantculturesinvivo绒毛组织中分离绒毛组织培养并在胶原siRNA转染绒毛Pro软件来评估细达显著降低。绿色荧光放大倍数：x100）促进自身侵袭，本研处理人工并收取培养基MMP9显著降
低，而MMP2分泌水平并未发生的改变可以上调MMP9表达从而调控滋养层细胞的侵袭能力（图图7.在绒毛外植体中敲低Figure7.KnockdownUCA1inhibitsMMP9expressioninextravillousexplantculturesA-B)从妊娠期手术流产（妊娠期基质包被的培养皿上，使用对照收集培养48h后的绒毛培养基为阐明在体内绒毛组织中UCA1siRNA处理人工流产的绒毛组织培养基上清进行明胶酶谱实验检测MMP9酶活显著降低，而滋养层细胞中UCA1可以上海交通大学博士学位论文-32-分泌水平并未发生的改变，说明在体内绒毛组织滋养层细胞中7）。UCA1可抑制MMP9表达妊娠期6-10周）的正常人绒毛组织中分离绒毛组织使用对照siRNA和特异敲低UCA1基因表达的siRNA毛培养基，用于酶联免疫吸附实验检测MMP9和MMP2UCA1是否调控MMP9蛋白酶活性，我们处理人工流产的绒毛组织，并在48h后更换成无血清培养基培养基上清进行明胶酶谱实验检测。结果表明：敲低UCA1绒毛组织分泌的，而MMP2酶活水平并未明显改变，提示在体内绒毛组织可以维持MMP9酶活而调控滋养层细胞的侵袭能力（图说明在体内绒毛组织滋养层细胞中UCA1invivo的正常人绒毛组织中分离绒毛组织并培养在胶原转染绒毛组织，的表达。蛋白酶活性，我们使用更换成无血清培养基以收取在体内绒毛组织控滋养层细胞的侵袭能力（图8）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]北京市某三级甲等医院复发性流产患者焦虑抑郁状况及影响因素调查[J]. 宋东红,王巧红,陆虹,王海燕. 中华现代护理杂志. 2014 (08)
本文编号：3431892
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3431892.html
教材专著
