RNA聚合酶Ⅱ大亚基RPB1的异常激活促进了急性髓系白血病细胞过度增殖和耐药
发布时间：2021-11-14 08:29
研究背景:急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）是一类具有细胞遗传学和分子异常的高度侵袭性恶性肿瘤。其特征在于造血干细胞的分化障碍、骨髓和外周血中原始细胞克隆性扩增。在过去的几十年,已有多种疗法被应用于AML的治疗,例如标准的“7+3”诱导疗法,由7天的阿糖胞苷（cytarabine,Ara-C）与3天蒽环类药物组合DA方案可以有效的杀死AML中的白血病细胞,但绝大多数AML患者在3年内出现致死性的疾病复发,患者5年总生存率（overall survival,OS）低于40%。目前治疗AML面临的最大挑战之一是常规治疗方案无法杀死阻抑凋亡的快速增殖的肿瘤细胞。本研究在于阐明AML细胞维持快速增殖能力和耐药性的分子机制,为开发更安全、有效的治疗AML的疗法提供理论基础。转录是所有活细胞所必需的“重要过程”。肿瘤细胞需要高水平的转录过程来维持快速增殖和存活,并且转录失调在肿瘤细胞中是普遍发生的。例如,RNA聚合酶I（RNA polymerase I,RNAPI）转录失控,出现转录过度活跃被认为是血液肿瘤细胞存活必需的,并且可以在体内进行针对性靶向治疗。与正常...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１．２?ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株及ＡＭＬ原代样本中表迗情况??
用免疫印迹法（ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，?ＷＢ）方法检测了?ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、１１３例??初发ＡＭＬ骨髓和外周血、１０例正常人外周血及６例脐带血细胞中的表达情况（见??图１．１）。结果显示ＲＰＢ１蛋白在７例ＡＭＬ细胞株（见图１．１．１）和部分ＡＭＬ病??人样本（见图１丄２）中异常高表达，在正常人外周血（见图１．１．３）和脐带血（见??图１．１．４）中低表达或不表达。然后我们通过ｉｍａｇｅＪ软件进行定量分析得出ＲＰＢ１??蛋白在ＡＭＬ细胞株、ＡＭＬ原代样本、正常人外周血和脐带血细胞中表迖的中位??值分别?１．４９１４８，０．７８８９３４，０．０２８０７６３?和?０．０４８１４４?（见图?１．１．５）。既往文献指出?ＲＰＢ１??普遍存在于正常的组织中［２８，２９】，而我们检测出ＲＰＢ１在正常外周血细胞和正常造血??干／袓细胞中低表达或不表达。为了进一步验证我们的结果，我们接着采用共聚焦??免疫焚光显微镜来观察ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、初发原代样本、正常人干细胞??供者及脐带血细胞中的表达及定位情况。我们选取白血病细胞株ＭＯＬＭ－１３、急性??髓系白血病Ｍ５的原代样本、脐带血及外周血干细胞。同样可以看到在ＡＭＬ细胞??株Ｍ０ＬＭ－１３和原代样本（ＡＭＬ－Ｍ５）中均可检测到ＲＰＢ１蛋白高表达，并且ＲＰＢ１??蛋白定位于细胞核，而在正常的造血干／袓细胞中并没有观察到ＲＰＢ１蛋白（见图??１．１．６）。接着我采用免疫印记法检测到磷酸化的ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株中普遍??高表达（见图１．１．７）。对比在磁珠分选的ＣＤ３４＋的ＫＧ－ｌａ细胞株、初发的ＡＭＬ??样本中高表达
用免疫印迹法（ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，?ＷＢ）方法检测了?ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、１１３例??初发ＡＭＬ骨髓和外周血、１０例正常人外周血及６例脐带血细胞中的表达情况（见??图１．１）。结果显示ＲＰＢ１蛋白在７例ＡＭＬ细胞株（见图１．１．１）和部分ＡＭＬ病??人样本（见图１丄２）中异常高表达，在正常人外周血（见图１．１．３）和脐带血（见??图１．１．４）中低表达或不表达。然后我们通过ｉｍａｇｅＪ软件进行定量分析得出ＲＰＢ１??蛋白在ＡＭＬ细胞株、ＡＭＬ原代样本、正常人外周血和脐带血细胞中表迖的中位??值分别?１．４９１４８，０．７８８９３４，０．０２８０７６３?和?０．０４８１４４?（见图?１．１．５）。既往文献指出?ＲＰＢ１??普遍存在于正常的组织中［２８，２９】，而我们检测出ＲＰＢ１在正常外周血细胞和正常造血??干／袓细胞中低表达或不表达。为了进一步验证我们的结果，我们接着采用共聚焦??免疫焚光显微镜来观察ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、初发原代样本、正常人干细胞??供者及脐带血细胞中的表达及定位情况。我们选取白血病细胞株ＭＯＬＭ－１３、急性??髓系白血病Ｍ５的原代样本、脐带血及外周血干细胞。同样可以看到在ＡＭＬ细胞??株Ｍ０ＬＭ－１３和原代样本（ＡＭＬ－Ｍ５）中均可检测到ＲＰＢ１蛋白高表达，并且ＲＰＢ１??蛋白定位于细胞核，而在正常的造血干／袓细胞中并没有观察到ＲＰＢ１蛋白（见图??１．１．６）。接着我采用免疫印记法检测到磷酸化的ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株中普遍??高表达（见图１．１．７）。对比在磁珠分选的ＣＤ３４＋的ＫＧ－ｌａ细胞株、初发的ＡＭＬ??样本中高表达
本文编号：3494302
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：119 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１．１．２?ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株及ＡＭＬ原代样本中表迗情况??
用免疫印迹法（ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，?ＷＢ）方法检测了?ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、１１３例??初发ＡＭＬ骨髓和外周血、１０例正常人外周血及６例脐带血细胞中的表达情况（见??图１．１）。结果显示ＲＰＢ１蛋白在７例ＡＭＬ细胞株（见图１．１．１）和部分ＡＭＬ病??人样本（见图１丄２）中异常高表达，在正常人外周血（见图１．１．３）和脐带血（见??图１．１．４）中低表达或不表达。然后我们通过ｉｍａｇｅＪ软件进行定量分析得出ＲＰＢ１??蛋白在ＡＭＬ细胞株、ＡＭＬ原代样本、正常人外周血和脐带血细胞中表迖的中位??值分别?１．４９１４８，０．７８８９３４，０．０２８０７６３?和?０．０４８１４４?（见图?１．１．５）。既往文献指出?ＲＰＢ１??普遍存在于正常的组织中［２８，２９】，而我们检测出ＲＰＢ１在正常外周血细胞和正常造血??干／袓细胞中低表达或不表达。为了进一步验证我们的结果，我们接着采用共聚焦??免疫焚光显微镜来观察ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、初发原代样本、正常人干细胞??供者及脐带血细胞中的表达及定位情况。我们选取白血病细胞株ＭＯＬＭ－１３、急性??髓系白血病Ｍ５的原代样本、脐带血及外周血干细胞。同样可以看到在ＡＭＬ细胞??株Ｍ０ＬＭ－１３和原代样本（ＡＭＬ－Ｍ５）中均可检测到ＲＰＢ１蛋白高表达，并且ＲＰＢ１??蛋白定位于细胞核，而在正常的造血干／袓细胞中并没有观察到ＲＰＢ１蛋白（见图??１．１．６）。接着我采用免疫印记法检测到磷酸化的ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株中普遍??高表达（见图１．１．７）。对比在磁珠分选的ＣＤ３４＋的ＫＧ－ｌａ细胞株、初发的ＡＭＬ??样本中高表达
用免疫印迹法（ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，?ＷＢ）方法检测了?ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、１１３例??初发ＡＭＬ骨髓和外周血、１０例正常人外周血及６例脐带血细胞中的表达情况（见??图１．１）。结果显示ＲＰＢ１蛋白在７例ＡＭＬ细胞株（见图１．１．１）和部分ＡＭＬ病??人样本（见图１丄２）中异常高表达，在正常人外周血（见图１．１．３）和脐带血（见??图１．１．４）中低表达或不表达。然后我们通过ｉｍａｇｅＪ软件进行定量分析得出ＲＰＢ１??蛋白在ＡＭＬ细胞株、ＡＭＬ原代样本、正常人外周血和脐带血细胞中表迖的中位??值分别?１．４９１４８，０．７８８９３４，０．０２８０７６３?和?０．０４８１４４?（见图?１．１．５）。既往文献指出?ＲＰＢ１??普遍存在于正常的组织中［２８，２９】，而我们检测出ＲＰＢ１在正常外周血细胞和正常造血??干／袓细胞中低表达或不表达。为了进一步验证我们的结果，我们接着采用共聚焦??免疫焚光显微镜来观察ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株、初发原代样本、正常人干细胞??供者及脐带血细胞中的表达及定位情况。我们选取白血病细胞株ＭＯＬＭ－１３、急性??髓系白血病Ｍ５的原代样本、脐带血及外周血干细胞。同样可以看到在ＡＭＬ细胞??株Ｍ０ＬＭ－１３和原代样本（ＡＭＬ－Ｍ５）中均可检测到ＲＰＢ１蛋白高表达，并且ＲＰＢ１??蛋白定位于细胞核，而在正常的造血干／袓细胞中并没有观察到ＲＰＢ１蛋白（见图??１．１．６）。接着我采用免疫印记法检测到磷酸化的ＲＰＢ１蛋白在ＡＭＬ细胞株中普遍??高表达（见图１．１．７）。对比在磁珠分选的ＣＤ３４＋的ＫＧ－ｌａ细胞株、初发的ＡＭＬ??样本中高表达
本文编号：3494302
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3494302.html
教材专著
