CD73对胃癌细胞增殖的影响及机制研究
发布时间：2021-11-14 21:55
[研究背景和目的]胃癌是全球最常见的癌症之一,在我国,胃癌在恶性肿瘤发病率和病死率中位居第二和第三。近年来,得益于手术、放疗、化疗以及靶向治疗的改善和突破,胃癌患者治疗后的存活率得到一定程度的改善,但五年存活率仍处于较低的水平,因此积极寻找新的胃癌分子标志物和治疗靶点、提高胃癌的早期诊断和治疗效果是当前胃癌研究的重点任务。CD73是由NT5E基因编码的被糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定于细胞膜表面的一种多功能跨膜糖蛋白,是细胞外嘌呤代谢通路中的限速酶之一。近年来的研究发现CD73有细胞外水解酶和非水解酶两种功能。CD73发挥水解酶功能可参与调控肿瘤细胞增殖、肿瘤新生血管形成、肿瘤免疫逃逸、抑制免疫反应等过程。而CD73的非水解酶功能则参与调控癌细胞的浸润和转移能力。CD73的表达水平在乳腺癌、结直肠癌、头颈部鳞状细胞癌、胃癌和肝癌中都存在异常。然而关于CD73在胃癌发生发展中可能的作用和机制尚未明确。本研究首先以人胃癌细胞株作为实验对象,应用CD73水解酶活性检测、蛋白免疫印迹法（Western Blot）、实时荧光定量PCR、CCK-8实验、流式细胞术等方法研究了CD73特异性抑制剂AP...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
五种细胞的水解酶活性（**与GES-1相比，P<0.01）
届博士学位论文 CD73对胃癌细胞增殖的影响及机制研究40图1-2 五种细胞的NT5E mRNA相对表达量（与GES-1相比，*P<0.05，**P<0.01）Figure1-2 Relative expression of NT5E mRNA of five gastric cell lines（*P<0.05，**P<0.01 vs GES-1）3.3 Western blot检测五种细胞CD73蛋白表达水平Western blot检测5种细胞中CD73蛋白的表达水平结果显示，CD73蛋白在BGC-823（2.300±0.416）和MGC-803（1.450±0.234）中的表达高于GES-1（1.000±0.000），差异具有显著性意义（P＜0.05），SGC-7901（1.143±0.353）与GES-1相比差异无显著性意义（P>0.05），AGS（0.687±0.031）中的CD73蛋白相对表达量低于GES-1
届博士学位论文 CD73对胃癌细胞增殖的影响及机制研究41图1-3 五种细胞的CD73蛋白相对表达量（与GES-1相比，*P<0.05，**P<0.01）Fig 1-3 Relative expression of CD73 protein of five gastric cell lines（*P<0.05，**P<0.01 vs GES-1）3.4 APCP对BGC-823细胞胞外水解酶活性的影响通过从水解酶活性、NT5E mRNA表达水平和CD73蛋白表达水平三个方面，本研究选择上述四种胃癌细胞中水解酶相对活性和CD73表达水平均最高的BGC-823细胞作为后续实验的模型。浓度为10μM、50μM和100μM的APCP处理BGC-823细胞24h后，孔雀绿磷酸盐检测试剂盒检测细胞水解酶活性的变化，结果显示，各组细胞在波长620nm处的吸光度值分别为APCP(0μM)（0.472±0
【参考文献】：
期刊论文
[1]抑制CD73表达对肿瘤细胞缺血缺氧下增殖的影响[J]. 龚小羽,赵霏,张威,李焱,宋雷. 西北民族大学学报(自然科学版). 2018(02)
[2]Early gastric cancer frequently has high expression of KKLC-1, a cancer-testis antigen[J]. Nobue Futawatari,Takashi Fukuyama,Rui Yamamura,Akiko Shida,Yoshihito Takahashi,Yatsushi Nishi,Yoshinobu Ichiki,Noritada Kobayashi,Hitoshi Yamazaki,Masahiko Watanabe. World Journal of Gastroenterology. 2017(46)
[3]慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达[J]. 王露,翟玮玮,杨向荣,王芳,李见,张强,李玉云. 南方医科大学学报. 2014(10)
[4]Expression and clinical significance of CD73 and hypoxia-inducible factor-1α in gastric carcinoma[J]. Xiao-Xia Lu,Yi-Tian Chen,Bing Feng,Xiao-Bei Mao,Bo Yu,Xiao-Yuan Chu. World Journal of Gastroenterology. 2013(12)
[5]APCP对人胃腺癌细胞HGC-27生长及血管内皮生长因子的影响[J]. 马文平,马晶,刘宝全,李雪梅,王建堃,张雅芳. 解剖科学进展. 2008(01)
博士论文
[1]CD39/CD73分子在胃肠癌患者中的表达及临床意义研究[D]. 张斌.第二军医大学 2015
本文编号：3495416
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
五种细胞的水解酶活性（**与GES-1相比，P<0.01）
届博士学位论文 CD73对胃癌细胞增殖的影响及机制研究40图1-2 五种细胞的NT5E mRNA相对表达量（与GES-1相比，*P<0.05，**P<0.01）Figure1-2 Relative expression of NT5E mRNA of five gastric cell lines（*P<0.05，**P<0.01 vs GES-1）3.3 Western blot检测五种细胞CD73蛋白表达水平Western blot检测5种细胞中CD73蛋白的表达水平结果显示，CD73蛋白在BGC-823（2.300±0.416）和MGC-803（1.450±0.234）中的表达高于GES-1（1.000±0.000），差异具有显著性意义（P＜0.05），SGC-7901（1.143±0.353）与GES-1相比差异无显著性意义（P>0.05），AGS（0.687±0.031）中的CD73蛋白相对表达量低于GES-1
届博士学位论文 CD73对胃癌细胞增殖的影响及机制研究41图1-3 五种细胞的CD73蛋白相对表达量（与GES-1相比，*P<0.05，**P<0.01）Fig 1-3 Relative expression of CD73 protein of five gastric cell lines（*P<0.05，**P<0.01 vs GES-1）3.4 APCP对BGC-823细胞胞外水解酶活性的影响通过从水解酶活性、NT5E mRNA表达水平和CD73蛋白表达水平三个方面，本研究选择上述四种胃癌细胞中水解酶相对活性和CD73表达水平均最高的BGC-823细胞作为后续实验的模型。浓度为10μM、50μM和100μM的APCP处理BGC-823细胞24h后，孔雀绿磷酸盐检测试剂盒检测细胞水解酶活性的变化，结果显示，各组细胞在波长620nm处的吸光度值分别为APCP(0μM)（0.472±0
【参考文献】：
期刊论文
[1]抑制CD73表达对肿瘤细胞缺血缺氧下增殖的影响[J]. 龚小羽,赵霏,张威,李焱,宋雷. 西北民族大学学报(自然科学版). 2018(02)
[2]Early gastric cancer frequently has high expression of KKLC-1, a cancer-testis antigen[J]. Nobue Futawatari,Takashi Fukuyama,Rui Yamamura,Akiko Shida,Yoshihito Takahashi,Yatsushi Nishi,Yoshinobu Ichiki,Noritada Kobayashi,Hitoshi Yamazaki,Masahiko Watanabe. World Journal of Gastroenterology. 2017(46)
[3]慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达[J]. 王露,翟玮玮,杨向荣,王芳,李见,张强,李玉云. 南方医科大学学报. 2014(10)
[4]Expression and clinical significance of CD73 and hypoxia-inducible factor-1α in gastric carcinoma[J]. Xiao-Xia Lu,Yi-Tian Chen,Bing Feng,Xiao-Bei Mao,Bo Yu,Xiao-Yuan Chu. World Journal of Gastroenterology. 2013(12)
[5]APCP对人胃腺癌细胞HGC-27生长及血管内皮生长因子的影响[J]. 马文平,马晶,刘宝全,李雪梅,王建堃,张雅芳. 解剖科学进展. 2008(01)
博士论文
[1]CD39/CD73分子在胃肠癌患者中的表达及临床意义研究[D]. 张斌.第二军医大学 2015
本文编号：3495416
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3495416.html
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