EGFR信号诱导HMGA2转录调控的作用及其在肝癌转移中的机制研究

发布时间：2021-11-23 08:58

　　研究背景和目的:肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是一种死亡率高的原发性肝癌,在全球范围内高发,尤其是亚洲,非洲和南部欧洲,在我国,肝细胞癌的发病人数几乎占到全球发病人数的一半。肝细胞癌发病隐匿,早期症状不明显,等出现症状时多已到中晚期,或伴远处转移。此时手术治疗效果不理想,导致患者很快死亡。因此,阐明肝癌的转移机制,对肝癌的早期发现及治疗有十分重要的意义。本文对肝细胞癌的转移机制进行研究,旨在发现介导肝细胞癌转移的关键分子,为肝细胞癌的治疗提供新的靶点。HMGA2（high mobility group AT-hook2）是高迁移率蛋白（high mobility group,HMG）家族成员之一,此外,HMGA1（high mobility group AT-hook1）也是该家族的一员。HMGA1是一种结构性转录因子,通过与其他转录因子结合,协同调控下游靶基因的转录。研究发现,HMGA1在多种肿瘤组织（肝癌、乳腺癌、胰腺癌、皮肤癌等）中表达水平显著上调,并且可以通过调节多种靶基因的转录,促进肿瘤的增殖和转移。HMGA2蛋白主要定位于细胞核中,虽然... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：109 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－１．肝癌模型组大鼠肝脏中ＨＭＧＡ２的表达明显上调

ｒｅａｔｅｄ?ｒａｔｓ．??＊＊尸＜０．０１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｖｅｈｉｃｌｅ?ｇｒｏｕｐ，?＂＂￣Ｐ＜０．００１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎａｉｖｅ?ｇｒｏｕｐ．?Ｏｎｅ?ｗａｙ??ＡＮＯＶＡ?ａｎａｌｙｓｉｓ，?ｎ＝１０／ｇｒｏｕｐ．??１．２．２?ＨＭＧＡ２不影响肝癌细胞的增殖??为了明确ＨＭＧＡ２在肝癌中的作用，我们首先检测了?ＨｅｐＧ２、ＢＥＬ－７４０２、??ＭＨＣＣ－９７Ｈ、ＨＣＣ－ＬＭ３等四种肝癌细胞系中ＨＭＧＡ２?ｍＲＮＡ和蛋白的表达情况。??实验结果如图１－２所示，ＨＭＧＡ２?ｍＲＮＡ和蛋白的表达在ＨｅｐＧ２、ＢＥＬ－７４０２中??较低，在ＭＨＣＣ－９７Ｈ、ＨＣＣ－ＬＭ３中的表达较高。??Ａ?Ｂ?ＨｅｐＧ２?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?ＢＥＬ－７４０２?ＨＣＣ－ＬＭ３??Ｉ??ＨＭＧＡ２?ｍｍｍ?ｍｍｍｍ?ｍａｍ?１２?ｋＤ??３－ａｃｔｉｎ?ＭＨＩ?４３??ｇ?２．０－，?ｇ?２．０－，??Ｔ?丁??Ｐ１＇５＇?ｒ＾ｉ?ｌｒ?ｎ??ｘ?ｘ?１－０－?？、１．０－??Ｉｓ??ｒｏ?￡?０．５－?—＊?〇）?￥?０．５－??Ｈ?ｒ｜?ｒｎ?ｒｎ??荸?〇？〇丄Ｊ￣￣ｉ￣￣￣￣￣ｉ—■￣￣ｉ￣＊－?ａ?〇．〇』■？—■ｉ￣—■￣ｉ一一￣￣ｉ￣—■ｉ￣匕??Ｘ?ＨｅｐＧ２?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?ＢＥＬ－７４０２?ＨＣＣ－ＬＭ３?ＨｅｐＧ２?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?ＢＥＬ－７４０２?ＨＣＣ－ＬＭ３??图１－２．?ＨＭＧＡ２在四种肝癌细胞中的表达情况。（Ａ）?ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＨＭＧＡ２?ｍＲＮＡ在??肝癌细胞ＭＨＣＣ－９７Ｈ和ＨＣＣ－ＬＭ３中的表达明显较ＨｅｐＧ２和ＢＥＬ－７４〇２

?ｃｅｌｌ?ｗａｓ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ．＊＊＊尸＜０．００１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｖｅｃｔｏｒ?ｇｒｏｕｐ，??■尸＜０．００１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎａＹｖｅ?ｇｒｏｕｐ，Ｏｎｅ?ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ａｎａｌｙｓｉｓ，?ｎ＝５／ｇｒｏｕｐ．??为了确定ＨＭＧＡ２是否对肝癌细胞的增殖有影响，我们首先将相同数目的??ＨｅｐＧ２、ＨｅｐＧ２－Ｖｅｃｔｏｒ和ＨｅｐＧ２－ＨＭＧＡ２细胞接种在９６孔板中，连续培养１？７??天，然后采用ＭＴＴ法检测上述细胞的增殖情况。实验结果如图１－４所示，与空??白对照组和空载体组相比，ＨＭＧＡ２过表达的ＨｅｐＧ２细胞的生长曲线并没有显??著变化。接下来，我们观察敲减肝癌细胞中ＨＭＧＡ２的表达能否抑制肝癌细胞??的增殖。当使用特异性的ｓｈＲＮＡ基因敲减ＭＨＣＣ－９７Ｈ细胞中内源性ＨＭＧＡ２??的表达后，将相同数目的?ＭＨＣＣ－９７Ｈ、ＭＨＣＣ－９７Ｈ－Ｖｅｃｔｏｒ?和?ＭＨＣＣ－９７Ｈ－??ｓｈＨＭＧＡ２细胞接种于９６孔板中，连续培养１？７天，ＭＴＴ实验结果显示与空白??对照组或转染空载体的细胞相比，ＨＭＧＡ２敲减的ＭＨＣＣ－９７Ｈ细胞的生长曲线??也没有明显变化。这些实验结果表明，ＨＭＧＡ２对肿瘤细胞的增殖没有明显的影??响。??Ａ?Ｂ??—?？Ｎａｉｖｅ?１．５－１?Ｎａｉｖｐ??ＨｅｐＧ２?＋?Ｖｅｃｔｏｒ?ＭＨＣＣ－９７Ｈ?＋?Ｎａｉｖｅ??＋?ｖｅｃｔｏｒ?＋?ＶＧＣｔｏｒ??０，?ＨＭＧＡ２?Ｘ?ｓｈＨＭＧＡ２?Ｊ??ｒ?ｒ?＾??１?°＇５＇?１０５??〇■〇?１?ｂ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?〇■〇?Ｉｋ?ｉ?ｉ?ｉ

【参考文献】：
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博士论文
[1]HMGA2对鼻咽癌恶性生物学行为的影响及机制研究[D]. 夏铀铀.南京医科大学 2016

硕士论文
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本文编号：3513551