炎症微环境下miR-140-5p靶向作用Smad3影响软骨细胞生物学特性的机制研究

发布时间：2021-12-10 11:02

　　颞下颌关节（Temporomandibular joint,TMJ）是颌面部唯一同时具备转动和滑动运动的左右联动关节,参与了咀嚼、吞咽、言语、表情和呼吸等精细且复杂的功能活动。骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是关节疾病中的典型代表,其发病率高,对人体危害大,严重影响了患者的生活质量。虽有不少学者对这类关节疾病进行了相关研究报道,但目前对骨关节炎,尤其是颞下颌关节骨关节炎（Temporomandibular joint osteoarthritis,TMJ-OA）复杂的病理机制尚缺乏完整认识。以往的研究表明,miR-140-5p在软骨细胞分化和软骨内稳态过程中发挥着重要的作用,miR-140-5p基因敲除鼠会出现增龄性骨关节炎的症状。然而,临床研究却发现骨关节炎患者的关节软骨中miR-140-5p表达显著增加。虽然越来越多的研究认为miR-140-5p与OA关系密切,但其功能作用至今仍存在争议。有关miR-140-5p在OA,尤其在TMJ-OA中的作用机制亟需被阐明。本研究第一部分通过建立炎症微环境体外实验模型,模拟了 TMJ-OA样病损改变。第二部分探索了 miR-140... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．下颌髁突软骨细胞及胫骨生长板软骨细胞染色鉴定??

定波长４５０ｎｍ，测定各组软骨细胞在Ｉｄ、３ｄ、５?ｄ、７??ｄ、９?ｄ时的光密度（表６），其光密度值（Ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ，?０Ｄ）可间接反映活细??胞数量。结果可见下颌髁突软骨细胞与胫骨生长板软骨细胞在培养至３?ｄ时两组??间的ＯＤ值无明显差别。当培养至５?ｄ后两种软骨细胞开始迅速分裂增殖，进入对??数生长期，且胫骨生长板软骨细胞的ＯＤ值较下颌髁突软骨细胞高。第９?ｄ时０Ｄ??值无明显增长，细胞进入增殖的平台期。两种软骨细胞增殖趋势大体一致，均呈??“Ｓ”形的生长曲线（图２）。经两因素重复测量方差分析（整体比较）发现：胫骨??生长板软骨细胞的增殖水平整体上升幅度大于髁突软骨细胞。再对两组在各个时??间点的０Ｄ值进行单因素方差分析以及各时间点数据差值ｔ检验，结果提示５?ｄ时胫??骨生长板软骨细胞组和下颌髁突软骨细胞组的ＯＤ值差异显著。总之，统计结果??提示胫骨生长板软骨细胞的细胞增殖能力强于髁突软骨细胞。??表６．?ＣＣＫ－８检测的０Ｄ值表达变化（［土ｓ）??＾ＭＣＣｓ?（ｎ＝３）?ＴＧＰＣｓ?（ｎ＝３）??Ｔｄ?０．３１２±０．０１７?０．２９０±０．０１７??３ｄ?０．３２７±０．０Ｉ９?０．３５９±０．０１４??５ｄ?０．４０６±０．０Ｉ６＊?０．５１０±０．０２５??７ｄ?０．４９７±０．０１４?０．５４９±０＿０３１??９ｄ?０．４８９±０．０４６?０．５７４±０．０５８??注：ａ’＝０．０５，正态分布数据。??０．８－１??－？－ＭＣＣｓ??Ｔ?－ｍ－?ＴＧＰＣｓ??！：：??Ｏ?ｒ??０．２－??〇？〇?Ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?

ｐ－ＣＲＥＢ?ＣＲＥＢ??－１５１?．边?１５１??ｒｅ＇ｌ＇??ｃ?ｔｊ?＊?—?ｇ?ｎｓ??Ｐ：ｉｌｌｉ?１ＪＩＵＩ??Ｓ?？？?１?？?１?？?￡?？??Ｉ?ｊ?Ｉ?４?１＾１＾??ｏ?ｏ??ｏ?ｏ??ＭＣＣｓ?ＴＧＰＣｓ?ＭＣＣｓ?ＴＧＰＣｓ??图７．炎症微环境下软骨细胞表型相关蛋白表达降低??Ｆｉｇ．?７?Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅ?ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ－ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｉｎ?ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ??ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．?ＭＣＣｓ?ａｎｄ?ＴＧＰＣｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＩＬ－ｉｐ?ｆｏｒ?２４?ｈ，?ｔｈｅｎ?ｔｈｅ??ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅ?ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ－ｒｅｌａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ，?ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ?Ｓｏｘ９？?ＣＲＥＢ，?ｐ－ＣＲＥＢ，?ＴＧＦ－Ｐ３，??ｗｅｒｅ?ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?Ａｌｌ?ｖａｌｕｅｓ?ａｒｅ?ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ａｓ?ｍｅａｎｓ?士?ＳＤ?（ｎ＝３）．??＊Ｐ＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｉｎ?ＭＣＣｓ．?＊＊尸＜０．０１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ??ｇｒｏｕｐ?ｉｎ?ＭＣＣｓ．?＃尸＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｉｎ?ＴＧＰＣｓ．?＃＃Ｐ＜０．０１??ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ?ｉｎ?ＴＧＰＣｓ．?＆Ｐ＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ＭＣＣｓ?ａｎｄ??ＴＧＰＣｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｆｌａ

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3532494