pH响应型MOF纳米粒子输送药物在细胞自噬和抗肿瘤治疗中的应用研究

发布时间：2021-12-18 23:51

　　采用具有环境响应性能的药物输送材料可降低药物的毒性,提高药物的靶向释放。本文通过合成金属有机框架材料——沸石咪唑框架（ZIF）系列中的ZIF-8纳米粒子,基于原位包埋法和叶酸修饰,用ZIF-8输送细胞自噬抑制剂（3-甲基腺嘌呤）、茶多酚主要成分（表没食子儿茶素没食子酸酯）及其衍生物（单取代表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸酯）;围绕ZIF-8的形貌结构、pH响应特征、对细胞毒性和自噬的影响,以及体内抗肿瘤效果展开研究,以期为ZIF-8药物载体在医药、材料等领域的应用提供一定的实验和理论依据。全文主要工作及其成果如下:系统测定了顺铂分别与雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤联合后对HeLa细胞自噬效果的影响,观察到顺铂联合自噬特异药物后其细胞毒性及对细胞自噬的促进能力有所增强。通过光谱法获得了顺铂联合药物与HSA相互作用的热力学函数。用等温滴定量热仪跟踪测量了顺铂、雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤作用下的细胞放热功率变化,在透射电子显微镜下同步观察细胞内自噬体。结果显示,细胞自噬被促进时,其放热速率提高,同时细胞中的自噬泡明显增加。合成了一种基于ZIF-8的pH响应型纳米粒子,用于输送3-甲基腺嘌呤（3-MA）... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

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图１．１细胞自噬的示意图

浙江大学博士学位论文?第１章绪论??＼?７??Ａｔｉ％３?ＭＡ?／?ｌ＾ｔ＇ｏｎｄｒｉａ＇＇＊?Ｊ??．；：攻、?￣??ＣＱ?‘，４??卜ｙ?Ｄ＆＊ｍｉ＾ｅｃｌ?ｎ＇ｊｔｏｃ／ＫＸｖ＞ｖＪ??｜?Ｆｏ＾Ａｕ??Ｖ?’?ｃｉｈｉＭｏｎ?Ｊ??Ｃｒｆｌ?ｄ＾ａｔｈ?ｏｒ?ｇｒｏｗｔｈ?ａｒｒｒ＾ｌ?＾＾??Ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ?Ｈｅａｌｔｈｙ?ｃｅ＾ｌｓ??图１．２Ｆｅ＠Ａｕ通过线粒体介导自噬选择性地引起细胞毒性。［４７］??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｆｅ＠Ａｕ?ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｅｌｓ?ｌｅａｄ?ｔｏ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ?ｔｈｒｏｕｇｈ?ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ??ａｕｔｏｐｈａｇｙ．??１．２．３细胞自噬的检测手段??在自噬过程中，半碗状的双层膜结构延展并融合形成闭合的自噬体。然后，??与溶酶体融合生成了自噬溶酶体，降解自噬体内由于病理或生理原因损伤的细胞??器及其他的细胞结构或过量储存的营养物质等来满足细胞代谢的需求，从而维持??细胞稳态。目前普遍采用的自噬检测方法包括透射电子显微镜、免疫荧光、蛋白??印迹等方法可检测自噬体的生成及自噬标志蛋白。［４８］自噬的研究发展也提高了??自噬的检测要求，检测自噬体形态和动态观察自噬的降解过程（即自噬流分析）??可精确评估包括降解障碍和自嗤体形成在内的自嗤功能障碍，全面准确地评测自??６??

浙江大学博士学位论文?第１章绪论??￣￣?．?．?？?乂，ｒ?．?．．‘乂，＜??．?＇：，您＞＇．：．，輪?ｒ??，．表ｒ??．．？Ｖ?Ｉ：?．“．．４??参…：」ｙ：觀??ｉＭｆｅａ??图１．３?ＴＥＭ下观察小鼠的纤维母细胞。其中单箭头代表双层膜结构的自噬体，双??箭头代表自溶酶体。箭头所指的碎片为自噬体货物。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?ＴＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｓｔａｒｖｅｄ?ｍｏｕｓｅ?ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ．?Ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ??ｄｏｕｂｌｅ－ｍｅｍｂｒａｎｅｄ?ａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍｅｓ，?ａｎｄ?ｄｏｕｂｌｅ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ??ａｕｔｏｌｙｓｏｓｏｍｅｓ／ａｍｐｈｉｓｏｍｅｓ．?Ａｒｒｏｗｈｅａｄｓ?ｄｅｓｉｇｎａｔｅ?ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ?ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ?ｄｅｂｒｉｓ?ａｓ??ａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍａｌ?ｃａｒｇｏ．??②检测自噬体标记蛋白ＬＣ３??微菅相关蛋白?１?轻链３（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?１?ｌｉｇｈｔ?ｃｈａｉｎ?３，?ＬＣ３／Ａｔｇ８）??作为位于自噬体膜上的自噬体标记蛋白，在细胞内以两种形式存在：ＬＣ３－Ｉ和??ＬＣ３－ＩＩ。细胞中ＬＣ３蛋白被合成后，Ａｔｇ４蛋白酶会切割ＬＣ３的Ｃ端使其变成ＬＣ３－Ｉ，??散布于细胞内。在细胞中形成自嗤体后，鱗脂酰乙醇胺（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ）??和ＬＣ３－Ｉ偶联形成ＬＣ３－ＩＩ，其主要位于自噬体内外膜上。区别于其他位于自噬膜??上的Ａｔｇ蛋白仅影响自噬的某些阶段不同，ＬＣ３－ＩＩ能稳定地存在于自噬体膜上直??到其与溶酶体进行融合


本文编号：3543387