抑制xCT通过诱导铁死亡逆转肺腺癌细胞对顺铂耐药的研究
发布时间：2022-01-23 05:36
目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,长期居于癌症相关致死率的首位。其中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）是肺癌中最常见的类型,约占85%。尽管外科手术是NSCLC的首选治疗,但术后仍有较高复发率,而且大部分中晚期NSCLC失去手术机会,因此多疗程化疗是决定患者生存期限的重要辅助治疗手段。以顺铂（Cisplatin,CDDP）为核心化疗方案的快速耐药是预后不良的重要原因。因而,探索有效辅助治疗方案成为延长患者生存率和改善患者预后的关键。顺铂主要通过形成顺铂-DNA复合体,激活DNA损伤,进而诱导肿瘤细胞凋亡;顺铂诱导恶性肿瘤细胞发生程序性死亡的另一个重要机制就是上调细胞内的活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,破坏细胞内稳态,造成氧化应激（oxidative stress）,氧化/抗氧化失衡,从而诱导肿瘤细胞凋亡。以肺腺癌为代表的多种肿瘤细胞存在凋亡通路信号转导障碍、抗凋亡蛋白被激活以及受到多药耐药基因高表达的影响,对凋亡机制的耐药十分明显,以往大多针对信号转导障碍靶点研发新药或者多种化疗药物联合应用,来解决原发...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：100 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同浓度顺铂处理四种人NSCLC细胞的存活率
14图 3.2 顺铂对人 NSCLC 细胞 Nrf2 及下游靶基因和蛋白表达的影响(A) (B)分别代表 A549 和 N5 细胞暴露于 20 μg/mL 顺铂 3 到 12 小时。采用 RT-qPCR 方法测定 Nrf2, xCT, HO-1 和 NQO1 的 mRNA 表达情况，以 GAPDH 作为标准化。(C) 代表 A549细胞暴露于 20 到 40μg/mL 顺铂 12 小时。采用 Westernblotting 方法测定 Nrf2 和 xCT 蛋白表达情况，以 LaminB 作为内参。所有数据以均数 ± 标准误差表示，来自至少 3 次独立实验。组间差异采用单因素方差分析和 Bonferroni 事后检验。*和#代表 P<0.05。
中国医科大学博士学位论文顺铂对人肺腺癌细胞 Nrf2 的转录能力的影响转录因子 Nrf2 通过与下游靶基因启动子中的抗氧化反应元件（antinsive element，ARE）结合，诱导下游基因的转录。所以，为了更进一步 Nrf2 转录能力的调节作用，我们用含有 ARE 双荧光素酶的报告基因质了 A549 和 N5 细胞，分别经 20 μg/mL 顺铂处理 12 h。结果显示顺铂 报告基因活性，并且相对于 N5 细胞，顺铂对 A549 细胞中 Nrf2 转录能更为显著(图 3.3)。
本文编号：3603706
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：100 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
不同浓度顺铂处理四种人NSCLC细胞的存活率
14图 3.2 顺铂对人 NSCLC 细胞 Nrf2 及下游靶基因和蛋白表达的影响(A) (B)分别代表 A549 和 N5 细胞暴露于 20 μg/mL 顺铂 3 到 12 小时。采用 RT-qPCR 方法测定 Nrf2, xCT, HO-1 和 NQO1 的 mRNA 表达情况，以 GAPDH 作为标准化。(C) 代表 A549细胞暴露于 20 到 40μg/mL 顺铂 12 小时。采用 Westernblotting 方法测定 Nrf2 和 xCT 蛋白表达情况，以 LaminB 作为内参。所有数据以均数 ± 标准误差表示，来自至少 3 次独立实验。组间差异采用单因素方差分析和 Bonferroni 事后检验。*和#代表 P<0.05。
中国医科大学博士学位论文顺铂对人肺腺癌细胞 Nrf2 的转录能力的影响转录因子 Nrf2 通过与下游靶基因启动子中的抗氧化反应元件（antinsive element，ARE）结合，诱导下游基因的转录。所以，为了更进一步 Nrf2 转录能力的调节作用，我们用含有 ARE 双荧光素酶的报告基因质了 A549 和 N5 细胞，分别经 20 μg/mL 顺铂处理 12 h。结果显示顺铂 报告基因活性，并且相对于 N5 细胞，顺铂对 A549 细胞中 Nrf2 转录能更为显著(图 3.3)。
本文编号：3603706
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