N-聚糖分析方法开发及其在癌症标志物研究中的应用

发布时间：2022-01-23 08:45

　　近年来,在诸多癌症中均观察到血清N-聚糖的异常变化,表明血清N-聚糖能够作为癌症诊断的新型生物标志物。然而,鉴于天然N-聚糖的性质,在N-聚糖标志物研究中仍面临诸多挑战。因此,本文建立了多种衍生策略用于N-聚糖的定性定量分析,并对特异性癌症标志物进行筛选。主要研究内容如下:将甲胺化和还原化双衍生策略同nano LC-ESI-MS相结合用于血清N-聚糖异构体的分离分析。通过对胰腺癌和健康样本血清N-聚糖异构体进行统计,筛选出25个具有显著差异的异构体,其中4个异构体的AUC值超过0.90,表现出较高的诊断准确度。另外,这些异构体还被用于胰腺癌早期诊断研究。与数据归一化不同,本文将d0/d5-苯甲酰氯和甲胺化共衍生策略用于N-聚糖定量分析,更直观地展现N-聚糖的变化。利用微波辅助快速酶切实现糖胺的快速释放,有效缩短了分析流程。此外,天然酸性N-聚糖在MALDI-MS中会发生源内或源后裂解,而甲胺化不仅能稳固唾液酸,还能提高N-聚糖的信号响应,进而实现中性糖和酸性糖的同时定量分析。以不同的摩尔比对核糖核酸酶B（RNase B）N-聚糖进行分析,其线性相关系数均超过了0.9992,展现了良好的... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：158 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

酶系统驱动的聚糖合成[1]

华中科技大学博士学位论文3类型的不同，又可将N-聚糖分成三个亚型：高甘露糖型（high-mannose）、杂合型（hybrid）和复合型（complex）[4]。O-聚糖也有其特有的连接方式，它通过糖链核心区的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）与Ser/Thr相连。另外，机体内的糖基转移酶会对O-聚糖的核心结构进行更为精细的修饰，丰富了其类型。糖胺聚糖是一种能够维系机体抗压能力的多糖，由诸多二糖单位构成，其与蛋白链结合后便形成另外一种糖缀合物—蛋白聚糖（proteoglycan），它与糖蛋白是有区别的，后者更为复杂。图1-2.聚糖类型[2]。Figure1-2.Typesofglycan[2].在上述几种聚糖中，N-聚糖一直都是糖组学研究的热点，其在结构和功能上往往具有多样性，并且在机体微环境作用下，这种多样性往往是呈动态变化的。另外，许多研究已经证实N-聚糖的差异性变化与疾病之间存在着密切联系。因而，对N-聚糖的深入研究将有助于临床医学的发展，为有效探索其背后的生物学机理提供了契机。

华中科技大学博士学位论文4图1-3.N-聚糖核心五糖结构[3]。Figure1-3.CorepentasaccharidestructureofN-glycan[3].图1-4.N-聚糖类型[4]。Figure1-4.TypesofN-glycans[4].


本文编号：3604001