MicroRNA 381通过LRRC4调节SDF-1/CXCR4信号通路促进脑淋巴管阻塞后急性脑缺血神经损伤的修复

发布时间：2022-10-23 19:23

　　背景/目的:急性脑缺血是脑血管功能不全的表现,死亡率高。然而,对急性脑缺血的治疗仍然有限。本研究旨在探讨micro RNA 381（mi R-381）通过LRRC4调节SDF-1/CXCR4信号通路对大鼠脑淋巴管阻塞（CLB）后的急性脑缺血神经损伤修复的影响。方法:建立大鼠CLB和大脑中动脉闭塞模型,将56只Wistar大鼠分为假手术组、MCAO组、CLB+MCAO+micro RNA 381抑制剂组、CLB+MCAO+micro RNA 381模拟组、CLB+MCAO+AMD3100和CLB+MCAO+micro RNA 381模拟+AMD3100组。改良神经严重度评分（m NSS）用于评估神经损伤,TTC染色用于测定梗死体积,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记（TUNEL）染色和流式细胞术用于评价细胞凋亡,免疫荧光法用于测定Brd U阳性细胞数,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、神经生长因子（NGF）和神经突生长抑制因子-A（Nogo-A）等,逆... 

【文章页数】：95 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
前言
中文摘要
Abstract
中英文缩略词对照表
第1章 综述
    1.1 急性脑缺血(缺血性脑卒中)
        1.1.1 缺血性脑卒中的定义及流行病学特点
        1.1.2 缺血性脑卒中的发病机理及病理改变
        1.1.3 缺血性脑卒中对于细胞凋亡的影响
    1.2 MircoRNA在脑缺血中的作用
        1.2.1 MicroRNA的定义及生物学作用
        1.2.2 MicroRNA在脑缺血中的表达及发生、发展、修复过程中的作用
    1.3 SDF-1/CXCR4信号通路在脑缺血中的作用
        1.3.1 SDF-1/CXCR4信号通路的定义
        1.3.2 SDF-1/CXCR4信号通路的生物学作用
        1.3.3 SDF-1/CXCR4信号通路与Micro RNA的关系
        1.3.4 SDF-1/CXCR4信号通路在脑缺血中的作用
    1.4 LRRC4在脑缺血中的作用
        1.4.1 LRRC4的定义
        1.4.2 LRRC4在胶质瘤中的作用
    1.5 脑淋巴管回流
        1.5.1 脑淋巴管的定义及生理
        1.5.2 脑淋巴管回流障碍与脑缺血的关系
    1.6 与脑缺血相关的个别基因及蛋白
        1.6.1 VEGF在脑缺血中的正性保护作用
        1.6.2 ERK在脑缺血中的正性保护作用
        1.6.3 Slit2在脑缺血中的正性保护作用
        1.6.4 Nogo-A在脑缺血中的负性作用
        1.6.5 NGF在脑缺血中的正性保护作用
        1.6.6 IL-10 在脑缺血中的正性保护作用
        1.6.7 TNF-α、IL-1β、IL-6在脑缺血中的负性作用
    1.7 本研究所涉及的特殊试剂
    1.8 立项依据
第2章 材料与方法
    2.1 主要实验材料
    2.2 主要仪器
    2.3 双荧光素酶报告基因分析
    2.4 动物模型的建立
        2.4.1 动物的选择
        2.4.2 实验分组
        2.4.3 脑淋巴管阻塞动物模型的制作
        2.4.4 大脑中动脉阻塞动物模型的制作
    2.5 改良神经严重度评分(m NSS)
    2.6 2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色
    2.7 苏木精-伊红(HE)染色
    2.8 末端脱氧核苷酸转移酶(Td T)介导的缺口末端标记(TUNEL)染色
    2.9 微管相关蛋白 2(MAP2)染色
    2.10 流式细胞术
    2.11 免疫荧光
    2.12 酶联免疫吸附试验(ELISA)
    2.13 逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)
    2.14 蛋白印迹法(Western blotting)
    2.15 统计分析
第3章 结果
    3.1 LRRC4是microRNA 381 的靶基因
    3.2 大鼠模型的建立及神经功能评分
    3.3 microRNA 381 上调、LRRC4下调减少脑梗死体积
    3.4 各组大鼠神经元形态学变化
    3.5 microRNA 381 上调和LRRC4下调减少细胞凋亡
    3.6 microRNA 381 的上调和LRRC4的下调降低神经元细胞凋亡
    3.7 各组大鼠Brd U阳性表达
    3.8 各组大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、NGF和Nogo-A的含量
    3.9 各组大鼠脑组织microRNA 381 表达及LRRC4、SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2、VEGF m RNA的表达
    3.10 各组大鼠脑组织中LRRC4、SDF-1、CXCR4、ERK、Slit2和VEGF的蛋白表达
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]电针对局灶性脑缺血大鼠弓状核Gas7和NGF表达的影响[J]. 赵健,丁见,黄锐,吴锋,李怀斌.  中国针灸. 2019(11)
[2]Constraint-induced movement therapy enhances angiogenesis and neurogenesis after cerebral ischemia/reperfusion[J]. Zhi-Yong Zhai,Juan Feng.  Neural Regeneration Research. 2019(10)
[3]头穴透刺对局灶性脑缺血大鼠海马CA1区酸感受离子通道1a、2b表达的影响[J]. 田亮,王金海,赵敏,鲍英存,商俊芳,鄢琦,张振昶,杜小正,姜华,孙润洁,袁博,张星华,张婷卓,李兴兰.  针刺研究. 2016(05)
[4]富亮氨酸重复超家族新成员LRRC4的克隆与在脑瘤中的表达分析[J]. 王洁如,钱骏,董利,李小玲,谭琛,李江,张必成,周洁,李桂源.  生物化学与生物物理进展. 2002(02)



本文编号：3696982