CXXC4通过上调GDF15转录表达抑制胃癌发生发展的作用机制研究以及相关临床分析

发布时间：2024-06-10 17:49

　　研究背景胃癌(Gastric Cancer,GC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,严重危害全球人类的健康。近年来,尽管临床上胃癌的诊断和治疗已经取得了巨大的进展,但其发病率及死亡率在全世界范围内依旧位列所有肿瘤中的第四及第二位。流行病学研究表明,我国胃癌患者具有分期晚、复发率高和预后差等特点,总体治疗效果不佳,患者的5年生存率较低。因此,找寻新型有效的胃癌治疗策略刻不容缓。众所周知,胃癌的发生发展是一个多阶段、多因素渐进性积累的复杂过程,遗传、环境等多因素均参与其中。其中,遗传学以及表观遗传学的改变发挥着至关重要的作用。癌基因的异常活化以及抑癌基因的异常失活导致许多与细胞增殖、分化、周期和命运相关的重要信号通路的活性发生了改变,最终造成胃癌的发生。CXXC指蛋白4(CXXC finger protein 4,CXXC4)最早在肾细胞癌中作为经典Wnt信号通路的负向调控因子而引起研究者的广泛重视。CXXC4含有一个特殊的CXXC锌指结构域,大量研究证实该结构域可以与DNA结合并调控基因的转录表达。本课题组的前期研究发现CXXC4是一个新型的胃癌相关肿瘤抑制因子,其在胃癌组织中低表达,且其表...

【文章页数】：110 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１：?ＣＸＸＣ４通过激活细胞凋亡从而抑制胃癌细胞生长

的胃癌ＳＧＣ７９０１细胞株（ＳＧＣ７９０１－ＷＴ），未用Ｄｏｘ处理的ＳＧＣ７９０１细胞作为正常??对照组。结果发现，随着Ｄ〇Ｘ作用时间的增加，处理组细胞内ＣＸＸＣ４的表达水平??逐步上升（图１Ａ），ＭＴＳ细胞存活实验发现ＣＸＸＣ４过表迗后胃癌细胞的增殖能力??受到了显著的抑制，与....

图２：?ＣＸＸＣ４定位于细胞核并通过其ＤＮＡ的结合区域激活细胞凋亡

?实验结果??发现ＣＸＸＣ４主要定位于细胞核中（图２Ａ）。免疫荧光实验同样证实ＣＸＸＣ４主??要定位于细胞核内（图２Ｂ）。为了检测ＣＸＸＣ４的ＤＮＡ结合能力，我们采用酵母??双杂交实验。用含有ＤＮＡ转录活性区域（ＡＤ）的载体ｐＧＡＤＴ７和含有ＤＮＡ綁??定区域（ＢＤ）的载体ｐＧＢ....

图３：鉴定出ＧＤＦ１５是ＣＸＸＣ４下游的潜在靶基因

?实验结果??ｓｉ－ＣＸＸＣ４－２＃）发现可以一定程度上逆转ＧＤＦ１５ｍＲＮＡ水平的上调（图３Ｆ），在蛋??白水平上ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ实验也得到了相同的结果（图３Ｇ）。综上所述，ＧＤＦ１５确实??是ＣＸＸＣ４下游的潜在靶基因。??Ａ?Ｂ?．?＇Ｊ??ＧＣＮＴ１??ＴＭＣＭ１....

图４：?ＣＸＸＣ４通过上调ＧＤＦ１５表达激活细胞调亡

实验结果??先，在ＳＧＣ７９０１－ＭＯＣＫ细胞中通过转染３ｘ?ＦＬ?ＡＧ－ＧＤＦ１５质粒实现ＧＤＨ?５过表达，??发现细胞凋亡相关信号分子Ｃｌｅａｖｅｄ－ＰＡＲＰｌ的表达水平升高（图４Ａ）。将携带ＦＬＡＧ??标签的ＧＤＦ１５慢病毒感染ＳＧＣ７９０１－ＭＯＣＫ细胞，用嘌呤霉素（ｐｕ....

本文编号：3991682