电针对Ghrelin介导的FD大鼠脑肠轴失衡调节作用的实验研究

发布时间：2017-07-05 08:02

  本文关键词：电针对Ghrelin介导的FD大鼠脑肠轴失衡调节作用的实验研究

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【摘要】：目的:以Ghrelin介导的脑肠轴失衡机制为中心,观察电针对FD模型大鼠一般情况评分、胃残留量和小肠墨汁推进率、脑肠肽Ghrelin及其受体在胃窦、下丘脑和海马组织的表达。探讨Ghrelin在FD发病中的作用以及电针对Ghrelin介导的FD大鼠脑肠轴失衡的调节作用。方法:选取体重为180±20g的SPF级SD大鼠80只。实验前所有大鼠置于鼠笼常规适应性喂养一周后,随机数字表法将80只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、药物干预组和电针干预组,每组20只。正常对照组造模期间远离造模环境,避免造模环境干扰,余三组大鼠采用夹尾造模法复制FD模型大鼠。治疗阶段,正常对照组和模型对照组大鼠每日定时抓捕,不进行任何其它处理;药物干预组大鼠采用西沙比利片稀释的西沙比利溶液灌胃治疗,日一次,连续治疗6次为一个疗程,休息一天后进入第二个疗程,共治疗2个疗程;电针干预组大鼠每日针刺双侧“足三里”穴(直刺0.3-0.5寸)和“太冲”穴(斜刺0.1-0.2寸),快速捻转至针下沉涩感后,接韩式穴位神经刺激仪:等幅疏密波、频率2/15Hz、强度2mA,部分大鼠可见以下肢轻微颤抖。每次30min,日一次,连续治疗6次为一个疗程,休息一天后进入第二个疗程,共治疗2个疗程。观察电针对FD大鼠一般情况评分、体重日增长、进食、饮水量、胃内残留率、小肠墨汁推进率相关指标;运用显微镜观察胃窦平滑肌组织病理形态学;采用酶联免疫吸附测定法检测血浆Ghrelin浓度值;运用免疫组化法观察各组大鼠胃、下丘脑和海马Ghrelin蛋白的表达;采用实时定量荧光PCR法观察各组大鼠胃、下丘脑和海马GHS-R mRNA的表达。结果:(1)和正常对照组相比,FD模型大鼠在造模阶段一般情况评分、日增长体重、日进食量、日饮水量均明显下降(P0.01);在治疗阶段,通过电针和药物治疗后,电针干预组和药物干预组大鼠一般情况评分、日增长体重、日进食量、日饮水量均较前增加,和同组造模阶段相比有统计学差异(p0.05,p0.01);而且,电针干预组大鼠日增长体重较药物干预组进一步增加(p0.01)。(2)各组大鼠胃肠组织形态学未发现器质性改变,肉眼观察仅模型对照组胃黏膜颜色偏白,余三组胃组织黏膜未见溃疡、出血或炎症反应,在光镜下检查(×400)发现仅模型对照组胃组织有少许中性粒细胞。(3)和正常对照组相比,fd模型大鼠胃内残留率增加(p0.05),小肠墨汁推进率下降(p0.01),与模型组比较,电针干预组和药物干预组大鼠胃内残留率均明显减少(p0.01),小肠墨汁推进率明显上升(p0.01),电针干预组和药物干预组组间比较差异没有显著性。(4)和正常对照组相比,fd模型大鼠外周血浆、胃、中枢下丘脑和海马组织中ghrelin浓度均下降(p0.05),电针可以上调fd模型大鼠外周血浆、胃组织、中枢下丘脑和海马组织中ghrelin含量(p0.05、p0.01),但药物西沙比利溶液仅能上调fd大鼠胃和海马组织中ghrelin含量(p0.05),不能上调大鼠外周血浆、中枢下丘脑和ghrelin含量(p0.05)。(5)与正常对照组比较,fd模型大鼠胃、下丘脑和海马组织ghs-rmrna表达均下降(p0.05);与模型对照组比较,药物干预组和电针干预组胃组织、下丘脑组织、海马组织ghs-rmrna表达上升明显(p0.05);与药物干预组比较,电针能明显促进海马组织ghs-rmrna表达。结论:(1)夹尾法复制fd大鼠一般情况评分、体重日增长和日进食量降低,胃内残留率增加,小肠墨汁推进率下降,外周血浆、胃黏膜、下丘脑和海马组织中ghrelin浓度、胃、下丘脑和海马组织ghs-rmrna表达均下降。fd大鼠脑肠轴这座桥梁上的信使之一ghrelin及其受体表达低于正常,ghrelin参与了fd大鼠脑肠轴失衡。(2)电针和西沙比利溶液均能有效改善fd大鼠的一般情况评分、促进进食和体重日增长、促进胃排空和小肠推动力,在改善一般情况评分和体重日增长方面电针明显优于西药组,为电针替代西药治疗fd提供实验依据。(3)电针可显著促进fd大鼠外周血浆、胃组织、中枢下丘脑、海马组织中ghrelin蛋白表达,而西沙比利仅能促进外周胃组织和中枢海马组织ghrelin蛋白表达,对fd大鼠外周血浆、下丘脑ghrelin蛋白表达没有影响,提示电针对ghrelin的调控是多方面的,优于药物干预组。(4)电针和西沙比利溶液都可显著促进fd大鼠胃、下丘脑和海马组织ghrelin受体(ghs-r)mrna的表达,但在调节海马组织ghrelin受体(ghs-r)mrna的表达方面,电针组优于西沙比利组以上结果说明:电针对脑肠轴中ghrelin及其受体表达优于西药组,可能是电针调控fd的作用机制之一。
【关键词】：功能性消化不良 促胃生长素Ghrelin 电针 胃 下丘脑 海马
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245
【目录】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-13
• 英文缩略词表13-14
• 前言14-17
• 实验一 电针对FD大鼠行为学的影响17-31
• 1.材料与方法17-23
• 2.结果23-28
• 3.讨论28-31
• 实验二 电针对FD大鼠促胃肠动力的影响31-39
• 1.实验动物与材料31-34
• 2.结果34-37
• 3.讨论37-39
• 实验三 电针对FD大鼠脑及胃组织中Ghrelin蛋白表达的影响39-46
• 1.材料与方法39-42
• 2.结果42-44
• 2.1 电针对各组大鼠胃组织Ghrelin蛋白表达的影响42-43
• 2.2 电针对各组大鼠下丘脑组织Ghrelin蛋白表达的影响43-44
• 2.3 电针对各组大鼠海马组织Ghrelin蛋白表达的影响44
• 3.讨论44-46
• 实验四 电针对FD大鼠脑及胃组织中GHS-R mRNA表达的影响46-54
• 1.材料与方法46-49
• 2.结果49-52
• 2.1 电针疗法对各组大鼠胃组织GHS-R mRNA表达的影响49-50
• 2.2 电针疗法对各组大鼠下丘脑组织GHS-R m RNA表达的影响50-51
• 2.3 电针对大鼠海马组织 GHS-R m RNA 表达的影响51-52
• 3.讨论52-54
• 讨论54-79
• 1 中医学对功能性消化不良疾病的认识54-62
• 1.1 中医学对功能性消化不良病名的历史沿革54
• 1.2 中医学对FD病因病机的认识54-55
• 1.3 FD中医证型研究55-56
• 1.4 中医学对情志因素在FD发病中的认识56-58
• 1.5 中医学对脑肠轴的认识58-62
• 2. 西医学对功能性消化不良疾病的认识62-65
• 2.1 FD的概念和流行病学研究62
• 2.2 FD的发病机制62-63
• 2.3 精神心理因素在FD发病中的作用63-65
• 3.“脑--肠轴”与FD65-70
• 3.1 什么是“脑--肠轴”65
• 3.2 Ghrelin65-67
• 3.3 Ghrelin的中枢作用部位主要在下丘脑67
• 3.4 下丘脑对胃肠道的调节67-68
• 3.5 Ghrelin对胃肠道的调节68-70
• 4.FD的治疗现状70-71
• 5.电针治疗FD的理论依据71-75
• 6.模型选择依据75-78
• 7.本研究创新点78-79
• 结语79-81
• 参考文献81-90
• 附录一 在校期间发表的主要论文90-91
• 附录二 综述91-102
• 参考文献100-102
• 致谢102

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本文编号：521085