大苞鞘石斛快繁体系构建及多倍体诱导

发布时间：2017-11-12 06:07

  本文关键词：大苞鞘石斛快繁体系构建及多倍体诱导

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【摘要】：石斛属(Dendrobium)植物具不仅具有极高的药用价值,而且大部分具有极高的观赏价值。近年来,由于人们不合理采挖和生镜的破坏,野生石斛资源日益稀少,处于濒危状态。随着人们生活水平和审美需求的提高,对植物多样性、观赏价值和栽培特性的要求也逐渐提高。现在广泛栽培的观赏石斛多是通过原生种杂交选育出来的优良品种。我国在石斛属植物育种方面的研究较西方国家落后,近几年才出现一些学者开展杂交育种和倍性育种的研究。因此,本研究选择观赏价值和药用价值都很高的大苞鞘石斛(D.wardianum)为材料,观察其在引种地的生物学特性和适应性,开展其组培快繁和多倍体育种的研究,以期为野生石斛属植物的保护、开发、利用和种质创新提供理论和实践依据。主要研究结果如下：1.大苞鞘石斛在引种地花期为4-5月,单花花期可达15-20 d；在7-8月,因高温湿热,假鳞茎腐烂严重,在林内郁闭度较高的生境中受害较轻。大苞鞘石斛自交高度亲和,不存在自动的自花授粉,人工自花授粉、同株异花授粉、异株异花授粉的坐果率分别为85.71%、76.67、84.21%,自然条件下的结果率为14%,存在传粉昆虫。不同授粉方式产生的种子生活力差异较大,TTC检测结果以同株异花授粉的种子活力最高,可达59.99%；异株异花授粉的种子活力次之,为51.55%；自花授粉和自然结果的种子生活力最低,分别为3.94%和0.00%。种子萌发法测得的种子活力较TTC法的高,同株异花授粉、异株异花授粉、自花授粉和自然结果的种子生活力分别为60.73%、57.60%、4.00%、1.27%。2.大苞鞘石斛胚培养及植株再生研究结果表明,大苞鞘石斛种胚萌发和原球茎膨大的最适培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1,萌发率达91.29%；叶芽分化的最适培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1；干物质积累的最适培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥200g.L-1；丛生芽增殖的最佳培养基为1/2MS+BA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1+香蕉泥100 g·L-1,平均增殖系数达6.33；丛生芽生根培养的最佳培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1+土豆泥50 g·L-1。3.大苞鞘石斛不定芽诱导和原球茎悬浮培养研究结果表明：大苞鞘石斛不定芽增殖和诱导的最佳培养配方为1/2MS+NAA 0.5mg·L-1+IBA 0.2mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1,增殖系数达5.07,不定芽诱导率达100%,新芽整齐健壮；不定芽诱导的最佳基本培养基为TH培养基,不定芽诱导率为100%,增殖系数达到6.0。适合大苞鞘石斛原球茎悬浮培养的基本培养基为B5和MS培养基,其增殖系数分别为4.310和4.028,多糖含量分别为7.08%和7.12%；添加物为香蕉+椰子汁时,增殖系数和多糖含量最高,分别为3.91和9.97%；适合原球茎悬浮培养的激素组合为NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 0.2 mg·L-1。4.大苞鞘石斛多倍体诱导结果表明,浸泡法以秋水仙素浓度为0.10%,处理时间为12h,诱变率最高,达26.0%,死亡率较低；混配法以秋水仙素浓度为0.03%的诱导效果最好,诱变率达34.0%。秋水仙素浓度和处理时间对植株的死亡率有重要影响,随着秋水仙素浓度和处理时间的增加而增高。秋水仙素对植株后期培养有毒害作用,混配法较浸泡法持续时间长,经多代培养后的生长性状仍表现出明显的毒副作用。大苞鞘石斛多倍体植株与二倍体植株存在明显差异：形态上表现为植株粗矮、节间短、叶片宽厚,且生长缓慢；细胞学水平上表现为气孔和保卫细胞增大,单位面积气孔数减少；染色体水平上表现为二倍体细胞的染色体为2n=2x=38,四倍体细胞的染色体数则为2n=4x=76。
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S682.31

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本文编号：1174638