黑龙江部分地区肉牛大肠杆菌耐药基因与毒力基因检测及耐药性分析

发布时间：2017-12-11 04:08

本文关键词：黑龙江部分地区肉牛大肠杆菌耐药基因与毒力基因检测及耐药性分析

【摘要】：大肠杆菌(Escherichia coli)是一种人畜共患的重要食源性病原菌,随着抗菌药物的大量使用,其耐药性和危害日趋严重,严重威胁着人畜健康。我国肉牛养殖量位居国际第三位,伴随国家粮改饲政策的实施,适度规模化养殖将逐渐成为行业主体。但近年来关于规模化牛场大肠杆菌引起犊牛腹泻、出血性肠炎、败血症等的报道日渐增多,大肠杆菌超级耐药菌株、耐药性及其危害引起关注。因此,对肉牛源致病菌大肠杆菌毒力基因、耐药基因和耐药性的检测和分析,对于有效预防和控制大肠杆菌病具有重要的现实意义。本研究首先从黑龙江省不同地区腹泻犊牛分离鉴定获得71株大肠杆菌,通过PCR方法对分离株进行LEE毒力岛(eae A)、耶尔森毒力岛或致病岛(Fyu A、irp2)、菌毛(K88、K99、F41、F18、987P)、不耐热肠毒素(LT)、耐热肠毒素(Sta、Stb)、溶血素基因(hyl A)、志贺毒素(Stx1、Stx2)等14种毒力基因进行检测,结果表明69%分离株携带毒力基因,irp2基因检出率最高(49.3%);其次是Fyu A(47.9%),F41和Stx1检出率为15.5%,K99、hyl A、Sta检出率为1.41%。未能检测出LT、Stb、K88、F18、Stx2、987P毒力基因。采用Kirby-Bauer纸片扩散法对71株大肠杆菌进行药敏试验,结果显示,71株大肠杆菌对青霉素、氨苄西林、四环素、甲氧苄啶等药物具有较强的耐药性,其中青霉素的耐药率98.4%,氨苄西林的耐药率90.1%,甲氧嘧啶、四环素的耐药率73.2%,多粘菌素耐药率最低1.4%;对多粘菌素B和氟苯尼考较为敏感,分别达87.3%和60.6%。通过PCR的方法对β-内酰胺类bla TEM、bla SHV、bla OXA,氨基糖苷类aac(3′)-IIa、aad A1、aad B,四环素类tet A、tet B、tet C,氯霉素类flo R、磺胺类Sul1、Sul2,喹诺酮类Gyr A、Gyr B、Par C等15种耐药基因进行检测。其中bla TEM、Gyr A和Gyr B检出率最高,为98.6%。其次tet A、Par C检出率为97.2%,aad A1、tet B、Sul2检出率也超过了80%,tet C检出率最低,为2.8%。15种耐药基因型(tet C除外)和耐药表型的阳性符合率大于50%。综上所述,黑龙江部分牛场大肠杆菌分离株的多重耐药性及耐药基因的存在情况较为普遍,耐药性与耐药基因的检出率基本呈正相关。从临床出现腹泻症状犊牛粪便分离的大肠杆菌多数携带数量不一的毒力基因。检出的菌毛毒力基因以K99、F41为主,肠毒素毒力基因以Sta为主。本研究对人畜共患大肠杆菌病的预防和控制提供了理论指导。
【学位授予单位】：黑龙江八一农垦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S852.61

【参考文献】

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