PTHLH在鸡卵泡发育中的功能、表达调控及其与产蛋性能的关系

发布时间：2017-12-19 04:15

  本文关键词：PTHLH在鸡卵泡发育中的功能、表达调控及其与产蛋性能的关系

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【摘要】：甲状旁腺激素样激素(PTHLH)最初被认为是引起恶性肿瘤伴发的体液高钙血症的主要原因,能通过自分泌、旁分泌、细胞内分泌等方式起作用,生物学功能涉及钙转运、骨形成、平滑肌收缩、细胞增殖分化等多个方面。PTHLH与PTH共用一个G蛋白偶联受体PTH1R,该受体在进化过程中高度保守。实验室前期对鸡SY卵泡进行了转录组测序,发现鸡FSHR的mRNA表达水平高的SY卵泡中,PTHLH基因的mRNA水平也升高,推测其可能参与卵泡选择。本实验研究了PTHLH及其受体PTH1R在鸡卵巢卵泡中的表达调控,鉴定了PTHLH启动子区的多态性,并探索了多态性与鸡产蛋性能之间的关系。我们首先通过5′-及3′-RACE确定了PTHLH在鸡上主要表达NCBI上第一转录本。PTHLH与PTH1R mRNA表达一致,在等级前卵泡中表达量逐渐上升,在SY中达到最高,大黄卵泡(LY)中次之,在等级卵泡中表达量显著下降;PTHLH主要在等级前卵泡的膜细胞和等级卵泡的颗粒细胞中表达,而PTH1R在卵泡发育各时期均在膜细胞中表达,他们蛋白水平的表达在各级卵泡及不同时期卵泡的颗粒细胞、膜细胞中的表达无显著差异。PTHLH能刺激细胞增殖,并能促进未成熟卵泡中颗粒细胞的分化,通过刺激类固醇激素合成相关酶如StAR、CYP11A1的产生,促进类固醇激素的产生。用FSH处理原代鸡卵泡颗粒细胞、膜细胞,发现PTHLH的mRNA在等级前卵泡的膜细胞及等级卵泡的颗粒细胞中表达量升高。我们进一步检测了PTHLH的启动子活性,在确定的两个关键调控区各检测到一个SNP:rs72520524(CT)和rs72518862(AG),两个SNP完全连锁不平衡,杂合基因型AG和CT以及双倍型AC/GT对应鸡更早的开产日龄及更多的32周产蛋数。每个SNP均位于一个转录因子的结合位点,两个转录因子共同作用,受FSH调控,作用于PTHLH转录。EMSA实验确定CT(rs72520524)包含于AP-1结合位点,但AG(rs72518862)不包含于NF-κB结合位点中。综上所述,我们的研究首次提出了PTHLH在鸡卵泡中的表达调控,并鉴定了其启动子区的多态性。鸡PTHLH受FSH调控,通过调节细胞增殖、分化,及类固醇的生成在卵泡选择过程中起重要作用。PTHLH基因启动子区的两个多态性位点,通过影响转录因子AP-1等的结合,影响对FSH的应答和鸡的产蛋性能。
【学位授予单位】：山东农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S831

【参考文献】

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1 李园园;郭磊;卢晟盛;韩之明;;甲状旁腺激素样激素在胚胎发育中的作用[J];遗传;2014年09期

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本文编号：1306843