菊花再生及遗传转化体系的研究

发布时间：2017-12-19 21:13

  本文关键词：菊花再生及遗传转化体系的研究　出处：《沈阳农业大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 菊花 叶片 再生 遗传转化

【摘要】：本研究首先获得了菊花品种'436'、'双粉匙'、'K'、'WY29'的无菌苗,然后以4个品种无菌苗幼嫩叶片为试验材料,添加不同浓度配比的植物生长调节剂诱导其分化和生根,建立了高效稳定的再生体系,为菊花的品种改良奠定了理论基础。在此基础上初步建立了 '436'遗传转化体系,为今后菊花品种基因转化的研究提供参考依据。主要研究结果如下:1.菊花再生体系的建立采取菊花品种'436'、'双粉匙'、'K,、'WY29'的顶芽作为外植体,使用0.1%的升汞对其进行消毒,获得无菌苗的最佳消毒时间分别为6 min、6 min、5 min、7 min。'436'、'双粉匙'、'K'、'WY29'的最适增殖培养基分别为MS+0.5mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA;MS+0.5 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 NAA;MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA;MS+0.5mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA。在继代过程中,菊花品种'WY29,培养基内出现内生菌,利用头孢霉素对其进行抑制,头抱霉素抑制菊花'WY29'内生菌的最佳浓度为80 mg·L-1。通过对叶片的诱导分化,'436'的最适分化培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.4 mg·L-1 NAA,再生率高达 92.1%;'K'在最适分化培养基 MS+2.0 mg·L-16-BA+0.2mg·L-1 NAA上不定芽再生率为75.3%;'双粉匙'和'WY29'的再生率较低,分别为37.2%和30.2%。对'436'不定芽进行生根诱导,最适生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1,选择再生率最高的菊花品种'436'作为遗传转化受体继续研究。2.遗传转化体系的初步建立筛选出卡那霉素抑制菊花品种'436'不定芽分化和生根的临界浓度分别为10 mg·L-1和7.5 mg·L-1;头孢霉素抑制农杆菌的最适浓度为200 mg·L-1。用含有表达载体pC4MBL41301-CBL的农杆菌GV3101对菊花品种'436'的无菌苗叶片进行侵染,研究结果表明,菊花品种'436'的无菌苗叶片在经过1 d预培养,OD600≈0.5时侵染10 min,共培养2d,延迟筛选3d时,抗性芽再生率达到最高。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S682.11

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王自布;莫国秀;罗会兰;张德英;;菊花不同外植体组培快繁及其再生体系的研究[J];北方园艺;2015年18期

2 梁芳;王默霏;王洁琼;袁秀云;刘建松;崔波;;菊花高效再生体系的建立及抗生素对叶片分化的影响[J];江苏农业科学;2015年06期

3 何淼;高文杰;高耀辉;吕明月;冯博;孙颖;;农杆菌介导的神农香菊遗传转化体系的建立[J];中药材;2014年08期

4 吴潇波;红歌;赵惠恩;;紫花亚菊(Ajania purpurea)愈伤组织诱导及植株再生体系的建立[J];浙江农业学报;2014年02期

5 董凤丽;刘杰;马欣;刘晨旭;周蕴薇;;露地菊‘纽9717’的茎叶离体快繁体系[J];草业科学;2014年03期

6 徐式近;徐忠传;;不同菊花品种高效直接再生体系的构建[J];江苏农业科学;2013年11期

7 刘鹏;陈素梅;房伟民;蒋甲福;管志勇;陈发棣;;利用卡那霉素筛选菊花转基因植株的方法研究[J];南京农业大学学报;2013年05期

8 许志茹;陈智华;姜艳东;侯杰;佟玲;李玉花;;露地菊离体再生体系建立及BrDFR基因遗传转化[J];园艺学报;2013年08期

9 姜宁宁;付建新;戴思兰;;中国传统菊花品种‘小林静’再生及转化体系的建立[J];生物技术通报;2012年04期

10 于利刚;解莉楠;王江;张e，

本文编号：1309458