牙鲆多聚免疫球蛋白受体与黏膜免疫球蛋白免疫应答动态分析

发布时间：2018-02-23 12:38

  本文关键词： 牙鲆 多聚免疫球蛋白受体(plgR) IgM 黏膜免疫　出处：《中国海洋大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：黏膜免疫系统作为免疫防御的第一道防线,能够参与保护机体免受病原体的侵害。黏膜免疫系统以分泌型免疫球蛋白(slgs)为主要的防御因子。多聚免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor, pIgR)是黏膜免疫中的重要组成成分,其特异性地转运sIgs通过上皮细胞保护机体。因此pIgR的有效分泌是多聚免疫球蛋白发挥黏膜防御功能的必要条件,在黏膜免疫中起着举足轻重的作用。目前对硬骨鱼类pIgR的研究已经日渐活跃,而pIgR与sIgs的免疫应答动态也备受关注。本文利用灭活鳗弧菌(Vibrio anguillarum)通过注射和浸泡两种方式免疫牙鲆(Paralichthys olivaceus),测定了免疫后牙鲆组织中pIgR与IgM基因水平的表达变化,并检测了免疫后牙鲆皮肤黏液、鳃黏液、肠黏液及胆汁中pI及IgM蛋白水平的表达变化,研究了血清、胆汁及三种黏液中的pI-IgM复合物,最后定位pIgR及JgM在牙鲆黏膜免疫相关组织中的分布,为进一步研究硬骨鱼类黏膜免疫机制奠定了基础。本文具体研究结果如下：用灭活鳗弧菌采用注射和浸泡两种方式对牙鲆进行免疫,利用实时荧光定量PCR法对免疫后牙鲆各组织中pIgR及IgM基因水平表达变化进行了测定。结果表明,免疫后的牙鲆各组织中pIgR基因的表达变化趋势与IgM基本一致,都呈现先上调后下调的趋势,然而pIgR基因水平上升比IgM快,到达峰值的时间也比IgM早.在皮肤、鳃和后肠中,浸泡组pIgR的峰值高于注射组,而在其余组织中,则低于注射组;在皮肤和鳃中,浸泡组IgM的峰值高于注射组,而在其余组织中,则低于注射组。利用ELISA法对鳗弧菌免疫后牙鲆pIgR及IgM蛋白水平的表达变化进行检测。结果表明,各免疫组中pIgR与IgM的蛋白水平变化趋势基本一致,在一段时间之内均呈现先上升后下降的趋势,然而pIgR蛋白水平上升比IgM快,到达峰值的时间也比IgM早。在皮肤黏液和肠黏液中,浸泡组pIgR的峰值较注射组高,而在鲤黏液和胆汁中,其峰值较注射组低：在皮肤黏液和鳃黏液中,浸泡组IgM的峰值较注射组高,而在肠黏液和胆汁中,其峰值较注射组低。将牙鲆血清、皮肤黏液、鳃黏液、肠黏液及胆汁在非变性电泳条件下进行Western blot实验。结果显示,抗牙鲆血清IgM单抗2D8和抗牙鲆皮肤黏液单抗1A2与牙鲆血清、皮肤黏液、鳃黏液、肠黏液及胆汁均反应,均在分子量约800kD处出现单一条带；抗牙鲆pIgR多抗与牙鲆皮肤黏液、鳃黏液、肠黏液及胆汁均在约800kDa处发生特异性反应,而与血清无特异性反应。利用抗牙鲆pIgR多抗及抗牙鲆IgM单抗2D8对牙鲆黏膜免疫相关组织皮肤、鳃、后肠及肝脏进行免疫组织化学染色。结果显示,两种抗体的染色结果大体一致,在四种组织中均出现了明显的红色阳性信号,而对照组中均未观察到阳性信号。pIgR阳性信号主要位于皮肤、鳃和后肠上皮细胞和黏液细胞及其表面,鳃和后肠上皮细胞及其基部,以及肝管壁上皮细胞。IgM阳性信号主要位于皮肤、鳃和后肠上皮细胞和黏液细胞,后肠上皮下固有层,肝管壁上皮细胞中。
[Abstract]:In this paper , the expression of pIgR and IgM was detected by injecting and soaking . The results showed that the expression of pIgR and IgM was higher than that in the injection group . The results showed that the results showed that the anti - Japanese serum IgM monoclonal antibody 2D8 and anti - ichthys olivaceus skin mucinous McAb 2D8 reacted with serum , skin mucus , branchial mucus , intestinal mucus and bile at about 800kDa .

【学位授予单位】：中国海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S943

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 葛忠源;熊东艳;张启勇;秦玉成;沈浩彬;;黏膜免疫的研究进展[J];青海畜牧兽医杂志;2008年05期

2 董玉兰,王树迎;动物黏膜免疫细胞研究进展[J];动物医学进展;2003年01期

3 崔萍;于三科;;黏膜免疫佐剂及免疫途径研究进展[J];动物医学进展;2007年02期

4 丁轲;余祖华;王天奇;;肠道黏膜免疫研究进展[J];动物医学进展;2007年10期

5 李彦伸;戴建君;庾庆华;;黏膜免疫佐剂的研究进展[J];中国畜牧兽医;2007年12期

6 智海东;柴文君;杨金雨;解生亮;于向前;;用活载体疫苗诱导动物黏膜免疫的研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2012年08期

7 姜厚涛;吴国华;张强;于亚洲;胡桂学;;动物黏膜免疫的研究进展[J];中国兽医科学;2013年06期

8 范春玲;孙斌;任凤兰;;黏膜免疫佐剂的筛选 Ⅰ.组织学与免疫组织化学研究[J];中国兽医杂志;2008年07期

9 曹立辉,康凯;浅析黏膜免疫在禽疾病中的重要性[J];河北畜牧兽医;2005年02期

10 杨光;王加启;哈斯额尔敦;赵圣国;刘开朗;卜登攀;;牛乳中分泌型IgA的合成机理及提高技术[J];中国畜牧兽医;2009年08期

相关会议论文 前7条

1 陈柏君;熊磊;;论急性上呼吸道感染与黏膜免疫的关系[A];第25届全国中医儿科学术研讨会暨中医药高等教育儿科教学研究会会议学术论文集[C];2008年

2 王金玲;常建军;彭景ii;;精子特异性乳酸脱氢酶(LDH-C4)基因疫苗黏膜免疫不育的研究[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年

3 张辉;焦新安;;鞭毛蛋白嵌合表达结核分枝杆菌ESAT-6的黏膜免疫特性[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

4 张艳丽;李风森;;“肺主皮毛”理论在哮喘、荨麻疹患者发病过程中的体现及与黏膜免疫相关性研究[A];第五届全国中西医结合变态反应学术会议论文集[C];2011年

5 李杭;吴国豪;陈吉;;GLP-2对肠道缺血再灌注后黏膜免疫和相关细胞因子影响的实验研究[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年

6 李风森;徐丹;;哮喘黏膜免疫中“肺鼻同治”理论的体现[A];全国中医内科肺系病第十四次学术研讨会论文集[C];2010年

7 张小飞;杨倩;;几种黏膜免疫佐剂对小肠树突状细胞、MHC Ⅱ类分子及核转录因子NF-kB的影响[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2008年

相关重要报纸文章 前2条

1 黄萍;增强黏膜免疫功能预防癌症[N];人民日报海外版;2006年

2 陈革飞;黏膜抗体防鸡病[N];中国畜牧兽医报;2005年

相关博士学位论文 前4条

1 高燕;肠道传播肝炎病毒的黏膜免疫研究[D];中国疾病预防控制中心;2015年

2 张辉;重组沙门菌表达结核分枝杆菌保护性抗原ESAT-6、CFP-10及其黏膜免疫机理研究[D];扬州大学;2008年

3 刘颂;经典CD103+树突状细胞介导下DNA与脂蛋白竞争性调节黏膜免疫应答的机制研究[D];南京大学;2015年

4 麻粉莲;JY佐剂对人乳头瘤病毒（HPV）和乙肝病毒表面抗原（HBsAg）疫苗黏膜免疫研究[D];中国疾病预防控制中心;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 王淼;口蹄疫乳酸杆菌活载体疫苗的构建及其诱导的黏膜免疫效果[D];中国农业科学院;2015年

2 范肖肖;日粮维生素A添加水平与应激对肉仔鸡呼吸道黏膜免疫的影响[D];山东农业大学;2015年

3 何月;大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的原核表达及其初步应用[D];扬州大学;2015年

4 王占飞;牙鲆多聚免疫球蛋白受体与黏膜免疫球蛋白免疫应答动态分析[D];中国海洋大学;2015年

5 马金萍;新城疫疫苗滴鼻点眼诱导雏鸡体液免疫和黏膜免疫反应的研究[D];吉林农业大学;2014年

6 鲁延刚;牦牛皱胃组织结构及黏膜免疫相关细胞的研究[D];甘肃农业大学;2012年

7 高强;双峰驼大肠黏膜相关淋巴组织的免疫形态学特征及其抗寄生虫感染能力的研究[D];甘肃农业大学;2009年

8 徐勇军;流感疫苗脂质体的制备及黏膜免疫研究[D];昆明医科大学;2012年

9 郑佳玉;BCG与嵌合ESAT-6重组鞭毛蛋白的联合黏膜免疫及其特性分析[D];扬州大学;2010年

10 秦慧娟;基于哮喘黏膜免疫研究“肺开窍于鼻”，，“肺与大肠相表里”理论[D];新疆医科大学;2009年

本文编号：1526650