蒙药当归四味散治疗奶牛子宫内膜炎的抗菌和抗炎作用研究

发布时间：2018-03-01 04:45

  本文关键词： 蒙药当归四味散 乳酸链球菌素 大鼠子宫内膜炎 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 抗菌机理 结肠炎　出处：《内蒙古农业大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：本文旨在通过分离鉴定出患牛的主要致病菌大肠杆菌(Escherichiacoli,E.coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)来建立大鼠子宫内膜炎模型,并研究了蒙药当归四味散(简称当归四味散)和乳酸链球菌素(nisin)对病原菌的抑菌作用机理及其对模型大鼠子宫内膜炎的抗炎作用机制,以及子宫内膜炎诱导大鼠结肠炎症的关系做了详细研究。研究分为4个试验:试验1、对65头确诊为临床型子宫内膜炎荷斯坦奶牛采用棉拭子法采集子宫黏液;采用大鼠子宫灌注法对分离株进行致病性试验、PCR方法鉴定毒力基因以及药敏纸片法检验分离株的耐药情况。结果发现:从患子宫内膜炎母牛子宫内采集内容物中最终分离鉴定出27株致病性E.coli和32株S.aures;并进行PCR毒力基因检测,其检出率为;yjaAKpsMIIhlyAsfasirp2;而ChuA、PapC未被检出;对分离鉴定、纯化的32株致病性S.aureus进行毒力基因检测,发现毒力基因的检出率从高到低:TSST-1ermAermCBlazSEB;而尚未检测出etb、SEJ和SEE毒力基因;同时,对致病性E.coli和S.aireus进行耐药性分析,结果发现这2种菌对青霉素、多西环素、多粘菌素B、阿莫西林和四环素等具有较高的耐药性。试验2、分别采用酶标比浊法、试剂盒法和邻硝基苯B-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)法研究当归四味散和nisin对致病菌E.coli和S.aureus生长曲线、膜电位、内容物、细胞壁及细胞膜渗透性的影响。①当归四味散对致病性E.coli和S.aures.均具有抗菌作用,而nisin对致病性E.coli无抑菌效果,只对致病性S.aureus.具有抑菌效果。试验3、采用人工阴门灌注法制备大鼠子宫内膜炎模型,选取70只SD大鼠,随机分为阴性对照组(生理盐水20 g/kg·b·w)、阳性对照组(0.13 g/kg环丙沙星)、模型组、nisin组(0.1 mg/mL)、当归四味散低(0.25 g/kg(b·w))、中(0.5 g/kg(b·w))、高(1 g/kg(b·w))剂量组,以上各用药组分别连续灌服7天(2次/天),并在第5天末次给药1 h后采集试验样品,解剖后子宫充血、肿大、增厚及子宫内部有蓄脓现象。麻醉后眼眶采血离心分离血清,利用ELISA试剂盒法来测定血清中以下指标:①与阴性对照组相比,当归四味散中、高剂量组、nisin组及阳性对照组使雌二醇(17 β-Estradiol)、孕酮(progesterone,P4)和催产素(oxytocin,OXT)的浓度增加,模型组逐渐降低。当归四味散高剂量组、nisin及阳性对照组中IL-6、IL-10、CINC-1、TNF-α和环氧化酶-2(cyclooxygenase,C0X-2)的浓度显著低于模型组和阴性组(P0.05)。④在0～72 h之间,模型组中,MMP-9和TIMP-1的质量浓度显著低于生理盐水组(P0.05),2)nisin和高剂量当归四味散组中MMP-9、TIMP-1、MMP-2和TIMP-2的质量浓度均显著高于生理盐水组(P0.05),其中以nisin组和高剂量当归四味散效果最佳。试验4、研究了子宫内膜炎导致结肠炎症的作用机制,并取其子宫和结肠组织做匀浆,ELISA法检测相关因子,试验表明,①建模72 h后,nisin组、当归四味散低、中、高剂量组以及阳性对照组对大鼠子宫组织匀浆中MP0、TXB2和OXT的浓度均显著高于模型组(P0.05),并且降低6-K-PGF1α的浓度,维持PGI2/TXA2比值平衡,从而起到止血不留瘀,②通过对结肠组织中炎症因子的检测发现,患子宫内膜炎大鼠对结肠造成局部的炎症。通过ELISA法检测结肠组织匀浆中TNF-α、IL-1 β、IL-6、IL-8和IL-10的浓度,建模72 h后,当归四味散高剂量组和阳性对照组中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的浓度显著低于阴性对照组(P0.05),模型组72 h持续升高。当归四味散高剂量组、nisin组与阳性对照组中IL-2和IFN-γ的浓度显著高于其他各组(P0.05),其中以当归四味散高剂量组和阳性对照组效果最佳。结论:nisin及中、高剂量当归四味散可调高大鼠血清中17-Estradiol、P4、OXT、IL-6、IL-10、CINC-1、TNF-α、COX-2、MMP-9、TIMP-1 和 MMP-2、TIMP-2和子宫组织匀浆中MPO、OXT、TXB2及 6-K-PGF1。的浓度,降低结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-2 和 IFN-γ的表达量。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S858.23

【参考文献】

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本文编号：1550470