中华乌塘鳢重要免疫相关基因的分子克

发布时间：2020-12-06 06:39

　　中华乌塘鳢（Bostrychus sinensis）隶属于鲈形目（Perciformes）、塘鳢科（Eleotridae）、乌塘鳢属（Bostrychus）,系河口咸淡水暖水性小型鱼类,具有生命力强、生长快、喜穴居等特点。生理学研究表明,中华乌塘鳢耐干露能力强,干露20h不死亡,非常适合活体运输远销。近年来,广西、广东、福建等沿海地区掀起了一股养殖中华乌塘鳢的热潮,使其成为重要的人工养殖对象。随着养殖面积的不断增加,包括肠炎病、赤皮病、弧菌病、寄生虫病等各种养殖疾病也相继出现,对中华乌塘鳢养殖业造成较大的经济损失。因此,开展中华乌塘鳢养殖病害方面的研究,对于促进养殖业的可持续健康发展具有重要的意义。本研究从台州患病中华乌塘鳢体内分离出1株优势菌,通过回归感染、组织病理切片、生理生化及分子生物学等手段,对患病中华乌塘鳢开展病原学、免疫学等方面的研究,为该病的诊断和防治提供参考。利用中华乌塘鳢在感染副溶血弧菌后脾脏进行转录组测序分析和建立cDNA文库,然后筛选了以下4个重要的先天免疫基因进行分析:1.中华乌塘鳢超氧化物歧化酶（BsCu/Zn-SOD与BsMn-SOD）基因的克隆及mRNA表... 

【文章来源】：浙江海洋大学浙江省

【文章页数】：116 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

菌株TZ-01的菌落特征和革兰氏染色Fig.2.1ColoniescharacteristicsandGramstainoftheStrainTZ-01

中华乌塘鳢重要免疫相关基因的分子克垄基因表达及功能研究12NCBI数据库选取10种弧菌的16SrDNA序列，利用MEGA7软件构建Neighbor-Joining（NJ）系统发育树。结果表明，菌株TZ-01首先与副溶血弧菌发生聚类，置信度为97%（如图3所示），说明菌株TZ-01与副溶血弧菌的亲缘关系最近。结合生理生化鉴定的结果，可以将菌株TZ-01鉴定为副溶血弧菌TZ-01。图2-2菌株TZ-01的16SrDNAPCR产物琼脂糖凝胶电泳。Fig.2.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.1.16SrDNAPCR产物；2.哈维氏弧菌阳性对照；3.阴性对照。Fig.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.Lane1:16SrDNAPCRproducts;Line2:positivecontrolofVibrioharveyi;Line3:negativecontrol.2.2.6药敏试验结果药敏试验结果如表2所示。在所试验的20种药物中，菌株TZ-01对米诺环素、多西环素、四环素、头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶和头孢呋辛等7种抗生素高度敏感；对头孢拉定、哌拉西林、氨苄西林、苯唑西林和青霉素等5种抗生素不敏感。图3基于16SrDNA序列的系统发育树。Fig.3Phylogenetictreebasedon16SrDNAsequences.

中华乌塘鳢重要免疫相关基因的分子克垄基因表达及功能研究12NCBI数据库选取10种弧菌的16SrDNA序列，利用MEGA7软件构建Neighbor-Joining（NJ）系统发育树。结果表明，菌株TZ-01首先与副溶血弧菌发生聚类，置信度为97%（如图3所示），说明菌株TZ-01与副溶血弧菌的亲缘关系最近。结合生理生化鉴定的结果，可以将菌株TZ-01鉴定为副溶血弧菌TZ-01。图2-2菌株TZ-01的16SrDNAPCR产物琼脂糖凝胶电泳。Fig.2.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.1.16SrDNAPCR产物；2.哈维氏弧菌阳性对照；3.阴性对照。Fig.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.Lane1:16SrDNAPCRproducts;Line2:positivecontrolofVibrioharveyi;Line3:negativecontrol.2.2.6药敏试验结果药敏试验结果如表2所示。在所试验的20种药物中，菌株TZ-01对米诺环素、多西环素、四环素、头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶和头孢呋辛等7种抗生素高度敏感；对头孢拉定、哌拉西林、氨苄西林、苯唑西林和青霉素等5种抗生素不敏感。图3基于16SrDNA序列的系统发育树。Fig.3Phylogenetictreebasedon16SrDNAsequences.


本文编号：2900912