玉米自交系成熟胚的芽再生能力的研究
发布时间：2020-12-14 10:17
组织培养是玉米遗传转化的基础。玉米幼胚因其容易诱导胚性愈伤组织、易于芽再生的特点成为玉米组织培养中主要使用的外植体。然而玉米幼胚的取材严重受到发育时期及生长季节的限制。选取玉米成熟胚作外植体操作更为简单、取材时期不受限制,可以克服幼胚在获取时间、气候和环境上的局限,因而更具应用前景。但是玉米成熟胚的芽再生困难,主要受到基因型、培养基类型、外植体的处理方式、植物激素等因素的影响。为了优化玉米成熟胚芽再生的实验体系,本研究选取6份玉米自交系材料（CML493、CIMBL8、Cy72、JY01、Ye478和K12）,取其成熟胚为外植体,通过研究两种不同类型培养基和三种不同切胚方式对初级愈伤组织诱导的影响,不同浓度植物激素在胚性愈伤组织诱导和再生过程的影响以及三种不同浓度甘露醇对玉米成熟胚培养中褐化的影响,优化并建立了高效的玉米成熟胚再生体系。主要研究成果如下。以MS培养基为基础培养基诱导形成愈伤组织的效率高于N6培养基;以胚轴为外植体更容易诱导形成愈伤组织,愈伤组织诱导率可以达到100%;在继代培养基中添加1.5mg L-12,4-D和6mg L-1
【文章来源】： 殷榕 山东农业大学
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同类型愈伤组织的组织细胞学观察(鲁旭东等,2004)
为了比较外植体在MS培养基和N6培养基上诱导初级愈伤组织的差异,我们将外植体分别接种到这两种培养基上,观察发现外植体在这两种不同培养基上诱导初级愈伤组织的数量和状态不一样(如图3-1-1所示),图片为材料JY01的生长情况,其余材料均在附录中(图4-1)展示。诱导培养3天时,外植体在MS诱导培养基上出现萌动迹象(如图3-1-1B所示),在胚轴与子叶连接处产生胚芽鞘和胚根。而外植体在N6诱导培养基上萌动迟缓(如图3-1-1E所示),在胚轴与子叶连接处只产生少许的胚芽鞘和胚根。诱导培养15天时,外植体在MS诱导培养基上产生大量乳白色的、较好的初级愈伤组织,少部分出现褐化现象(如图3-1-1C所示),外植体在N6诱导培养基上产生少量的、湿润的初级愈伤组织(如图3-1-1F所示)。对诱导培养15天的初级愈伤组织诱导率进行统计(如图3-1-2和表3-1-1所示)发现:外植体在MS诱导培养基上的初级愈伤组织诱导率都高于在N6诱导培养基,在MS诱导培养基上初级愈伤组织诱导率最高可达到88.76%,在N6诱导培养基上最高达到82.22%。方差分析(如表3-1-2所示)可知:外植体在不同培养基间的初级愈伤组织诱导率存在差异,但差异不显著。通过比较外植体在两种不同类型培养基上诱导愈伤组织的效率,可知当诱导培养基为MS时,愈伤组织诱导率相对较高,即MS诱导培养基比N6诱导培养基更容易诱导出初级愈伤组织,后期研究均选用MS诱导培养基作为诱导形成初级愈伤组织的基础培养基。
对诱导培养15天的初级愈伤组织诱导率进行统计(如图3-1-2和表3-1-1所示)发现:外植体在MS诱导培养基上的初级愈伤组织诱导率都高于在N6诱导培养基,在MS诱导培养基上初级愈伤组织诱导率最高可达到88.76%,在N6诱导培养基上最高达到82.22%。方差分析(如表3-1-2所示)可知:外植体在不同培养基间的初级愈伤组织诱导率存在差异,但差异不显著。通过比较外植体在两种不同类型培养基上诱导愈伤组织的效率,可知当诱导培养基为MS时,愈伤组织诱导率相对较高,即MS诱导培养基比N6诱导培养基更容易诱导出初级愈伤组织,后期研究均选用MS诱导培养基作为诱导形成初级愈伤组织的基础培养基。3.2 切胚方式对玉米成熟胚愈伤组织诱导的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]樟树胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究[J]. 戴小英,刘新亮,章挺,李江,周诚. 江西农业大学学报. 2019(06)
[2]石斛体细胞胚胎发生的研究进展[J]. 刘旭,方炎明,鞠烨,尹增芳. 分子植物育种. 2019(23)
[3]外源激素对台闽苣苔叶片分化及再生的影响[J]. 付双彬,池梦薇,杨燕萍,姚丽娟,周庄. 浙江农业科学. 2019(12)
[4]植物细胞全能性和再生[J]. 许智宏,张宪省,苏英华,胡玉欣,徐麟,王佳伟. 中国科学:生命科学. 2019(10)
[5]建立玉米幼胚高效再生体系的研究[J]. 李金红,霍岩,付莉,陶承光,史振声. 辽宁农业科学. 2017(06)
[6]植物生长调节剂对N6诱导玉米成熟胚愈伤组织的影响[J]. 朴莲玉,王化冰. 江西农业. 2017(23)
[7]玉米组织培养及再生体系的建立[J]. 于妍,胡楠楠,侯杰,尤丽新,唐敬仙. 乡村科技. 2017(32)
[8]MS基本培养基诱导玉米成熟胚愈伤组织影响因素的研究[J]. 朴莲玉,王化冰,郑大浩. 乡村科技. 2017(31)
[9]玉米优良自交系成熟胚愈伤组织诱导[J]. 周鹏,俞平高,张微微. 耕作与栽培. 2017(05)
[10]玉米不同部位愈伤组织诱导及植株再生的比较研究[J]. 张微,王良群,刘勇,郝艳芳,杨伟,白鸿雁,武擘. 核农学报. 2017(11)
博士论文
[1]拟南芥B类ARRs调控茎端分生组织重塑与维持的分子机理研究[D]. 孟文静.山东农业大学 2018
[2]棉花（Gossypium hirsutum L.）体细胞胚胎发生的生理及分子机制研究[D]. 程文翰.石河子大学 2016
[3]拟南芥体细胞胚胎发生中基因调控网络的建立及调控因子的功能分析[D]. 唐丽苹.山东农业大学 2016
[4]细胞分裂素与生长素之间的互作决定拟南芥离体再生苗的干细胞特征[D]. 程志娟.山东农业大学 2009
[5]亚麻离体再生及早期体细胞胚胎发生机理的研究[D]. 王克臣.东北农业大学 2008
硕士论文
[1]玉米成熟胚诱导愈伤组织体系的建立[D]. 刘萍.华中农业大学 2014
[2]高频再生的玉米成熟胚遗传转化受体系统的建立[D]. 王世玉.华中农业大学 2007
本文编号：2916263
【文章来源】： 殷榕 山东农业大学
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同类型愈伤组织的组织细胞学观察(鲁旭东等,2004)
为了比较外植体在MS培养基和N6培养基上诱导初级愈伤组织的差异,我们将外植体分别接种到这两种培养基上,观察发现外植体在这两种不同培养基上诱导初级愈伤组织的数量和状态不一样(如图3-1-1所示),图片为材料JY01的生长情况,其余材料均在附录中(图4-1)展示。诱导培养3天时,外植体在MS诱导培养基上出现萌动迹象(如图3-1-1B所示),在胚轴与子叶连接处产生胚芽鞘和胚根。而外植体在N6诱导培养基上萌动迟缓(如图3-1-1E所示),在胚轴与子叶连接处只产生少许的胚芽鞘和胚根。诱导培养15天时,外植体在MS诱导培养基上产生大量乳白色的、较好的初级愈伤组织,少部分出现褐化现象(如图3-1-1C所示),外植体在N6诱导培养基上产生少量的、湿润的初级愈伤组织(如图3-1-1F所示)。对诱导培养15天的初级愈伤组织诱导率进行统计(如图3-1-2和表3-1-1所示)发现:外植体在MS诱导培养基上的初级愈伤组织诱导率都高于在N6诱导培养基,在MS诱导培养基上初级愈伤组织诱导率最高可达到88.76%,在N6诱导培养基上最高达到82.22%。方差分析(如表3-1-2所示)可知:外植体在不同培养基间的初级愈伤组织诱导率存在差异,但差异不显著。通过比较外植体在两种不同类型培养基上诱导愈伤组织的效率,可知当诱导培养基为MS时,愈伤组织诱导率相对较高,即MS诱导培养基比N6诱导培养基更容易诱导出初级愈伤组织,后期研究均选用MS诱导培养基作为诱导形成初级愈伤组织的基础培养基。
对诱导培养15天的初级愈伤组织诱导率进行统计(如图3-1-2和表3-1-1所示)发现:外植体在MS诱导培养基上的初级愈伤组织诱导率都高于在N6诱导培养基,在MS诱导培养基上初级愈伤组织诱导率最高可达到88.76%,在N6诱导培养基上最高达到82.22%。方差分析(如表3-1-2所示)可知:外植体在不同培养基间的初级愈伤组织诱导率存在差异,但差异不显著。通过比较外植体在两种不同类型培养基上诱导愈伤组织的效率,可知当诱导培养基为MS时,愈伤组织诱导率相对较高,即MS诱导培养基比N6诱导培养基更容易诱导出初级愈伤组织,后期研究均选用MS诱导培养基作为诱导形成初级愈伤组织的基础培养基。3.2 切胚方式对玉米成熟胚愈伤组织诱导的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]樟树胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究[J]. 戴小英,刘新亮,章挺,李江,周诚. 江西农业大学学报. 2019(06)
[2]石斛体细胞胚胎发生的研究进展[J]. 刘旭,方炎明,鞠烨,尹增芳. 分子植物育种. 2019(23)
[3]外源激素对台闽苣苔叶片分化及再生的影响[J]. 付双彬,池梦薇,杨燕萍,姚丽娟,周庄. 浙江农业科学. 2019(12)
[4]植物细胞全能性和再生[J]. 许智宏,张宪省,苏英华,胡玉欣,徐麟,王佳伟. 中国科学:生命科学. 2019(10)
[5]建立玉米幼胚高效再生体系的研究[J]. 李金红,霍岩,付莉,陶承光,史振声. 辽宁农业科学. 2017(06)
[6]植物生长调节剂对N6诱导玉米成熟胚愈伤组织的影响[J]. 朴莲玉,王化冰. 江西农业. 2017(23)
[7]玉米组织培养及再生体系的建立[J]. 于妍,胡楠楠,侯杰,尤丽新,唐敬仙. 乡村科技. 2017(32)
[8]MS基本培养基诱导玉米成熟胚愈伤组织影响因素的研究[J]. 朴莲玉,王化冰,郑大浩. 乡村科技. 2017(31)
[9]玉米优良自交系成熟胚愈伤组织诱导[J]. 周鹏,俞平高,张微微. 耕作与栽培. 2017(05)
[10]玉米不同部位愈伤组织诱导及植株再生的比较研究[J]. 张微,王良群,刘勇,郝艳芳,杨伟,白鸿雁,武擘. 核农学报. 2017(11)
博士论文
[1]拟南芥B类ARRs调控茎端分生组织重塑与维持的分子机理研究[D]. 孟文静.山东农业大学 2018
[2]棉花（Gossypium hirsutum L.）体细胞胚胎发生的生理及分子机制研究[D]. 程文翰.石河子大学 2016
[3]拟南芥体细胞胚胎发生中基因调控网络的建立及调控因子的功能分析[D]. 唐丽苹.山东农业大学 2016
[4]细胞分裂素与生长素之间的互作决定拟南芥离体再生苗的干细胞特征[D]. 程志娟.山东农业大学 2009
[5]亚麻离体再生及早期体细胞胚胎发生机理的研究[D]. 王克臣.东北农业大学 2008
硕士论文
[1]玉米成熟胚诱导愈伤组织体系的建立[D]. 刘萍.华中农业大学 2014
[2]高频再生的玉米成熟胚遗传转化受体系统的建立[D]. 王世玉.华中农业大学 2007
本文编号：2916263
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/zaizhiyanjiusheng/2916263.html
教材专著
