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小麦F-box基因TaPP2-A13和TaSKIP27的胁迫应答模式及互作蛋白鉴定

发布时间:2020-12-18 23:59
  F-box是真核生物中普遍存在的最大的蛋白质家族之一,主要在SCF复合体中负责待降解底物的特异性识别。在拟南芥中已揭示该家族部分成员的功能,但其在小麦中的功能研究报道较少。本研究在筛选小麦逆境相关转录组数据库的基础上,利用生物信息学、qRT-PCR、酵母双杂交、BiFC和Co-IP等技术,借助于荧光显微观察、超表达分析和亚细胞定位等手段,对F-box基因TaPP2-A13和TaSKIP27参与小麦TcLr15的逆境响应过程及与其互作的蛋白进行了分析和鉴定。取得的主要研究结果如下:1.获得了小麦F-box基因TaPP2-A13和TaSKIP27的全长编码区,预测其编码蛋白分别为 298 aa 和 164 aa。其中TaPP2-A13属于 F-box/PP2 亚家族(FBP),TaSKIP27属于未知功能结构域亚家族(FBU)。两个基因所编码的蛋白在小麦近缘种属中进化比较保守。2.在小麦TcLr15中,经MeJA、SA和ABA三种激素处理后,TaPP2-A13基因均明显地上调,其中ABA诱发表达最早,而SA诱导表达最强;TaSKIP27基因在MeJA处理后变化不明显,而在ABA和SA处理后... 

【文章来源】:河北农业大学河北省

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

小麦F-box基因TaPP2-A13和TaSKIP27的胁迫应答模式及互作蛋白鉴定


图2?和7V/SA:/P27c:DNA全长序列扩增结果??:arer:7?(1:

模型图,特征分析,序列,二级结构


?河北农业大学硕士学位(毕业)论文???A?C??f ̄?\?p-box?卜’巧巧卿观?pp2??B??ii^0m||iii|||m|^??50?1?明?156?7m?V??^? ̄?-?-?-?—?'??图3小麦TaPP2-A13序列特征分析??A:?TaPP2-A13结构域预测;B:?TaPP2-A13二级结构预测;C:?TaPP2-A丨3三维模型预测??Figure?3?Sequence?analysis?of?wheat?TaPP2-A13??A:?Prediction?of?TaPP2-A13?domain;?B:?Prediction?of?TaPP2-A13?secondary?structure;?C:?Prediction?of??TaPP2-A13?3D?model??以r?PP2-AJ为输入序列,在NCBI网站上进行BLASTx比对,结果表明,该序列与普通小??安D染色体组的供体种一粗山羊草(deg//o/w?登录号XP_020187178.1?)的AetPP2-A13-like??相似性域高,为丨00%,其次|)_:德短柄草(5阳(:/?>^〇£//;??而恤/^〇/7,登录号\?_010240281.1)??中对丨、^序列的相似性为90.66%。与短花药野生稻,登录号XP」)06652663.1,??84.87%)、印度粳稻/W/ca?Grow/;,登录号?EEC77826.1,?83.99%)和弯叶画眉草??CfragnwtocwnWa,登录号?TVU16103.1,?81.72%)的?PP2-A13/PP2-A13-like?相似性均大于?8

序列,结构域,特征分析,小麦


应答模式及互作蛋白鉴定???3.2.2?TaSKIP27?为?FBU?类?F-box?蛋白??由WheatExp中的编号TraesCS2D02G211000.1可知,基因位于小麦2D染色体上。??使用DNAstar等软件对raSA7P27基因编码的蛋白序列进行分析,发现7bSA7尸27基因ORF大小??为495?bp,编码蛋白大小为164个氨基酸,其预测分子量大小为17.60?kD,理论等电点是9.60。??结构域分析表明,TaSKIP27蛋白第66?100位是F-box结构域(图6A),除了?F-box结构域外,??该蛋白序列中再无其他结构域,因此7b从7P27属于F-box蛋白家族FBU亚家族。经预测,??TaSKlP27蛋白不含信号肽序列和跨膜结构域。该蛋白二级结构中a-螺旋占43.29%,?p-转角占??1.83%,无规则卷曲和延伸链分别为42.68%和12.2%?(图6B),蛋白亲疏水性预测显示TaSKIP27??为亲水性蛋白。由-:维结构预测可见,该蛋白主要由a-螺旋、无规则卷曲和延伸链构成(图6C),??4?级预测结果基本一致,且三维结构趋近于圆球形,符合其蛋白的亲水性特征。??A?C??164??I?????""'"-?"i?F-box?r…v'?...'一巧'r?????I?!?:?i?;?I?):!li!iri!'?i?!;:?■?||!?U?M?Mli:丨,ll“:??28?46?6fl?08?108?128??图6小麦TaSKlP27序列特征分析??A:?TaSKIP27结构域M测;B:?TaSMP27?:级结构预测;C:?TaSKIP27?维校吧M测??Figure

【参考文献】:
期刊论文
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[2]PP2C相关基因在砂梨休眠进程中的表达分析[J]. 王会全,李亮,余志雄,袁亚芳,吴少华.  亚热带植物科学. 2018(04)
[3]小麦F-box基因TaFBL14的克隆及表达分析[J]. 李铃仙,魏春茹,李虎滢,魏新燕,于秀梅.  西北植物学报. 2017(02)
[4]小麦叶锈病成株抗性研究进展与展望[J]. 张小辉,畅志坚,乔麟轶,郭慧娟,詹海仙,李欣,任永康,张晓军.  山西农业科学. 2016(04)
[5]谷子F-box家族基因的鉴定、分类及干旱响应[J]. 霍冬英,郑炜君,李盼松,徐兆师,周永斌,陈明,马有志,闵东红,张小红.  作物学报. 2014(09)
[6]CRL E3泛素连接酶复合体研究进展[J]. 刘相元,胡弘历,欧阳华芳,高大明.  中国细胞生物学学报. 2014(02)
[7]论小麦叶锈病的防治方法[J]. 常红.  农民致富之友. 2013(07)
[8]植物泛素结合酶E2功能研究进展[J]. 王金利,史胜青,贾利强,江泽平.  生物技术通报. 2010(04)
[9]查尔酮合酶超家族(chalcone synthase superfamily)基因重复和分化的式样[J]. 杨继,顾红雅.  科学通报. 2006(07)
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博士论文
[1]拟南芥F-box基因AtPP2-B11调节盐胁迫抗性的分子机理[D]. 贾凤娟.山东农业大学 2015

硕士论文
[1]小麦抗叶锈防卫反应相关基因TaNRH的克隆与功能分析[D]. 李楠楠.河北农业大学 2019
[2]小麦F-box家族的全基因组鉴定及TaFBL14和TaSKP2A的抗逆相关表达分析[D]. 李虎滢.河北农业大学 2019
[3]棉花赤霉素信号途径重要组分GhFB1,GhFB2和GhGID1基因的克隆和表达分析[D]. 于海川.海南大学 2008
[4]精氨酸脱亚氨基酶基因克隆及在大肠杆菌中表达[D]. 茅立华.南京理工大学 2005



本文编号:2924847

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