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水稻病程相关蛋白质OsPR1A在白叶枯病抗性反应中的功能研究

发布时间:2021-03-27 03:38
  水稻(Oryzasativa L.)是全球最重要的经济作物和粮食作物之一,水稻的消费量在我国粮食作物中占主导地位,保证水稻产量的稳定和高产对于保证我国粮食安全具有非常重要的战略地位。同时,全球环境继续变暖,极端气候频繁出现,给作物带来很多不可预知的风险。所以,在保证和增加水稻产量的基础上,不断提高水稻抵抗非生物胁迫物和生物胁迫的能力,值得深入研究和探讨。水稻Xa21于1995年被克隆,属于免疫系统相关的类受体激酶,对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)具有广谱抗性。病程相关蛋白质(Pathogenesis-related proteins,PR)是由植物受到外源病原物侵染或非生物胁迫刺激产生的一类低分子量蛋白质,水稻OsPR1家族属于类丝氨酸羧肽酶(serine carboxypeptidase-like proteins,SCPLs),在水稻、烟草、番茄等中都有发现,其中OsPR1A是最早被鉴定和克隆的病程相关蛋白质之一,可能参与了水稻Xa21介导抗白吐枯病菌信号途径。本研究目的有,第一,研究OsPR1A对水稻农艺性状的影响并了解在非生物... 

【文章来源】:河北农业大学河北省

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 非生物胁迫对水稻生长发育的影响
        1.1.1 冷胁迫对水稻生长发育的影响
        1.1.2 热胁迫对水稻生长发育的影响
        1.1.3 旱胁迫对水稻生长发育的影响
        1.1.4 淹胁迫对水稻生长发育的影响
        1.1.5 盐胁迫对水稻生长发育的影响
    1.2 水稻受到生物胁迫的影响
        1.2.1 水稻白叶枯病
        1.2.2 水稻稻瘟病
    1.3 水稻受体激酶XA21的研究进展
    1.4 水稻病程相关蛋白质OsPR1A相关研究
    1.5 PCR和WB在转基因植物的检测和蛋白表达中的应用
        1.5.1 PCR在转基因植物的检测中的应用
        1.5.2 WB在转基因植物的检测、蛋白表达和菌细胞数统计中的应用
    1.6 研究的目的与意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 生物材料
        2.1.2 试剂材料
        2.1.3 仪器
    2.2 方法和步骤
        2.2.1 水稻的种植
        2.2.2 水稻全蛋白质的提取
        2.2.3 蛋白质样品的WB检测
        2.2.4 水稻OsPR1a-RNAi和超表达载体的构建、遗传转化及PCR鉴定
        2.2.5 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX转基因水稻的阳性鉴定
        2.2.6 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX水稻农艺性状的统计
        2.2.7 水稻非生物胁迫的处理
        2.2.8 水稻白叶枯病菌Xoo的培养及接菌
        2.2.9 Xoo标准曲线的制作
        2.2.10 水稻OsPR1a基因的转录数据
3. 结果
    3.1 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX转化载体的构建
        3.1.1 OsPR1a-RNAi转化载体的构建
        3.1.2 OsPR1a-OX转化载体的构建
    3.2 OsPR1a-RNAi及OsPR1a-OX阳性纯合植株的鉴定
        3.2.1 OsPR1a-RNAi的阳性纯合植株的鉴定
        3.2.2 OsPR1a-OX的阳性纯合植株的鉴定
    3.3 OsPR1a-RNAi和OsPR1a-OX转基因水稻的农艺性状
    3.4 OsPR1A蛋白质对非生物胁迫的响应
    3.5 OsPR1A蛋白质在不同光照条件下的表达情况
        3.5.1 活体水稻幼苗OsPR1A蛋白质在不同光照条件下的表达情况
        3.5.2 活体水稻幼苗OsPR1A蛋白质在遮光条件下的表达情况
        3.5.3 水稻离体叶片中OsPR1A在不同光照环境下的表达情况
    3.6 Xoo细胞数和WB信号强度的对应关系
    3.7 水稻接种Xoo后叶片内Xoo的菌数及OsPR1A的表达情况
        3.7.1 分蘖期转基因水稻接种Xoo后叶片病斑长度分析
        3.7.2 OsPR1a-RNAi苗期水稻接种Xoo后病斑长度及菌量分析
        3.7.3 OsPR1a-OX苗期水稻接种Xoo后病斑长度及菌量分析
        3.7.4 水稻不同抗感组合中OsPR1A蛋白质表达的时间特异性
        3.7.5 接种Xoo OsPR1A在叶片中表达部位的特异性
        3.7.6 不同水稻材料在病斑处OsPR1A蛋白质表达的时间特异性
        3.7.7 转基因水稻苗期在不同温度下对Xoo的抗性反应
    3.8 水稻OsPR1a基因的转录组数据
4 讨论
5 结论
参考文献
在读期间发表的学术论文
作者简历
致谢



本文编号:3102810

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