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植物根际辣椒溶杆菌的筛选及拮抗特性的研究

发布时间:2021-04-22 05:55
  近年来生防菌株在农业领域的应用备受关注。植物根际土壤是一个微生物种群极其丰富的环境,利用合适的筛选方法从中获得有良好拮抗活性的细菌有较高的研究价值。本论文首先从山西省晋中市榆次区某农田土壤采样,利用稀释涂布法分离得到53株细菌,使用改良牛津杯法进行拮抗细菌的筛选,得到3株拮抗细菌。经过滤膜法复筛发现菌体可以表现出拮抗活性,说明这些拮抗细菌的抑菌作用不需要微生物细胞之间的直接接触,而传统牛津杯法复筛发现拮抗细菌的无细胞发酵液没有表现出拮抗活性,可能因为拮抗细菌的无细胞发酵液中有效成分含量太低。同时,这些结果也说明,与传统牛津杯法和滤膜法相比,改良牛津杯法操作简单,效果更好。液体混合培养法复筛也验证了上述结果。对分离得到的拮抗细菌CK09进行生理生化特征鉴定和16S rRNA序列分析,结果表明,该细菌为辣椒溶杆菌(Lysobactercapsici)。基于改良牛津杯法的良好效果,我们对这种方法进行了进一步的优化。采用单因素实验对改良牛津杯方法中培养基琼脂浓度、拮抗细菌和指示细菌的活菌数等参数进行优化,最终发现,最佳琼脂浓度为10 g/L,最佳拮抗菌浓度为108 CFU... 

【文章来源】:山西大学山西省

【文章页数】:82 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 综述
    1.1 前言
    1.2 生防菌株的概述
        1.2.1 定义
        1.2.2 生防菌株的分类
        1.2.3 生防菌株研究目前面临的问题
    1.3 植物根际土壤拮抗细菌的研究进展
        1.3.1 研究现状
        1.3.2 拮抗细菌的拮抗机制简述
    1.4 溶杆菌属细菌概述
        1.4.1 溶杆菌属细菌的基本特征
        1.4.2 溶杆菌属细菌抑菌活性物质的研究进展
    1.5 筛选方法概述
        1.5.1 目前研究常用的筛选方法
        1.5.2 常用筛选方法的不足之处
    1.6 本研究的内容及选题目的、意义
第二章 土壤中拮抗细菌的分离和筛选
    2.1 材料和仪器
        2.1.1 土壤样本来源
        2.1.2 主要试剂材料和培养基
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 土壤样品的前期处理
        2.2.2 土壤样品中细菌的分离、纯化
        2.2.3 土壤拮抗细菌的初筛
        2.2.4 土壤拮抗细菌的复筛
        2.2.5 各菌株的分类学地位鉴定
    2.3 结果与分析
        2.3.1 土壤样品中细菌的分离纯化
        2.3.2 拮抗细菌的初筛
        2.3.3 传统牛津杯法和滤膜法复筛
        2.3.4 液体混合培养法复筛
        2.3.5 各菌株的分类学地位的鉴定
    2.4 讨论
第三章 筛选方法的优化和辣椒溶杆菌CK09 的抑菌谱
    3.1 材料和仪器
        3.1.1 实验所用菌株
        3.1.2 实验材料和培养基
        3.1.3 实验仪器和设备
    3.2 实验方法
        3.2.1 初筛方法的优化
        3.2.2 辣椒溶杆菌CK09 的抑菌广谱性研究
        3.2.3 数据处理
    3.3 结果与分析
        3.3.1 初筛方法的优化
        3.3.2 辣椒溶杆菌CK09 的抑菌广谱性
    3.4 讨论
第四章 辣椒溶杆菌CK09 的拮抗活性
    4.1 材料和仪器
        4.1.1 实验所用菌株
        4.1.2 实验材料试剂和培养基
        4.1.3 实验仪器和设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 辣椒溶杆菌CK09 发酵液对指示菌的作用类型
        4.2.2 温度对辣椒溶杆菌CK09 发酵液的拮抗活性的影响
        4.2.3 pH对辣椒溶杆菌CK09 发酵液的拮抗活性的影响
        4.2.4 辣椒溶杆菌CK09 的培养时间对其发酵液拮抗活性的影响
        4.2.5 辣椒溶杆菌CK09 产生水解酶和铁载体的能力
        4.2.6 数据处理
    4.3 结果与分析
        4.3.1 辣椒溶杆菌CK09 发酵液对指示菌的作用类型
        4.3.2 温度对辣椒溶杆菌CK09 发酵液的拮抗活性的影响
        4.3.3 pH对辣椒溶杆菌CK09 发酵液拮抗活性的影响
        4.3.4 辣椒溶杆菌CK09 培养时间对其发酵液拮抗活性的影响
        4.3.5 辣椒溶杆菌CK09 产生水解酶和铁载体的能力
    4.4 讨论
结论
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简况及联系方式



本文编号:3153304

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