芒果过敏原分子鉴定的初步研究
发布时间：2021-04-24 20:39
新时代人们不断追求更高品质的生活,水果作为健康必需食品的消费量也逐年递增,但水果也是食物过敏的主要过敏来源之一。芒果（Mangifera indica L.）是世界第二大热带特产水果,但同时在水果过敏的病例中位居第一。芒果过敏成为影响农产品安全和人们生活质量的新问题。目前芒果的过敏原组分还不很明确,本研究以我国最常见的过敏水果芒果为研究对象,对芒果过敏原蛋白分子做了初步鉴定,为芒果过敏诊断、脱敏治疗和品种选育提供一定参考。主要结果如下:1.对芒果过敏进行流行病学调查,收集芒果过敏病例80例,发现中国患者芒果过敏发生途径主要为食用（80%）,其次为接触（36%）。同时,根据过敏反应出现的时间不同,芒果过敏分为具有口腔过敏综合征（OAS,口咽麻痒、唇舌肿胀）、皮疹、腹痛腹泻等症状的速发型过敏（80%）和具有丘疹、水疱等皮肤症状的迟发型过敏（20%）。2.应用不同酸碱性的Coca’s提取液提取芒果蛋白,确定碱性环境提取效果更佳。提取‘台农一号’、‘红象牙’、‘贵妃芒’和‘凯特芒’四个品种芒果果皮与果肉总蛋白,发现各品种间蛋白质含量差异明显,“台农一号”芒果果肉蛋白含量最高为4.84mg/g,...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 水果过敏反应概述
1.1.1 过敏反应机理
1.1.2 水果过敏流行情况
1.1.3 过敏原鉴定方法
1.2 热带水果过敏的流行病学调查和过敏症状
1.2.1 热带水果的流行病学调查
1.2.2 热带水果过敏症状
1.2.3 芒果过敏症状分型
1.3 热带水果过敏原研究进展
1.4 芒果过敏的交叉反应现象
1.5 芒果基因组、转录组、蛋白组研究现状
1.6 芒果过敏原分子研究现状
1.7 研究意义
1.8 研究内容和技术路线
2 芒果过敏病例收集与分析
2.1 过敏病例收集方法
2.2 芒果过敏病例分析
2.3 芒果过敏患者特异性抗体检测
3 芒果过敏原免疫学鉴定和分离纯化
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验仪器与试剂配制
3.1.3 不同酸碱性提取液对芒果蛋白提取的影响
3.1.4 不同芒果品种果肉、果皮蛋白粗提液制备
3.1.5 离子交换层析柱分离芒果过敏蛋白
3.1.6 去果胶超滤管纯化芒果过敏蛋白
3.1.7 芒果果实蛋白免疫小鼠,单克隆抗体制备
3.1.8 酶联免疫吸附法测定芒果过敏患者IgE
3.1.9 芒果蛋白提取物免疫印迹鉴定
3.2 结果与分析
3.2.1 不同酸碱性提取液对芒果蛋白提取的影响
3.2.2 不同芒果品种果肉蛋白、果皮蛋白粗提液制备
3.2.3 离子交换层析柱分离芒果过敏蛋白
3.2.4 去果胶超滤管纯化芒果过敏蛋白
3.2.5 芒果果实蛋白免疫小鼠,单克隆抗体制备
3.2.6 酶联免疫吸附法测定芒果过敏患者IgE
3.2.7 芒果蛋白提取物免疫印迹鉴定
3.3 25-35kDa蛋白质谱鉴定
3.3.1 鉴定方法
3.3.2 鉴定结果
3.3.3 蛋白筛选
4 芒果过敏原的重组表达（大肠杆菌系统）
4.1 芒果主要过敏原Mani1的克隆与表达载体构建
4.2 芒果Mani1的表达纯化
4.3 重组Mani1的检测
4.4 讨论
5 小结与展望
参考文献
作者简历及在学期间所取得的科研成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]2329例儿童过敏性疾病变应原检测结果分析[J]. 殷皓,俞蕾,张晓峰,崔玉宝. 医学综述. 2019(13)
[2]芒果过敏原几丁质酶的序列和B细胞抗原表位的分析[J]. 张帅,刘泽标,吴宗敏,闫慧清. 贵州师范大学学报(自然科学版). 2018(04)
[3]海口市儿童哮喘变应原流行病学调查研究[J]. 王灵,陈实,廖锋,曾霞,吴少皎,谢跃琦,林涛,林霞,陈冰. 海南医学. 2016(04)
[4]Anaphylaxis and generalized urticaria from eating Chinese bayberry fruit[J]. Hui-ying WANG 1,Zhong-shan GAO 2,Zhao-wei YANG 2,Jing-xin SHAO 1,Xiu-zhen ZHAO 1,Yu DAI 3,Ronald VAN REE 4(1 Department of Allergy and Clinical Immunology,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(2 Allergy Research Center,Department of Horticulture,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)(3 Department of Clinic Laboratory,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(4 Department of Experimental Immunology and Department of Otorhinolaryngology,Academic Medical Center,University of Amsterdam,Meibergdreef 9,1105 AZ,Amsterdam,the Netherlands). Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2012(10)
[5]20万项次过敏原特异性IgE检测结果[J]. 王瑞琦,张宏誉. 中华临床免疫和变态反应杂志. 2012(01)
[6]芒果皮炎39例临床分析[J]. 陈燕,于春水,张浩,陈星,邓利丽. 川北医学院学报. 2011(04)
[7]一项调查“刷新”过敏食物排行榜 中原居民易对南方水果过敏[J]. 杨力勇,魏妍平,杨振岭. 家庭中医药. 2006(09)
[8]某些食物的过敏性问题[J]. 白清云. 中国食物与营养. 2005(07)
[9]食荔枝致过敏性紫癜一例[J]. 徐红波,郭霞信,刘瑛. 华北国防医药. 2005(02)
[10]荔枝过敏1例[J]. 王彤,李明霞. 临床军医杂志. 2004(03)
硕士论文
[1]昆明地区芒果果实变应原致敏性的调查分析及实验研究[D]. 蒋鹏.昆明医学院 2008
本文编号：3158041
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 水果过敏反应概述
1.1.1 过敏反应机理
1.1.2 水果过敏流行情况
1.1.3 过敏原鉴定方法
1.2 热带水果过敏的流行病学调查和过敏症状
1.2.1 热带水果的流行病学调查
1.2.2 热带水果过敏症状
1.2.3 芒果过敏症状分型
1.3 热带水果过敏原研究进展
1.4 芒果过敏的交叉反应现象
1.5 芒果基因组、转录组、蛋白组研究现状
1.6 芒果过敏原分子研究现状
1.7 研究意义
1.8 研究内容和技术路线
2 芒果过敏病例收集与分析
2.1 过敏病例收集方法
2.2 芒果过敏病例分析
2.3 芒果过敏患者特异性抗体检测
3 芒果过敏原免疫学鉴定和分离纯化
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验仪器与试剂配制
3.1.3 不同酸碱性提取液对芒果蛋白提取的影响
3.1.4 不同芒果品种果肉、果皮蛋白粗提液制备
3.1.5 离子交换层析柱分离芒果过敏蛋白
3.1.6 去果胶超滤管纯化芒果过敏蛋白
3.1.7 芒果果实蛋白免疫小鼠,单克隆抗体制备
3.1.8 酶联免疫吸附法测定芒果过敏患者IgE
3.1.9 芒果蛋白提取物免疫印迹鉴定
3.2 结果与分析
3.2.1 不同酸碱性提取液对芒果蛋白提取的影响
3.2.2 不同芒果品种果肉蛋白、果皮蛋白粗提液制备
3.2.3 离子交换层析柱分离芒果过敏蛋白
3.2.4 去果胶超滤管纯化芒果过敏蛋白
3.2.5 芒果果实蛋白免疫小鼠,单克隆抗体制备
3.2.6 酶联免疫吸附法测定芒果过敏患者IgE
3.2.7 芒果蛋白提取物免疫印迹鉴定
3.3 25-35kDa蛋白质谱鉴定
3.3.1 鉴定方法
3.3.2 鉴定结果
3.3.3 蛋白筛选
4 芒果过敏原的重组表达（大肠杆菌系统）
4.1 芒果主要过敏原Mani1的克隆与表达载体构建
4.2 芒果Mani1的表达纯化
4.3 重组Mani1的检测
4.4 讨论
5 小结与展望
参考文献
作者简历及在学期间所取得的科研成果
【参考文献】：
期刊论文
[1]2329例儿童过敏性疾病变应原检测结果分析[J]. 殷皓,俞蕾,张晓峰,崔玉宝. 医学综述. 2019(13)
[2]芒果过敏原几丁质酶的序列和B细胞抗原表位的分析[J]. 张帅,刘泽标,吴宗敏,闫慧清. 贵州师范大学学报(自然科学版). 2018(04)
[3]海口市儿童哮喘变应原流行病学调查研究[J]. 王灵,陈实,廖锋,曾霞,吴少皎,谢跃琦,林涛,林霞,陈冰. 海南医学. 2016(04)
[4]Anaphylaxis and generalized urticaria from eating Chinese bayberry fruit[J]. Hui-ying WANG 1,Zhong-shan GAO 2,Zhao-wei YANG 2,Jing-xin SHAO 1,Xiu-zhen ZHAO 1,Yu DAI 3,Ronald VAN REE 4(1 Department of Allergy and Clinical Immunology,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(2 Allergy Research Center,Department of Horticulture,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China)(3 Department of Clinic Laboratory,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310013,China)(4 Department of Experimental Immunology and Department of Otorhinolaryngology,Academic Medical Center,University of Amsterdam,Meibergdreef 9,1105 AZ,Amsterdam,the Netherlands). Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2012(10)
[5]20万项次过敏原特异性IgE检测结果[J]. 王瑞琦,张宏誉. 中华临床免疫和变态反应杂志. 2012(01)
[6]芒果皮炎39例临床分析[J]. 陈燕,于春水,张浩,陈星,邓利丽. 川北医学院学报. 2011(04)
[7]一项调查“刷新”过敏食物排行榜 中原居民易对南方水果过敏[J]. 杨力勇,魏妍平,杨振岭. 家庭中医药. 2006(09)
[8]某些食物的过敏性问题[J]. 白清云. 中国食物与营养. 2005(07)
[9]食荔枝致过敏性紫癜一例[J]. 徐红波,郭霞信,刘瑛. 华北国防医药. 2005(02)
[10]荔枝过敏1例[J]. 王彤,李明霞. 临床军医杂志. 2004(03)
硕士论文
[1]昆明地区芒果果实变应原致敏性的调查分析及实验研究[D]. 蒋鹏.昆明医学院 2008
本文编号：3158041
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/zaizhiyanjiusheng/3158041.html
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