虾类肠道菌群稳态调控分子CTL33和抗菌效应分子TWD的功能研究
发布时间：2021-06-09 17:46
对虾养殖是重要的经济产业,但长期遭受病害侵袭。研究对虾与病原的互作机制,对开发绿色可持续的病害防控策略有重要意义。肠道菌群存在于所有后生动物的肠道中,与宿主的免疫、消化和代谢等生理过程密切相关。维持宿主肠道菌群的稳态对于其健康状态以及疾病的预防具有十分重要的作用。然而,对虾如何维持自身肠道菌群稳态的机制却鲜有报道。我们在日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）中鉴定到一种特异表达于消化道且明显响应经口细菌感染的C型凝集素（C-typelectin,CTL）CTL33,并研究了其在肠道菌群稳态调控中的功能和作用机制。采用RNAi方法抑制CTL33表达导致肠道细菌大量增殖、致病菌比例升高、肠道组织受损和对虾死亡等后果。机制研究表明CTL33可介导肠道共生细菌形成生物被膜结构在肠道内定植和稳定存在。CTL33通过识别细菌表面多糖结合细菌,其N端区域二聚化,使得CTL33-细菌复合物彼此交织形成生物被膜状结构。该结构一方面限制了菌群与肠道上皮的接触,另一方面增强了菌群对肠道免疫压力的耐受能力。因此,本研究发现了一种CTL介导的新的肠道菌群稳态调控机制,也为基于肠道菌群稳态维持...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．ＣＴＬ３３的表达模式
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【参考文献】：
期刊论文
[1]南美白对虾肠道微生物群落的分子分析[J]. 李可,郑天凌,田蕴,袁建军. 微生物学报. 2007(04)
本文编号：3221036
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．ＣＴＬ３３的表达模式
ｔｅｒ?ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?ｗａｓ?ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ?ａｔ?６?ｄ??ａｆｔｅｒ?ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．?Ｄａｔａ?ｗｅｒｅ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｏｆ?ｔｗｏ?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，?ａｎｄ?ｅａｃｈ??ｓａｍｐｌｅ?ｗａｓ?ｏｒｉｇｉｎａｔｅｄ?ｆｒｏｍ?６?ａｎｉｍａｌｓ．??为了揭示ＣＴＬ３３在对虾肠道中的特异功能，我们采用ＲＮＡｉ方法抑制ＣＴＬ３３??的表达。如图３Ａ所示，通过注射可显著抑制ＣＴＬ３３的表达。出乎意??料的是，即便没有进行额外的感染，ＣＴＬ３３的基因沉默直接导致了对虾死亡。对??虾死亡从ＲＮＡｉ后的第一天即开始出现，并抑制持续。在注射ＣＴＬ３３ｄｓＲＮＡ６ｄ??后，超过一半的对虾死亡，而对照组（注射ＧＦＰｄｓＲＮＡ）则没有死亡（图３Ｂ）。??为了发现对虾死亡的原因，我们将濒死的日本囊对虾的肠组织进行组织切片和染??色以检查是否有组织形态学改变。如图３Ｃ所示，ＣＴＬ３３基因沉默导致了对虾肠??道的明显损伤。在抑制ＣＴＬ３３表达后，附着在肠上皮上的粘膜变薄，甚至从上??皮上脱落。上皮细胞密度降低，肠壁变保这些症状显示ＣＴＬ３３表达的沉默破??坏了对虾肠道内的稳态。??Ａ?１．５－，?６?１００?？］￣！???｜?丁?￣?８０＇?］?ｐ?＜?〇．〇〇１??｜１〇－?ｐＨ?Ｉ?６０－?匕一！一??？?〇?４０－?…??Ｉ?〇．５－?０??ｄｓＧＦＰ，?ｎ＝４０??１?＾?２０－??２?＊＊＊?ｄｓＣＴＬ３３，?ｎ＝４０??０．０?ＩＩ?ｌ?Ｌ－ｒ－Ｌ?〇
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【参考文献】：
期刊论文
[1]南美白对虾肠道微生物群落的分子分析[J]. 李可,郑天凌,田蕴,袁建军. 微生物学报. 2007(04)
本文编号：3221036
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