锐顶镰刀菌的RT-qPCR检测及黄芪对其侵染响应的代谢组分析

发布时间：2021-06-10 16:25

　　黄芪是常用大宗中药材,根腐病的普遍发生严重阻碍其产业化发展。抗病育种是当前根腐病防治最经济安全且有效的方法。然而,由于抗病性指标缺失、传统抗性鉴定方法效率低下等原因,针对黄芪根腐病的抗病育种工作尚未开展。代谢组学作为生物标志物最有力的高通量筛选工具,在植物抗病标志物指认方面效果显著。本研究在建立锐顶镰刀菌F.acuminatum实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测体系和该菌侵染黄芪后苯丙烷途径关键酶活性变化的基础上,利用¹H NMR的非靶向和LC-MS的靶向代谢组学技术,分析F.acuminatum侵染后黄芪初级代谢产物和苯丙烷途径次级代谢产物的变化,以此来指认黄芪抗F.acuminatum侵染的相关代谢产物,以期为黄芪的抗病育种和建立高效的抗性鉴定方法提供指标参考和思路。本论文的研究内容及结果如下:1.基于EF-1α基因序列设计了F.acuminatum的特异性引物,建立了该病菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR（Real-time qPCR）检测体系。该方法特异性强,检测灵敏度高,为0.002ng/μL,可在F.acuminatum接种黄芪根1h... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

苯丙烷代谢途径

引物FaeF4/FaeR4特异性检测结果

引物FaeF/FaeR引物特异性检测注：M：2000bp分子量标准；1：锐顶镰刀菌；2：腐皮镰刀菌；3：尖孢镰刀菌；4：黄瓜

【参考文献】：
期刊论文
[1]山西省蒙古黄芪根腐病优势致病菌群分析[J]. 高芬,赵晓霞,秦雪梅,雷振宏.  植物保护学报. 2018(04)
[2]天麻苯丙烷代谢途径的转录组学分析[J]. 文欢,张大燕,彭成,王伟,谢晓芳,饶朝龙,高继海.  中药材. 2017(04)
[3]5种方法提取真菌基因组DNA作为PCR模板效果的比较[J]. 李焕宇,付婷婷,张云,吕天佑,李远,徐秉良.  中国农学通报. 2017(16)
[4]低温胁迫下蒙古黄芪差异表达基因分析[J]. 华梦艺,顾卓雅,殷甘强,王伟,南蓬.  植物生理学报. 2017(04)
[5]采用EF-1α序列分析法对苜蓿根腐病病原菌——锐顶镰刀菌的鉴定[J]. 易铭,梁嘉俊,史建,李洪建,程积民,焦锋.  草业学报. 2017(02)
[6]山西黄芪产业发展思考[J]. 秦雪梅,李爱平,李科,李安平,宁潞宏.  中国中药杂志. 2016(24)
[7]苯丙氨酸解氨酶的研究进展[J]. 杜欣谊.  现代化农业. 2016(07)
[8]接种尖镰孢菌对枸杞苯丙烷代谢关键酶及产物的影响[J]. 李捷,冯丽丹,杨成德,王有科,何静,张宝琳,陈秀蓉.  草业学报. 2016(05)
[9]植物响应病原真菌的代谢组学研究进展[J]. 张凡忠,刘小红,章初龙,林福呈.  中国细胞生物学学报. 2016(04)
[10]机械损伤诱导植物苯丙氨酸解氨酶活性研究进展[J]. 吴琼,方吴云,王文杰.  现代农业科技. 2016(01)

博士论文
[1]蒙古黄芪对干旱胁迫的响应及分子应答机制研究[D]. 贾鑫.内蒙古大学 2016
[2]茶树类黄酮3′-羟基化酶功能分析及其在代谢工程中的应用[D]. 周天山.西北农林科技大学 2016
[3]甘肃环县紫花苜蓿根腐病及其生物防治[D]. 文朝慧.兰州大学 2015
[4]基于液质联用技术的代谢组学新方法的研究与应用[D]. 夏建飞.华东理工大学 2010

硕士论文
[1]基于酶学响应及代谢组变化的根腐病菌Fusarium spp.-黄芪互作研究[D]. 岳换弟.山西大学 2018
[2]基于LC-MS/MS技术的克罗恩病模型大鼠的靶标定量代谢组学研究[D]. 侯婉儿.广州中医药大学 2016
[3]青枯菌接种后花生抗感2个品种中几种防御性酶活性的变化[D]. 王辉.中南民族大学 2011
[4]采后柠檬酸与苹果酸处理对马铃薯块茎干腐病的抑制及其机理[D]. 张庆春.甘肃农业大学 2009



本文编号：3222720