长链脂肪酸对绵羊前体脂肪细胞增殖和分化的影响
发布时间：2021-07-31 09:24
随着生活水平的提高,人们对膳食结构的要求越来越高,畜产品的营养价值、风味品质及卫生安全备受关注,对优质羊肉需求不断加大。肉用动物脂肪分布和甘油三酯的沉积是影响肉质风味和胴体品质的重要因素。动物体脂沉积受前体脂肪细胞增殖和分化的影响,前体脂肪细胞的增殖和分化受多种因素调控。本文采用Ι型胶原酶消化分离小尾寒羊尾部和皮下体脂肪细胞,进行原代培养、传代培养,添加不同长链脂肪酸诱导分化,观察细胞形态,通过油红O染色,实时荧光定量PCR法,研究长链脂肪酸对绵羊前体脂肪细胞增殖活性和成脂分化的影响及其对相关基因表达的影响。实验结果如下:1.小尾寒羊尾部前体脂肪细胞接种后4h开始有少量细胞贴壁,腹部皮下前体脂肪细胞接种后6h后开始有少量细胞贴壁;开始贴壁的细胞形态多为三角形和不规则形状,细胞生长至铺满瓶底时,细胞形态多呈长梭形。细胞生长曲线呈“S”形,尾部前体脂肪细胞倍增时间为22.04 h,显著短于皮下前体脂肪细胞29.56h（P<0.01）;尾部前体脂肪细胞最大增殖密度为58.9×104个/mL,显著大于皮下前体脂肪细胞29.7×104个/mL（P...
【文章来源】：西北民族大学甘肃省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
尾部和皮下前体脂肪细胞分离培养及传代A：尾部前体脂肪细胞培养6d(第一代)；B：尾部前体脂肪细胞培养12d(第一代)；C：尾部前体脂肪细胞培养7d(第二代)；D：皮下前体脂肪细胞培养8d(第一代)；E：皮下前体脂肪细胞培养15d(第一代)；F：皮下前体脂肪细胞培养8d(第二代)
西北民族大学生命科学与工程学院2017级硕士研究生毕业论文17性（图3-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，再换维持分化液培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力（图3-D），将维持分化培养基换为完全培养基，每隔2d换液1次，培养10d后，脂滴体积变大，数量变多，且大部分脂滴融合，使细胞呈戒指状（图3-E），培养至第12d，油红O染色，脂滴染成红色（图3-F）。图3尾部前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色A：对照组诱导5d；B：对照组诱导10d；C：对照组诱导12d后油红O染色；D：实验组诱导5d；E：实验组诱导10d；F：实验组诱导12d后油红O染色。Figure3DifferentiationoftailpreadipocytesandoilredOstainingA:controlgroupinduced5d;B:controlgroupinduced10d;C:controlgroupinduced12doilredOstaining;D:experimentalgroupinduced5d;E:experimentalgroupinduced10d;F:experimentalgroupinduced12doilredOstaining.2.3.3.2皮下前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色皮下前体脂肪细胞添加完全培养基培养3d后，空白对照组细胞形态为长梭形，再换维持分化培养基继续培养2d后，细胞形态仍为长梭形（图4-A），将维持分化培养基换为完全培养基且每隔2d换液，继续培养10d后，细胞形态仍为长梭形，无可辨脂滴（图4-B），培养至第12d，油红O染色，呈阴性（图4-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，换维持分化培养基培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力ABCDEF
西北民族大学生命科学与工程学院2017级硕士研究生毕业论文17性（图3-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，再换维持分化液培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力（图3-D），将维持分化培养基换为完全培养基，每隔2d换液1次，培养10d后，脂滴体积变大，数量变多，且大部分脂滴融合，使细胞呈戒指状（图3-E），培养至第12d，油红O染色，脂滴染成红色（图3-F）。图3尾部前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色A：对照组诱导5d；B：对照组诱导10d；C：对照组诱导12d后油红O染色；D：实验组诱导5d；E：实验组诱导10d；F：实验组诱导12d后油红O染色。Figure3DifferentiationoftailpreadipocytesandoilredOstainingA:controlgroupinduced5d;B:controlgroupinduced10d;C:controlgroupinduced12doilredOstaining;D:experimentalgroupinduced5d;E:experimentalgroupinduced10d;F:experimentalgroupinduced12doilredOstaining.2.3.3.2皮下前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色皮下前体脂肪细胞添加完全培养基培养3d后，空白对照组细胞形态为长梭形，再换维持分化培养基继续培养2d后，细胞形态仍为长梭形（图4-A），将维持分化培养基换为完全培养基且每隔2d换液，继续培养10d后，细胞形态仍为长梭形，无可辨脂滴（图4-B），培养至第12d，油红O染色，呈阴性（图4-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，换维持分化培养基培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力ABCDEF
【参考文献】：
期刊论文
[1]南阳黑猪与长白猪肉品质差异的机制研究[J]. 苗志国,魏攀鹏,柳东阳,张金洲,刘洋,朱建静,郭丽萍. 江苏农业科学. 2019(11)
[2]新西兰兔肌内和皮下前体脂肪细胞原代培养与诱导分化的研究[J]. 陈涛,马立霞,李志鑫,曾勇庆,陈伟. 中国畜牧杂志. 2019(06)
[3]FABP4与肿瘤上皮-间质转化信号通路相关性的研究进展[J]. 张燕,夏敏. 医学综述. 2019(09)
[4]多不饱和脂肪酸对动物脂类代谢的调节作用与机制[J]. 王雪,闫素梅. 动物营养学报. 2019(06)
[5]猪肌源性前体脂肪细胞的分离培养和成脂诱导分化研究[J]. 张宁芳,成志敏,乐宝玉,秦本源,王媛媛,王鹤洁,高鹏飞,郭晓红,李步高,曹果清. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[6]外源性脂肪酸对罗非鱼脂肪细胞增殖与分化的影响[J]. 王雅文,乔芳,张美玲,贾永义,杜震宇. 水生生物学报. 2018(03)
[7]Wnt10b对山羊前体脂肪细胞分化相关基因表达的影响[J]. 林森,林亚秋,朱江江,许晴,赵越,池永东,王永. 畜牧兽医学报. 2018(04)
[8]从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达[J]. 孙成娟,许厚强,赵佳福,陈伟,周迪,张青青. 农业生物技术学报. 2017(12)
[9]梅山猪前体脂肪细胞的分离培养及分化相关基因的表达规律研究[J]. 郑月英,魏胜娟,董书圣,张萌萌,颜培实. 畜牧与兽医. 2017(06)
[10]大鼠前体脂肪细胞分离培养方法的改进[J]. 张孝珍,高广慧,陈妍,张国华. 中兽医医药杂志. 2017(02)
博士论文
[1]中链脂肪酸诱导的棕色脂肪分化和增殖及其在肥胖控制中的作用[D]. 张永.中国人民解放军医学院 2017
[2]EPA及其前体ALA对草鱼脂肪蓄积的调控作用及机制分析[D]. 雷彩霞.西北农林科技大学 2017
[3]BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响及其机制研究[D]. 柴孟龙.吉林农业大学 2016
[4]长链脂肪酸对乳鸽肠道发育及营养物质代谢调控的机理研究[D]. 谢鹏.浙江大学 2013
[5]诱生型热休克蛋白70与TRAF6结合抑制LPS激活的NF-κB信号通路[D]. 陈华群.南京师范大学 2006
硕士论文
[1]CIDEC对奶牛乳腺上皮细胞中FASN表达的调控研究[D]. 吕贺.东北农业大学 2019
[2]肝脏ChREBP-β对糖脂代谢的调节作用及其机制研究[D]. 李昊.中国人民解放军海军军医大学 2019
[3]肝癌细胞中CCAAT增强子结合蛋白α通过组蛋白去乙酰化酶（HDACs）-miRNA上调的机制研究[D]. 胡晓晓.广西医科大学 2019
[4]利用CRISPR/Cas9技术编辑大麦乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）基因[D]. 林萌萌.山东农业大学 2019
[5]肠道菌群与长链脂肪酸代谢关键酶表达的相关性研究[D]. 李冉.浙江工业大学 2018
[6]中链脂肪酸和α亚麻酸对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠去甲肾上腺素、多巴胺代谢以及脑功能的影响[D]. 李峰.中国人民解放军医学院 2018
[7]DNMT3A对猪肌内前体脂肪细胞增殖与分化的作用机制研究[D]. 王香明.西北农林科技大学 2018
[8]原花青素对猪前体脂肪细胞增殖与分化影响的研究[D]. 郑月英.南京农业大学 2017
[9]酶法合成果胶中链脂肪酸酯及其在食品中的应用研究[D]. 熊增星.南昌大学 2017
[10]Marc-145悬浮培养细胞系的建立及培养研究[D]. 马花.西北民族大学 2017
本文编号：3313201
【文章来源】：西北民族大学甘肃省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
尾部和皮下前体脂肪细胞分离培养及传代A：尾部前体脂肪细胞培养6d(第一代)；B：尾部前体脂肪细胞培养12d(第一代)；C：尾部前体脂肪细胞培养7d(第二代)；D：皮下前体脂肪细胞培养8d(第一代)；E：皮下前体脂肪细胞培养15d(第一代)；F：皮下前体脂肪细胞培养8d(第二代)
西北民族大学生命科学与工程学院2017级硕士研究生毕业论文17性（图3-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，再换维持分化液培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力（图3-D），将维持分化培养基换为完全培养基，每隔2d换液1次，培养10d后，脂滴体积变大，数量变多，且大部分脂滴融合，使细胞呈戒指状（图3-E），培养至第12d，油红O染色，脂滴染成红色（图3-F）。图3尾部前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色A：对照组诱导5d；B：对照组诱导10d；C：对照组诱导12d后油红O染色；D：实验组诱导5d；E：实验组诱导10d；F：实验组诱导12d后油红O染色。Figure3DifferentiationoftailpreadipocytesandoilredOstainingA:controlgroupinduced5d;B:controlgroupinduced10d;C:controlgroupinduced12doilredOstaining;D:experimentalgroupinduced5d;E:experimentalgroupinduced10d;F:experimentalgroupinduced12doilredOstaining.2.3.3.2皮下前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色皮下前体脂肪细胞添加完全培养基培养3d后，空白对照组细胞形态为长梭形，再换维持分化培养基继续培养2d后，细胞形态仍为长梭形（图4-A），将维持分化培养基换为完全培养基且每隔2d换液，继续培养10d后，细胞形态仍为长梭形，无可辨脂滴（图4-B），培养至第12d，油红O染色，呈阴性（图4-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，换维持分化培养基培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力ABCDEF
西北民族大学生命科学与工程学院2017级硕士研究生毕业论文17性（图3-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，再换维持分化液培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力（图3-D），将维持分化培养基换为完全培养基，每隔2d换液1次，培养10d后，脂滴体积变大，数量变多，且大部分脂滴融合，使细胞呈戒指状（图3-E），培养至第12d，油红O染色，脂滴染成红色（图3-F）。图3尾部前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色A：对照组诱导5d；B：对照组诱导10d；C：对照组诱导12d后油红O染色；D：实验组诱导5d；E：实验组诱导10d；F：实验组诱导12d后油红O染色。Figure3DifferentiationoftailpreadipocytesandoilredOstainingA:controlgroupinduced5d;B:controlgroupinduced10d;C:controlgroupinduced12doilredOstaining;D:experimentalgroupinduced5d;E:experimentalgroupinduced10d;F:experimentalgroupinduced12doilredOstaining.2.3.3.2皮下前体脂肪细胞诱导分化及油红O染色皮下前体脂肪细胞添加完全培养基培养3d后，空白对照组细胞形态为长梭形，再换维持分化培养基继续培养2d后，细胞形态仍为长梭形（图4-A），将维持分化培养基换为完全培养基且每隔2d换液，继续培养10d后，细胞形态仍为长梭形，无可辨脂滴（图4-B），培养至第12d，油红O染色，呈阴性（图4-C）；添加分化诱导培养基培养3d后，实验组细胞形态由长梭形变成椭圆形，换维持分化培养基培养2d后，细胞体积变大，而且细胞质中开始出现可辨的小脂滴，此时，细胞分化已经开始接近分化终末阶段，细胞再无无分裂增殖的能力ABCDEF
【参考文献】：
期刊论文
[1]南阳黑猪与长白猪肉品质差异的机制研究[J]. 苗志国,魏攀鹏,柳东阳,张金洲,刘洋,朱建静,郭丽萍. 江苏农业科学. 2019(11)
[2]新西兰兔肌内和皮下前体脂肪细胞原代培养与诱导分化的研究[J]. 陈涛,马立霞,李志鑫,曾勇庆,陈伟. 中国畜牧杂志. 2019(06)
[3]FABP4与肿瘤上皮-间质转化信号通路相关性的研究进展[J]. 张燕,夏敏. 医学综述. 2019(09)
[4]多不饱和脂肪酸对动物脂类代谢的调节作用与机制[J]. 王雪,闫素梅. 动物营养学报. 2019(06)
[5]猪肌源性前体脂肪细胞的分离培养和成脂诱导分化研究[J]. 张宁芳,成志敏,乐宝玉,秦本源,王媛媛,王鹤洁,高鹏飞,郭晓红,李步高,曹果清. 畜牧兽医学报. 2018(12)
[6]外源性脂肪酸对罗非鱼脂肪细胞增殖与分化的影响[J]. 王雅文,乔芳,张美玲,贾永义,杜震宇. 水生生物学报. 2018(03)
[7]Wnt10b对山羊前体脂肪细胞分化相关基因表达的影响[J]. 林森,林亚秋,朱江江,许晴,赵越,池永东,王永. 畜牧兽医学报. 2018(04)
[8]从江香猪肌内和皮下脂肪前体细胞分化过程中相关基因的表达[J]. 孙成娟,许厚强,赵佳福,陈伟,周迪,张青青. 农业生物技术学报. 2017(12)
[9]梅山猪前体脂肪细胞的分离培养及分化相关基因的表达规律研究[J]. 郑月英,魏胜娟,董书圣,张萌萌,颜培实. 畜牧与兽医. 2017(06)
[10]大鼠前体脂肪细胞分离培养方法的改进[J]. 张孝珍,高广慧,陈妍,张国华. 中兽医医药杂志. 2017(02)
博士论文
[1]中链脂肪酸诱导的棕色脂肪分化和增殖及其在肥胖控制中的作用[D]. 张永.中国人民解放军医学院 2017
[2]EPA及其前体ALA对草鱼脂肪蓄积的调控作用及机制分析[D]. 雷彩霞.西北农林科技大学 2017
[3]BMP2对猪前体脂肪细胞分化的影响及其机制研究[D]. 柴孟龙.吉林农业大学 2016
[4]长链脂肪酸对乳鸽肠道发育及营养物质代谢调控的机理研究[D]. 谢鹏.浙江大学 2013
[5]诱生型热休克蛋白70与TRAF6结合抑制LPS激活的NF-κB信号通路[D]. 陈华群.南京师范大学 2006
硕士论文
[1]CIDEC对奶牛乳腺上皮细胞中FASN表达的调控研究[D]. 吕贺.东北农业大学 2019
[2]肝脏ChREBP-β对糖脂代谢的调节作用及其机制研究[D]. 李昊.中国人民解放军海军军医大学 2019
[3]肝癌细胞中CCAAT增强子结合蛋白α通过组蛋白去乙酰化酶（HDACs）-miRNA上调的机制研究[D]. 胡晓晓.广西医科大学 2019
[4]利用CRISPR/Cas9技术编辑大麦乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）基因[D]. 林萌萌.山东农业大学 2019
[5]肠道菌群与长链脂肪酸代谢关键酶表达的相关性研究[D]. 李冉.浙江工业大学 2018
[6]中链脂肪酸和α亚麻酸对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠去甲肾上腺素、多巴胺代谢以及脑功能的影响[D]. 李峰.中国人民解放军医学院 2018
[7]DNMT3A对猪肌内前体脂肪细胞增殖与分化的作用机制研究[D]. 王香明.西北农林科技大学 2018
[8]原花青素对猪前体脂肪细胞增殖与分化影响的研究[D]. 郑月英.南京农业大学 2017
[9]酶法合成果胶中链脂肪酸酯及其在食品中的应用研究[D]. 熊增星.南昌大学 2017
[10]Marc-145悬浮培养细胞系的建立及培养研究[D]. 马花.西北民族大学 2017
本文编号：3313201
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