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TaADC在小麦抵抗叶锈菌侵染中的功能分析

发布时间:2021-08-05 11:14
  小麦叶锈病是由小麦叶锈菌(Puccinia triticina)侵染引起的一种真菌病害,对小麦生产危害严重。小麦叶锈菌属于活体营养型真菌,在小麦与叶锈菌互作的不亲和组合中,小麦以过敏性反应(Hypersentive reaction,HR)的方式对叶锈菌的侵染进行抵抗。多胺(Polyamines,PAs)是普遍存在于生物体内的一类生物代谢分子。近些年的研究发现,多胺在植物生长、发育及响应胁迫等方面具有重要作用。实验室前期获得了一个小麦与叶锈菌互作的转录组数据库,我们通过分析该库,筛选到多胺合成途径中的关键酶基因TaADC在不亲和组合及亲和组合中的表达差异明显。在此基础上,本试验分别以小麦近等基因系TcLr26和其轮回亲本Tc与叶锈菌生理小种260的互作体系为研究对象,探讨TaADC在小麦抵抗叶锈菌侵染中的作用。所得主要试验结果如下:1.利用实时定量PCR技术检测TaADC在小麦与叶锈菌互作过程中的表达特征。结果表明TaADC在不亲和组合中被诱导表达;而在亲和组合中随着侵染时间的延长,TaADC的表达量没有明显变化。2.构建携带35S::TaADC-GFP重组质粒的亚细胞定位载体,瞬时转... 

【文章来源】:河北农业大学河北省

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

TaADC在小麦抵抗叶锈菌侵染中的功能分析


图2?TaADC卞物信以学分析??注:A:?TaADC???l'丨保?、’j:结构域须测:B:?TaADC系统发肖树??Fig.2?Ta?

序列,标尺,细胞,序列


?河北农业大学硕士学位(毕业)论文???焚光Fluorescence?明场Bright?field?叠加Merged??■關關???金,??■纘囉??图6?TaADC亚细胞定位观察(标尺=20?pm)??Fig.?6?Subcellular?localization?of?TaADC?(Bar=20?^m)??3.4利用VIGS技术研究rwzx:的功能??3.4.1?构建?BSMV:raADC?载体??本试验利用大麦条纹花叶病毒BSMV作为载体进行H的基因的沉默。选取??的特异序列,设计引物,并在引物的两端加上7v〇?i酶切位点,选取的片??段人小为291?bp。利用电泳检测产物的正确性,如图7,?的特异序列的位??置正确。因此回收目的片段并连接T载体后转化大肠杆菌,挑选带有7^4/X:的??特异序列的阳性克隆送公司测序。??20??

片段,质粒,载体,锈菌


?精氨酸脱羧酶基因7bylPC在小麦抗叶锈菌中的功能分析???bp?M?12??CM]:.:':.'::.,??:Ffl??500?P變碧麵S:???i??:?1291bP??W??图7?7?/JDC沉默片段扩增??注:M:?DL2000?DNAMarker;?1,2:?7^DC?的?VIGS?片段;??Fig.?7?Silenced?TaADC?fragment?was?amplified??Note:?M:?DL?2000?DNA?Marker;?1?,2:?the?VIGS?fragment?of?TaADC??分别将测序正确的阳性质粒和终载体PSL038-1酶切,回收酶切过的片段并??把他们相连接,然后将成功连接的载体转化至DH5a感受态细胞中。利用yVo/1??进行酶切,如图8所示,并将该质粒记作BSMV:?7^1DC。??bp?M?1?2??2_?i?|??1000?I??750?I?L、??M)〇?291?bp??图8酶切BSMV:?7^DC质粒??‘;M:?Marker;?1.?阳性对照;2:?酶切产物;??Fig.8?BSMV:?TaADC?plasmid?was?digested??Note:?Marker;?1:?positive?control;?2:?digested?production?ofBSMV:?TaADC??21??

【参考文献】:
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硕士论文
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[2]腐胺和水杨酸在缓解番茄和拟南芥幼苗低温胁迫中的作用[D]. 王川泰.沈阳农业大学 2016
[3]棉花多胺氧化酶GhPAOs基因的克隆及初步功能分析[D]. 成新琪.石河子大学 2016
[4]甘蓝型油菜精氨酸脱羧酶基因的克隆及原核表达[D]. 洪林.西南大学 2011



本文编号:3323654

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