ZmSec14p基因的玉米遗传转化及体细胞胚胎发生遗传研究

发布时间：2021-08-22 04:30

　　玉米（Zea mays L.）是世界上重要的农物之一,种植面积广泛。随着需求量的不断增长,急需提高玉米的产量。玉米分子育种的快速发展,使得这种需求成为现实,尤其遗传转化技术的应用,将许多功能基因转入玉米改良目标性状。所以不断寻找优良遗传转化受体、研究其发生的遗传学规律,利用优良受体进行功能基因的遗传转化具有重要的理论和现实意义。本实验室前期选育出玉米抗冷自交系W9816,从中克隆了冷响应基因ZmSec14p（accession no.KT932998）,并证明了其抗冷功能。玉米自交系Y423是本实验室选育的高体细胞胚胎诱导材料。在此基础上,本研究优化Y423体细胞胚胎诱导体系、遗传转化体系,进行了ZmSec14p基因的遗传转化、并对Y423体细胞胚胎发生进行了遗传分析。具体研究结果如下:1.优化了Y423体细胞胚胎发生体系。当继代培养天数为16天,继代培养次数为T3代时体细胞胚胎的发生率最高。当继代培养基中甘露醇浓度达到7.5g/L时,可将Ⅲ型愈伤组织转化成Ⅱ型胚性愈伤组织。在Y423成熟种子中成功诱导出胚性愈伤组织并分化成苗。2.优化了农杆菌介导的Y423遗传转化体系并进行了ZmSe... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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Y423玉米愈伤组织的三种类型Figure2.1ThreetypesofY423maizecallus

第二章玉米Y423体细胞胚胎发生及优化13在愈伤组织继代培养过程中，这三类愈伤组织可以向其他类型愈伤组织状态转变，但是只有Ⅱ型愈伤组织可以最终形成体细胞胚胎并诱导出再生苗。研究表明继代培养次数对Ⅱ型愈伤组织诱导率有直接影响。本实验选取了三个继代梯度，分别是T3代、T4代、T5代。每隔16天对愈伤组织进行一次继代培养并对愈伤组织的类型进行统计。所得数据如下：T3代愈伤组织共获得3405块，Ⅱ型愈伤组织所占比例64.52％；获得T4代愈伤组织10115块，Ⅱ型愈伤组织所占比例61.20％；T5代愈伤组织31675块，Ⅱ型愈伤组织所占比例57.36％，如图2.2。继代培养3次时，Ⅱ型愈伤组织诱导率最高，且继代培养次数越多，诱导率呈下降趋势，Ⅲ型愈伤组织诱导率增加。在玉米愈伤组织继代培养过程中，继代培养次数的增加，愈伤组织数量会大幅度增加，为控制单一变量避免环境误差，每一代的继代时间应为3-4天，因此本实验继代次数不宜超过T5代，如图2.3。图2.2Ⅱ型愈伤组织诱导率Figure2.2InductionrateofTypeⅡcallus

部分Y423T5代愈伤组织


本文编号：3357002