绵羊尾形态结构比较及其尾脂沉积相关基因的进化关系研究
发布时间：2021-08-27 23:47
绵羊尾型是养羊业一个重要的经济性状,本文以四种尾型绵羊[长脂尾型的滩羊（Tan）、短脂尾型的小尾寒羊（STH）、长瘦尾型的甘肃高山细毛羊（GAF）以及短瘦尾型的藏绵羊（Tib）]为研究对象,利用分子生物学、形态学等方法从四种尾型绵羊尾部的形态学以及调控尾脂沉积相关基因的角度,分析脂尾羊及瘦尾羊的尾脂沉积性状差异及其调控机理,并对关键基因进行进化和多态性研究,为进一步认识脂尾羊和瘦尾羊的遗传分化关系奠定基础。研究结果表明:（1）对于尾部表型来说,尾宽和尾厚与尾脂沉积呈正相关关系;（2）长尾型绵羊第一、二类尾椎总数一般为13枚,第三、四类尾椎总数由于退化程度不同其个体之间差异较大;短尾型绵羊第一、二类尾椎总数一般为9枚,第三、四类尾椎总数及退化程度个体差异较小;（3）不同尾型之间,椎体带横突宽与尾脂沉积量正相关,且在长脂尾型绵羊（Tan）中宽度最大,在短瘦尾型绵羊（Tib）中宽度最小;（4）与瘦尾型绵羊相比,脂尾型绵羊主要通过增加脂肪细胞数目同时抑制脂降解途径增加尾脂沉积;（5）脂代谢关键性基因PLIN1在脂尾型绵羊中存在脂溶性氨基酸由丙氨酸向缬氨酸的有义突变,其可能与其蛋白结构与功能差异...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
试验流程图
兰州大学硕士学位论文绵羊尾形态结构比较及其尾脂沉积相关基因的进化关系研究162.3方法2.3.1尾部测量测定指标包括胴体重、尾长、尾宽、尾厚和尾重，参考GB/T-17237-2008、GB/T-12694-2016、GB/T-51225-2017标准观测四种不同尾型绵羊。胴体重：屠宰并放血，除去毛皮、内脏、头和蹄之后的重量。尾长：自然状态下，绵羊活体尾根部至尾尖的垂直距离，利用卷尺测量。尾宽；自然状态下，绵羊活体尾巴上部最宽处的水平距离，利用卷尺测量。尾厚：自然状态下，绵羊活体最厚处的厚度，利用卷尺测量。尾重：屠宰后尾巴除去毛皮后的重量，利用电子天平测量。2.3.2尾椎CT扫描与三维重构后测量（1）绵羊尾除去尾脂后利用兰州大学医学院小动物辐照系统对尾椎进行CT扫描，并利用Mimics20软件对扫描得到的DCM格式的尾椎数据进行降噪等处理后三维重构分析。（2）对CT得到的尾椎扫描图和三维重构后的尾椎进行测量并取平均值作为测量值，并且每种尾型绵羊随机抽取一个样本采用游标卡尺对数据进行检验。图2-1尾椎测定模式图Figure2-1caudalvertebrameasurementmodel
兰州大学硕士学位论文绵羊尾形态结构比较及其尾脂沉积相关基因的进化关系研究18图2-2细胞直径测定模式图Figure2-2Celldiametermeasurementmodel2.3.5RT-qPCR（1）总RNA提取所有与RNA提取相关的实验器具均使用DEPC水洗净高压灭菌处理，枪头、离心管等塑料制品均采用无RNA酶处理的产品，且提取过程在无菌台中完成，并且离心都在4℃环境中进行。a.将研钵用DEPC水润洗浸泡1h，用锡纸完全包紧于烘箱160℃灭菌4h后,放置室温冷却，放入-20℃待用。b.去除研钵表面锡箔纸，倒入液氮预冷，待液氮不再剧烈沸腾时，加入0.1mg脂肪组织样并快速充分研磨，期间补加液氮，保证样品一直处于低温中。c.在超净工作台中将完全研磨的样品收集到无RNA酶的1.5mLEP管中，快速添加1mLTrizol并振荡混匀。d.4℃离心机中12,000rpm离心10min。得到的溶液分三层，只取中间一层并移入新无RNA酶EP管中，添加200μL氯仿后振荡混匀，直至溶液变为乳白色，冰上静置5min使得蛋白变性并与核酸分离。e.混匀，4℃离心机中12,000rpm离心10min。吸取500μL上清到新无RNA酶EP管，添加500μL异丙醇，上下颠倒数次后静置10min。f.4℃，12,000rpm离心15min后弃去上清，保留沉淀（总RNA），添加1mL无水乙醇，轻弹起沉淀并悬浮于溶液中。
【参考文献】：
期刊论文
[1]5号染色体两候选SNP基因定位以及与绵羊臀尾性状的关联分析[J]. 唐红,徐梦思,孟季猛,周平,王立民,沈敏,高磊,石国庆,刘守仁,王新华,杨井泉,甘尚权. 畜牧与兽医. 2016(09)
[2]不同尾型绵羊全基因组选择信号检测[J]. 刘真,王慧华,刘瑞凿,吴明明,张淑珍,张莉,赵福平,杜立新,魏彩虹. 畜牧兽医学报. 2015(10)
[3]MicroRNA调控动物脂肪细胞分化研究进展[J]. 张进威,罗毅,王宇豪,何刘军,李明洲,王讯. 遗传. 2015(12)
[4]肥胖的基础研究[J]. 于进海,周林康,吴丽贞,李蓬. 生命科学. 2015(03)
[5]不同日龄阿勒泰大尾羊脂肪组织形态学及血脂指标的比较[J]. 王金泉,王肖燕,臧长江,刘武军,彭华刚,王琦,岳晓帆,姚刚. 中国畜牧兽医. 2014(12)
[6]兰州大尾羊尾巴的形态特征与断尾方法研究[J]. 闫振龙,温建维,赵生国,朱灿灿,李路,韩志磊,王白雪,刘英,吴建平. 甘肃农业大学学报. 2014(06)
[7]脂肪组织冰冻切片油红O滴染法的建立[J]. 王肖燕,王金泉,姚刚,张继红. 家畜生态学报. 2014(08)
[8]Distinction of white,beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells[J]. Anna Park,Won Kon Kim,Kwang-Hee Bae. World Journal of Stem Cells. 2014(01)
[9]X染色体60149273位点在脂尾（臀）和瘦尾绵羊品种中的多态性及其基因定位[J]. 甘尚权,沈敏,李欢,梁耀伟,杨井泉,高磊,刘守仁,王新华. 中国农业科学. 2013(22)
[10]绵羊X染色体59571364与59912586位点在脂尾、瘦尾绵羊群体中的多态性检测及分析[J]. 张伟,沈敏,李欢,高磊,梁耀伟,杨井泉,刘守仁,王新华,甘尚权. 遗传. 2013(12)
博士论文
[1]不同尾型绵羊全基因组关联分析、拷贝数变异及选择信号检测[D]. 朱才业.中国农业大学 2017
[2]脂尾型绵羊尾部脂肪富集的蛋白质组学研究[D]. 韩吉龙.中国农业科学院 2016
[3]C57BL/6J小鼠白色脂肪与棕色脂肪组织蛋白质组学研究[D]. 李娟.北京协和医学院 2015
[4]肥胖与非肥胖男性内脏及皮下脂肪差异蛋白质组学研究[D]. 周姝含.北京协和医学院 2012
硕士论文
[1]秦川牛基因组遗传变异及其与脊椎数的关系研究[D]. 奚玉莲.西北农林科技大学 2016
[2]乌珠穆沁羊羊尾的理化分析及羊油皂的研发[D]. 李响.内蒙古农业大学 2014
本文编号：3367344
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
试验流程图
兰州大学硕士学位论文绵羊尾形态结构比较及其尾脂沉积相关基因的进化关系研究162.3方法2.3.1尾部测量测定指标包括胴体重、尾长、尾宽、尾厚和尾重，参考GB/T-17237-2008、GB/T-12694-2016、GB/T-51225-2017标准观测四种不同尾型绵羊。胴体重：屠宰并放血，除去毛皮、内脏、头和蹄之后的重量。尾长：自然状态下，绵羊活体尾根部至尾尖的垂直距离，利用卷尺测量。尾宽；自然状态下，绵羊活体尾巴上部最宽处的水平距离，利用卷尺测量。尾厚：自然状态下，绵羊活体最厚处的厚度，利用卷尺测量。尾重：屠宰后尾巴除去毛皮后的重量，利用电子天平测量。2.3.2尾椎CT扫描与三维重构后测量（1）绵羊尾除去尾脂后利用兰州大学医学院小动物辐照系统对尾椎进行CT扫描，并利用Mimics20软件对扫描得到的DCM格式的尾椎数据进行降噪等处理后三维重构分析。（2）对CT得到的尾椎扫描图和三维重构后的尾椎进行测量并取平均值作为测量值，并且每种尾型绵羊随机抽取一个样本采用游标卡尺对数据进行检验。图2-1尾椎测定模式图Figure2-1caudalvertebrameasurementmodel
兰州大学硕士学位论文绵羊尾形态结构比较及其尾脂沉积相关基因的进化关系研究18图2-2细胞直径测定模式图Figure2-2Celldiametermeasurementmodel2.3.5RT-qPCR（1）总RNA提取所有与RNA提取相关的实验器具均使用DEPC水洗净高压灭菌处理，枪头、离心管等塑料制品均采用无RNA酶处理的产品，且提取过程在无菌台中完成，并且离心都在4℃环境中进行。a.将研钵用DEPC水润洗浸泡1h，用锡纸完全包紧于烘箱160℃灭菌4h后,放置室温冷却，放入-20℃待用。b.去除研钵表面锡箔纸，倒入液氮预冷，待液氮不再剧烈沸腾时，加入0.1mg脂肪组织样并快速充分研磨，期间补加液氮，保证样品一直处于低温中。c.在超净工作台中将完全研磨的样品收集到无RNA酶的1.5mLEP管中，快速添加1mLTrizol并振荡混匀。d.4℃离心机中12,000rpm离心10min。得到的溶液分三层，只取中间一层并移入新无RNA酶EP管中，添加200μL氯仿后振荡混匀，直至溶液变为乳白色，冰上静置5min使得蛋白变性并与核酸分离。e.混匀，4℃离心机中12,000rpm离心10min。吸取500μL上清到新无RNA酶EP管，添加500μL异丙醇，上下颠倒数次后静置10min。f.4℃，12,000rpm离心15min后弃去上清，保留沉淀（总RNA），添加1mL无水乙醇，轻弹起沉淀并悬浮于溶液中。
【参考文献】：
期刊论文
[1]5号染色体两候选SNP基因定位以及与绵羊臀尾性状的关联分析[J]. 唐红,徐梦思,孟季猛,周平,王立民,沈敏,高磊,石国庆,刘守仁,王新华,杨井泉,甘尚权. 畜牧与兽医. 2016(09)
[2]不同尾型绵羊全基因组选择信号检测[J]. 刘真,王慧华,刘瑞凿,吴明明,张淑珍,张莉,赵福平,杜立新,魏彩虹. 畜牧兽医学报. 2015(10)
[3]MicroRNA调控动物脂肪细胞分化研究进展[J]. 张进威,罗毅,王宇豪,何刘军,李明洲,王讯. 遗传. 2015(12)
[4]肥胖的基础研究[J]. 于进海,周林康,吴丽贞,李蓬. 生命科学. 2015(03)
[5]不同日龄阿勒泰大尾羊脂肪组织形态学及血脂指标的比较[J]. 王金泉,王肖燕,臧长江,刘武军,彭华刚,王琦,岳晓帆,姚刚. 中国畜牧兽医. 2014(12)
[6]兰州大尾羊尾巴的形态特征与断尾方法研究[J]. 闫振龙,温建维,赵生国,朱灿灿,李路,韩志磊,王白雪,刘英,吴建平. 甘肃农业大学学报. 2014(06)
[7]脂肪组织冰冻切片油红O滴染法的建立[J]. 王肖燕,王金泉,姚刚,张继红. 家畜生态学报. 2014(08)
[8]Distinction of white,beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells[J]. Anna Park,Won Kon Kim,Kwang-Hee Bae. World Journal of Stem Cells. 2014(01)
[9]X染色体60149273位点在脂尾（臀）和瘦尾绵羊品种中的多态性及其基因定位[J]. 甘尚权,沈敏,李欢,梁耀伟,杨井泉,高磊,刘守仁,王新华. 中国农业科学. 2013(22)
[10]绵羊X染色体59571364与59912586位点在脂尾、瘦尾绵羊群体中的多态性检测及分析[J]. 张伟,沈敏,李欢,高磊,梁耀伟,杨井泉,刘守仁,王新华,甘尚权. 遗传. 2013(12)
博士论文
[1]不同尾型绵羊全基因组关联分析、拷贝数变异及选择信号检测[D]. 朱才业.中国农业大学 2017
[2]脂尾型绵羊尾部脂肪富集的蛋白质组学研究[D]. 韩吉龙.中国农业科学院 2016
[3]C57BL/6J小鼠白色脂肪与棕色脂肪组织蛋白质组学研究[D]. 李娟.北京协和医学院 2015
[4]肥胖与非肥胖男性内脏及皮下脂肪差异蛋白质组学研究[D]. 周姝含.北京协和医学院 2012
硕士论文
[1]秦川牛基因组遗传变异及其与脊椎数的关系研究[D]. 奚玉莲.西北农林科技大学 2016
[2]乌珠穆沁羊羊尾的理化分析及羊油皂的研发[D]. 李响.内蒙古农业大学 2014
本文编号：3367344
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