无血清规模化培养MDCK细胞的关键控制点研究
发布时间：2021-11-24 08:35
我国目前流感病毒疫苗都是利用鸡胚基质生产的。然而,由于鸡胚数量的限制和鸡胚工艺扩大生产的可及性差,一旦大流感来临时,用鸡胚基质生产的流感疫苗将远远不能够满足人们需求。而以细胞基质生产流感疫苗则不受鸡胚数量的限制、质量可控、易于扩大规模,且能适用于对鸡蛋蛋白过敏的人群。MDCK细胞是当前最受关注的流感疫苗生产的细胞基质之一。细胞基质病毒性疫苗的培养常常可分为两个阶段,即细胞生长期和产毒期。为了更加高效和经济的研发可靠的疫苗生产工艺,首先设计在实验室规模利用摇床和摇瓶摸索了基本工艺并优化工艺参数。确定细胞传代的参数,按梯度密度（2×106、1.5×106、1×106、7×105和5×105cells/mL）接种细胞于细胞摇瓶,然后对比不同细胞接种密度的细胞生长曲线,同时,监测各实验组间的细胞活率、细胞代谢和细胞周期情况,结果表明在48h时,各梯度密度接种都处于细胞生长分裂的对数生长期,细胞增长最高达到了8.3×106 cells/mL;各梯度密度的细胞接种几乎...
【文章来源】：武汉生物制品研究所湖北省
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
缩略词表
摘要
Abstract
前言
技术路线
第一章 基于MDCK细胞培养的基本工艺参数摸索
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.3 实验结果
1.4 小结与讨论
第二章 悬浮MDCK细胞培养工艺的优化研究
2.1 实验材料
2.2 实验设计
2.3 实验结果
2.4 小结与讨论
第三章 悬浮MDCK细胞培养的规模化放大研究
3.1 实验材料
3.2 实验方法
3.3 实验结果
3.4 小结与讨论
第四章 总结和展望
4.1 总结
4.2 创新点
4.3 展望
参考文献
综述
参考文献
在读期间论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]悬浮MDCK细胞培养H7N9流感病毒时TPCK胰酶添加量的优化研究[J]. 孟子延,张家友,刘琛,张哲罡,邱冉,罗丹,施金荣,赵巍,夏志武,杨晓明. 中华微生物学和免疫学杂志. 2019 (11)
[2]TPCK胰酶和普通胰酶对各亚型流感病毒在MDCK细胞分离培养中的影响[J]. 马萍,李欣玥. 中国卫生检验杂志. 2017(18)
[3]犬肾细胞MDCK研究进展[J]. 万玉林,陶世宇,武发菊,柴立丽,安芳兰,杨进才,刘学荣. 安徽农业科学. 2017(23)
[4]A549细胞冻存与复苏方法的改进[J]. 季晓宇,鞠晓梅,汤贺,姜萌,罗来鹏,刘宇轩,侯毅鞠. 中国科技信息. 2016(13)
[5]规模化哺乳细胞培养技术生产病毒疫苗——过程工程和生物反应器[J]. 杨艳坤,郭雯雯,隋涌,白仲虎. 生物产业技术. 2015(01)
[6]反应器细胞悬浮培养和微载体培养技术在动物疫苗生产中的应用[J]. 张韧,王建超,陈文庆,刘华杰,高飞,徐舸辰,林龙飞. 中国兽药杂志. 2012(11)
[7]BHK21细胞冻存密度与复苏后活力的关系分析[J]. 郭海平,郭冠萍,郝鹏. 畜牧与饲料科学. 2010(03)
[8]微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究[J]. 李春艳,肖晶,李曦,刘娣. 中国人兽共患病学报. 2009(12)
[9]Apoptosis and Proinflammatory Cytokine Responses of Primary Mouse Microglia and Astrocytes Induced by Human H1N1 and Avian H5N1 Influenza Viruses[J]. Gefei Wang1,2,Juan Zhang1,2,Weizhong Li1,2,Gang Xin1,2,Yun Su1,2,Yuanli Gao1,2,Heng Zhang1,2,Guimei Lin1,2,Xiaoyang Jiao1,2 and Kangsheng Li1,2,3 1Department of Microbiology and Immunology,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China; 2The Key Immunopathology Laboratory of Guangdong Province,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China. Cellular & Molecular Immunology. 2008(02)
[10]动物细胞培养用生物反应器及其力学环境[J]. 何辉,樊瑜波. 生物医学工程学杂志. 2004(03)
博士论文
[1]基于MDCK细胞高密度培养的甲型流感病毒疫苗生产工艺开发与优化[D]. 黄锭.华东理工大学 2016
硕士论文
[1]动物细胞培养用生物反应器内流体混合及气液传质特性研究[D]. 郑兵兵.华东理工大学 2013
本文编号：3515611
【文章来源】：武汉生物制品研究所湖北省
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
缩略词表
摘要
Abstract
前言
技术路线
第一章 基于MDCK细胞培养的基本工艺参数摸索
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.3 实验结果
1.4 小结与讨论
第二章 悬浮MDCK细胞培养工艺的优化研究
2.1 实验材料
2.2 实验设计
2.3 实验结果
2.4 小结与讨论
第三章 悬浮MDCK细胞培养的规模化放大研究
3.1 实验材料
3.2 实验方法
3.3 实验结果
3.4 小结与讨论
第四章 总结和展望
4.1 总结
4.2 创新点
4.3 展望
参考文献
综述
参考文献
在读期间论文发表情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]悬浮MDCK细胞培养H7N9流感病毒时TPCK胰酶添加量的优化研究[J]. 孟子延,张家友,刘琛,张哲罡,邱冉,罗丹,施金荣,赵巍,夏志武,杨晓明. 中华微生物学和免疫学杂志. 2019 (11)
[2]TPCK胰酶和普通胰酶对各亚型流感病毒在MDCK细胞分离培养中的影响[J]. 马萍,李欣玥. 中国卫生检验杂志. 2017(18)
[3]犬肾细胞MDCK研究进展[J]. 万玉林,陶世宇,武发菊,柴立丽,安芳兰,杨进才,刘学荣. 安徽农业科学. 2017(23)
[4]A549细胞冻存与复苏方法的改进[J]. 季晓宇,鞠晓梅,汤贺,姜萌,罗来鹏,刘宇轩,侯毅鞠. 中国科技信息. 2016(13)
[5]规模化哺乳细胞培养技术生产病毒疫苗——过程工程和生物反应器[J]. 杨艳坤,郭雯雯,隋涌,白仲虎. 生物产业技术. 2015(01)
[6]反应器细胞悬浮培养和微载体培养技术在动物疫苗生产中的应用[J]. 张韧,王建超,陈文庆,刘华杰,高飞,徐舸辰,林龙飞. 中国兽药杂志. 2012(11)
[7]BHK21细胞冻存密度与复苏后活力的关系分析[J]. 郭海平,郭冠萍,郝鹏. 畜牧与饲料科学. 2010(03)
[8]微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究[J]. 李春艳,肖晶,李曦,刘娣. 中国人兽共患病学报. 2009(12)
[9]Apoptosis and Proinflammatory Cytokine Responses of Primary Mouse Microglia and Astrocytes Induced by Human H1N1 and Avian H5N1 Influenza Viruses[J]. Gefei Wang1,2,Juan Zhang1,2,Weizhong Li1,2,Gang Xin1,2,Yun Su1,2,Yuanli Gao1,2,Heng Zhang1,2,Guimei Lin1,2,Xiaoyang Jiao1,2 and Kangsheng Li1,2,3 1Department of Microbiology and Immunology,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China; 2The Key Immunopathology Laboratory of Guangdong Province,Shantou University Medical College,Shantou 515041,China. Cellular & Molecular Immunology. 2008(02)
[10]动物细胞培养用生物反应器及其力学环境[J]. 何辉,樊瑜波. 生物医学工程学杂志. 2004(03)
博士论文
[1]基于MDCK细胞高密度培养的甲型流感病毒疫苗生产工艺开发与优化[D]. 黄锭.华东理工大学 2016
硕士论文
[1]动物细胞培养用生物反应器内流体混合及气液传质特性研究[D]. 郑兵兵.华东理工大学 2013
本文编号：3515611
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/zaizhiyanjiusheng/3515611.html
教材专著
