银鲑染色体倍性鉴定、性腺分化和生长的初步研究

发布时间：2017-05-10 15:09

  本文关键词：银鲑染色体倍性鉴定、性腺分化和生长的初步研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为了解从日本引进的银鲑的主要生物学特征,促进银鲑{Oncorhynchus kisutch)在国内的养殖,本文对其物种鉴定、染色体倍性鉴定、性腺分化和生长等进行研究,结果如下：1、采用形态学,结合线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因(COI)、线粒体12S rRNA基因对引进的疑似银鲑幼鱼进行鉴定,结果表明本次引进的种类为银鲑(Oncorhynchus kisutch)。2、对本次引进的银鲑采用染色体计数法进行倍性鉴定,结果表明其为二倍体。其染色体数目为2n=60,核型特征为2n=44m+10sm+6st,染色体臂数NF=114。3、尾静脉采血制作血涂片,测定银鲑红细胞及其细胞核大小,结果为红细胞长径13.81+0.86μm,短径8.05+0.45μm,表面积87.24+7.85μm2,体积469.84+63.9μm2；红细胞核长径为6.98+0.38μm,短径为3.69+0.26μm,表面积为20.23+1.93μm2,体积为50.07+7.96μm3。以国际通用的DNA含量为2.30 pg/N的公鸡血细胞作为DNA标准对照,采用流式细胞仪测定出银鲑DNA含量为4.58+0.67(pg/N)。以上结果可以为红细胞及其细胞核大小法和DNA含量法进行银鲑的倍性鉴定提供参考。4、在10～22℃的自然水温条件下,运用组织学方法研究银鲑性腺分化的特征,实验147天,取样周期为7天,结果表明：银鲑卵巢的细胞学分化发生在出膜后58天,积温为出膜后579℃·d,标志为初级卵母细胞的出现；卵巢的解剖学分化发生在出膜后69天,积温为出膜后692℃·d,标志为卵巢腔的形成。精巢的细胞学分化发生在出膜后108天,积温为出膜后1246℃·d,标志为初级精母细胞的出现；精巢的解剖学分化发生出膜后69天,积温为出膜后692℃·d,标志为输精管的形成。银鲑卵巢分化时间比精巢早11天,积温少113℃·d。因此,在本实验条件下采用药物法进行银鲑性别控制的时间,应在卵巢分化以前。5、在水温为12-26℃,温度梯度为2℃,对银鲑进行20日的控温养殖实验,研究温度对其生长的影响。结果表明：水温达到24℃,会导致银鲑死亡,随着温度的增加,死亡速度加快。24℃时第1尾死亡时间为第2天,半数死亡时间为第16天,全部死亡时间为第19天：26℃时第1尾死亡时间为第2天,半数死亡时间为第3天,全部死亡时间为第5天。在水温12～18℃范围内,银鲑的特定生长率随着温度的升高而增加,在16～18℃时特定生长率显著高于其余组,18℃时特定生长率最大,为5.15+0.05(%/d),表明银鲑最适生长温度为18℃。在18～22℃特定生长率随着温度的升高而降低,22℃时特定生长率最小,为2.36±0.03(%/d)。此结果可以为银鲑的养殖提供参考。6、在8-18℃的自然水温条件下,研究脱壳卤虫卵、蛋黄、鲑鳟成鱼饲料、微粒饲料和冰鲜水蚯蚓5种开口饵料对银鲑仔鱼生长的影响,实验周期30日。结果表明：5种饵料显著影响银鲑生长,脱壳卤虫卵组生长最好,特定增长率为3.42+0.45(%/d)；蛋黄组生长最差,特定增长率为0.12+0.20(%／d)。其余组生长情况介于两者之间,差异不显著。实验结束时鲑鳟成鱼饲料组的成活率最低,为(84.00+1.41)%,蛋黄组的成活率最高,为(99.00±1.41)%,与其余组差异不显著。实验前20天各组成活率最低为(95.53+4.16)%,差异不显著。综合考虑各组仔鱼的成活率和生长情况,表明本实验条件下脱壳卤虫卵为银鲑仔鱼适宜的开口饵料。7、在8-11℃的自然水温条件下,研究出膜至27日龄银鲑卵黄囊期仔鱼的异速生长模式。结果表明：银鲑卵黄囊期仔鱼早期发育过程中,有关摄食、感觉和运动等功能器官存在异速生长的现象。头长和尾长为正异速生长,为头部和尾部的发育提供了充足的空间；躯干长为负异速生长,有效减小了头部和尾部的距离,使身体运动更加协调；吻长和眼径为正异速生长,提高了仔鱼的摄食能力；背鳍、腹鳍、臀鳍、尾鳍为正异速生长,提高了仔鱼的运动能力；眼后头长在5日龄,积温为出膜后44℃·d出现生长拐点,异速生长指数减小,但仍为正异速生长,出膜后前5日眼后头长的快速生长为鳃的发育提供了空间；脂鳍在13日龄,积温为出膜后123.5℃·d出现生长拐点,异速生长指数减小,但仍为正异速生长,表明银鲑的脂鳍可能具有与运动相关的功能。
【关键词】：银鲑 物种鉴定 倍性鉴定 性腺分化 生长
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S917.4
【目录】：

• 摘要9-11
• Abstract11-14
• 前言14-15
• 综述15-25
• 1 银鲑简介及国内养殖现状15-16
• 2 鱼类物种鉴定的方法16-18
• 2.1 形态学鉴定法16-17
• 2.2 分子生物学鉴定法17-18
• 3 鱼类染色体倍性鉴定方法18-20
• 3.1 染色体计数法18-19
• 3.2 红细胞及其细胞核大小法19
• 3.3 DNA含量法19-20
• 4 鱼类早期性腺分化的研究20-21
• 5 温度对鱼类生长的影响21-22
• 6 仔鱼开口饵料的研究22-23
• 7 鱼类早期发育阶段异速生长的研究23-24
• 8 本研究的目的意义24-25
• 第一章 银鲑的物种鉴定和倍性鉴定25-48
• 第一节 银鲑的物种鉴定25-33
• 1 材料和方法25-28
• 1.1 材料25-26
• 1.1.1 实验用鱼25
• 1.1.2 药品和试剂配制25
• 1.1.3 器材25-26
• 1.2 方法26-28
• 1.2.1 形态学鉴定26
• 1.2.2 应用CO Ⅰ和12S rRNA基因序列分析进行物种鉴定26-28
• 2 结果28-32
• 2.1 形态学鉴定28-29
• 2.2 CO Ⅰ和12S rRNA基因序列分析鉴定鱼种29-32
• 3 讨论32-33
• 第二节 银鲑染色体倍性鉴定、红细胞及其细胞核大小和DNA含量的研究33-46
• 1 材料和方法34-37
• 1.1 实验材料34-35
• 1.1.1 试剂和器材34
• 1.1.2 试剂配制34-35
• 1.2 实验方法35-37
• 1.2.1 染色体倍性鉴定35-36
• 1.2.2 红细胞及其细胞核大小测定36
• 1.2.3 DNA含量测定36-37
• 1.3 数据分析37
• 2 实验结果37-43
• 2.1 倍性鉴定及核型特征37-40
• 2.1.1 倍性鉴定37-38
• 2.2.2 染色体核型特征38-40
• 2.2 红细胞及其细胞核大小40-41
• 2.3 DNA含量41-43
• 3 讨论43-46
• 3.1 银鲑倍性鉴定的适宜方法43
• 3.2 银鲑染色体的核型特征43-45
• 3.3 银鲑红细胞核大小45-46
• 3.4 银鲑DNA含量46
• 小结46-48
• 第二章 银鲑性腺分化的组织学研究48-60
• 1 材料和方法48-51
• 1.1 试验材料48-49
• 1.1.1 实验用鱼48
• 1.1.2 药品及试剂配制48-49
• 1.2 试验方法49
• 1.3 样品组织切片49-50
• 1.3.1 样品处理49
• 1.3.2 石蜡包埋49
• 1.3.3 石蜡切片制作49-50
• 1.3.4 苏木精-伊红(HE)染色50
• 1.3.5 观察50
• 1.4 数据处理50-51
• 2 实验结果51-58
• 2.1 性腺分化前的特征51-53
• 2.2 性腺分化阶段生殖细胞特征53-58
• 2.2.1 卵巢分化53-56
• 2.2.2 精巢分化56-58
• 3 讨论58-59
• 3.1 银鲑性腺分化类型58
• 3.2 银鲑性腺分化的时间58
• 3.3 银鲑性腺分化的标志58-59
• 小结59-60
• 第三章 银鲑生长的初步研究60-81
• 第一节 温度对银鲑生长的影响60-65
• 1 材料和方法60-61
• 1.1 试验材料60
• 1.2 试验方法60
• 1.3 测定指标60-61
• 1.4 数据处理61
• 2 实验结果61-64
• 2.1 温度对银鲑生长的影响61-63
• 2.2 温度对银鲑存活率的影响63-64
• 3 讨论64-65
• 第二节 不同开口饵料对银鲑仔鱼生长的影响65-71
• 1 材料和方法65-67
• 1.1 实验用鱼65
• 1.2 实验饵料65-66
• 1.3 实验设计和管理66
• 1.4 测定方法66-67
• 1.5 数据处理67
• 2 试验结果67-70
• 2.1 不同开口饵料对银鲑仔鱼生长的影响67-69
• 2.2 不同开口饵料对银鲑仔鱼存活率的影响69-70
• 3 讨论70-71
• 3.1 仔鱼开口饵料的适口性70
• 3.2 银鲑仔鱼适宜的开口饵料70-71
• 第三节 银鲑卵黄囊期仔鱼异速生长模式的研究71-80
• 1 材料和方法72-74
• 1.1 材料72
• 1.1.1 实验用鱼72
• 1.1.2 实验仪器72
• 1.2 实验方法72-74
• 1.2.1 实验管理72
• 1.2.2 研究方法72-73
• 1.2.3 数据处理73-74
• 2 实验结果74-78
• 2.1 全长与日龄的关系74
• 2.2 头长、躯干长和尾长的异速生长74-75
• 2.3 头部器官的异速生长75-76
• 2.4 游泳器官的异速生长76-78
• 3 讨论78-80
• 3.1 银鲑卵黄囊期仔鱼身体各部的异速生长模式78
• 3.2 银鲑卵黄囊期仔鱼头部器官的异速生长模式78-79
• 3.3 银鲑卵黄囊期仔鱼游泳器官的异速生长模式79-80
• 小结80-81
• 结论81-82
• 参考文献82-91
• 致谢91

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本文编号：355004