大白菜—根肿菌互作中关键糖转运蛋白SWEETs的功能分析

发布时间：2022-04-22 22:43

　　芸薹根肿菌侵染所引起的十字花科根肿病是一种感染性极强的世界级土传病害,可以造成十字花科作物的大量减产。根肿菌侵染寄主根部后,将从寄主中摄取大量能源物质供以自身的生长繁殖最终形成肿块。糖外排转运蛋白（sugars will eventually be exported transporters,SWEET）是近年新发现的一类糖转运蛋白,除了参与调控韧皮部装载,逆境胁迫,生长发育等过程,还在寄主-病原菌互作中发挥重要作用。诸多研究表明,植物病原菌侵染寄主后将诱导寄主中的SWEEET基因的表达量上调从而参与病原菌-寄主之间的互作。根据本课题组的前期研究结果,我们发现了一些在根肿菌侵染后表达量大量上调的BraSWEET基因,经表达分析后初步认定这些基因为大白菜-根肿菌互作的关键BraSWEET基因。在此研究基础上,本论文对候选关键BraSWEET基因进行了表达验证并使用己糖突变酵母菌株对大白菜-根肿菌互作的关键BraSWEET蛋白进行了异源功能互补验证,明确了这些关键BraSWEET蛋白的糖转运能力。大白菜-根肿菌互作中的关键BraSWEET蛋白间的互作分析是通过mbSUS系统酵母双杂交试验及... 

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 根肿病及其病原菌概论
        1.1.1 根肿病的危害
        1.1.2 根肿菌的生活史
        1.1.3 根肿病的防治
    1.2 SWEET蛋白研究进展
        1.2.1 SWEET蛋白结构
        1.2.2 SWEET蛋白的生理功能
    1.3 SWEET蛋白在植物-病原菌互作中的研究
    1.4 本研究的目的及意义
第二章 大白菜-根肿菌互作中关键BraSWEETs蛋白的筛选及其糖转运特性验证
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
        2.2.1 大白菜及拟南芥RNA的提取及反转录
        2.2.2 大白菜-根肿菌互作中关键SWEETs蛋白的筛选
        2.2.3 酵母糖转运表达载体的构建
        2.2.4 酵母己糖缺陷型突变菌株EBY.4000感受态的制备
        2.2.5 酵母表达载体的转化
        2.2.6 缺陷型酵母糖转运功能互补试验
    2.3 结果与分析
        2.3.1 大白菜-根肿菌互作中关键BraSWEETs基因的表达分析验证
        2.3.2 酵母糖转运载体的构建及检测
        2.3.3 酵母糖转运特性验证
    2.4 讨论
第三章 大白菜-根肿菌互作关键BraSWEETs蛋白间互作分析
    3.1 试验材料
    3.2 试验方法
        3.2.1 膜蛋白酵母双杂载体的构建
        3.2.2 酵母双杂菌株感受态的制备
        3.2.3 酵母双杂表达载体的转化
        3.2.4 mbSUS膜蛋白酵母双杂试验
        3.2.5 双分子荧光互补载体的构建
        3.2.6 农杆菌感受态细胞的转化
        3.2.7 烟草农杆菌注射及双分子荧光互补的显微观察
    3.3 结果与分析
        3.3.1 酵母双杂交载体的构建
        3.3.2 mbSUS系统酵母双杂验证关键BraSWEETs蛋白之间互作
        3.3.3 双分子荧光互补载体构建
        3.3.4 双分子荧光互补验证关键BraSWEETs蛋白之间互作
    3.4 讨论
结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]白菜根肿病菌拮抗微生物的筛选及防治效果评价[J]. 孙良菲,任佐华,彭沙莎,黄小莉,董俊,刘二明.  湖南农业科学. 2013(01)
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[4]油菜根肿病菌拮抗微生物的筛选及其防治效果测定[J]. 王靖,黄云,张艳,姚佳.  中国油料作物学报. 2011(02)
[5]防治白菜根肿病的药剂筛选[J]. 李妍,谢学文,石延霞,向文胜,李宝聚.  农药学学报. 2010(01)
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[7]十字花科蔬菜根肿病菌生理小种及接种方法[J]. 丁云花,简元才.  中国蔬菜. 2005(08)
[8]十字花科植物根肿病及抗病育种研究进展[J]. 孙保亚,沈向群,郭海峰,周永红.  中国蔬菜. 2005(04)
[9]甘蓝根肿病菌的生物学特性研究[J]. 肖崇刚,郭向华.  菌物系统. 2002(04)
[10]十字花科植物根肿病及抗根肿病育种研究进展[J]. 司军,李成琼,任雪松,肖崇刚.  西南农业学报. 2002(02)

硕士论文
[1]大白菜抗根肿病基因CRq的精细定位及克隆[D]. 贾豪.郑州大学 2018
[2]成都市十字花科根肿病调查及药剂防治筛选[D]. 张日波.四川农业大学 2010



本文编号：3646820