除草剂农达（Roundup）对小鼠胚胎发育及植入过程的影响

发布时间：2023-04-22 22:01

　　农达?(Roundup?)是当前世界上施用最广泛,施用量最大的除草剂之一。由于农达的大量施用、甚至滥用,在土壤、水体甚至农产品中均已检测到农达残留。这对人类和哺乳动物造成了极高的暴露风险。因此,关于农达的安全性研究是当前比较紧迫和重要的科学研究之一。据文献分析,农达具有肝肾毒性、神经毒性、生殖毒性等。当前关于农达对哺乳动物的生殖毒性研究主要集中在雄性上,相关的毒性和机制已经比较清楚。但是,农达对哺乳动物的胚胎毒性还不清楚。据此,本论文研究了农达对小鼠早期胚胎的质量,发育,植入及植入后发育的影响,得出了如下结果:首先,根据农达对小鼠急性经口暴露LD₅₀,本研究设置低剂量(300 mg/kg·bw)、中剂量(650 mg/kg·bw)、高剂量(1000 mg/kg·bw)三组农达暴露剂量,探究了农达急性经口暴露对小鼠体内早期胚胎的质量及发育的影响。结果发现,与对照组相比,低、中、高三组剂量农达暴露后,体内8-细胞胚胎数量正常,但是体内囊胚数量显著下降,提示胚胎体内发育异常;进一步对8-细胞胚胎的检测发现,与对照组相比,经过低、中、高三组剂量的农达暴露后,胚胎卵裂球发生...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

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第一章 文献综述
    1.1 草甘膦(农达)的基本理化性质
    1.2 农达的除草原理
    1.3 农达在农业生产上的应用
    1.4 农达在土壤、水体和农产品中的残留及人类的暴露风险
        1.4.1 农达在土壤中的残留
        1.4.2 农达在水体中的残留
        1.4.3 农达在农产品中的残留
        1.4.4 人类的农达暴露风险
    1.5 农达的毒性研究进展
        1.5.1 农达的肝、肾毒性
        1.5.2 农达的神经毒性
        1.5.3 农达的生殖毒性
    1.6 小鼠的胚胎发育过程概述
        1.6.1 小鼠的早期胚胎发育过程概述
        1.6.2 小鼠胚胎植入过程及胚胎植入后发育过程概述
    1.7 研究意义
第二章 农达急性经口暴露对小鼠体内早期胚胎的质量及发育的影响
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要试剂与耗材
    2.2 试验方法
        2.2.1 胚胎0.5mm玻璃转移管的拉制
        2.2.2 孕鼠的获得及其农达急性经口暴露
        2.2.3 小鼠早期胚胎的采集
        2.2.4 胚胎卵裂球内活性氧(ROS)检测,激光共聚焦成像及活性氧信号统计
        2.2.5 胚胎卵裂球内钙离子浓度检测,激光共聚焦成像及钙离子浓度信号统计
        2.2.6 囊胚的分化/凋亡染色,激光共聚焦成像
        2.2.7 试验设计与统计分析
    2.3 结果
        2.3.1 农达急性经口暴露对小鼠早期胚胎体内发育的影响
        2.3.2 农达急性经口暴露对小鼠体内8-细胞胚胎活性氧的影响
        2.3.3 农达急性经口暴露对小鼠体内8-细胞胚胎钙离子浓度的影响
        2.3.4 农达急性经口暴露对小鼠体内囊胚凋亡的影响
    2.4 本章小结与讨论
第三章 农达体外暴露对小鼠早期胚胎质量及发育的影响
    3.1 试验材料
        3.1.1 试验动物
        3.1.2 主要试剂与耗材
    3.2 试验方法
        3.2.1 雌性小鼠的同期发情,超数排卵处理
        3.2.2 小鼠受精卵的采集
        3.2.3 小鼠受精卵的体外培养及农达体外暴露
        3.2.4 胚胎的氧化应激(ROS)检测,激光共聚焦成像及氧化应激信号统计
        3.2.5 胚胎卵裂球内钙离子浓度检测,激光共聚焦成像及钙离子浓度信号统计
        3.2.6 囊胚的分化/凋亡染色,激光共聚焦成像
        3.2.7 试验设计与统计分析
    3.3 结果
        3.3.1 不同稀释倍数的农达体外暴露对小鼠早期胚胎发育的影响
        3.3.2 农达体外暴露对小鼠8-细胞胚胎卵裂球内活性氧水平的影响
        3.3.3 农达体外暴露对小鼠8-细胞胚胎卵裂球内钙离子浓度的影响
        3.3.4 农达体外暴露对小鼠囊胚凋亡的影响
    3.4 本章小结与讨论
第四章 农达急性经口暴露对小鼠胚胎植入及植入后胚胎发育的影响
    4.1 试验材料
        4.1.1 试验动物
        4.1.2 主要试剂与耗材
    4.2 试验方法
        4.2.1 孕鼠的获得及其农达急性经口暴露
        4.2.2 小鼠胚胎植入位点的采集
        4.2.3 F1代新生幼鼠窝仔数和体重的测量
        4.2.4 试验设计与统计分析
    4.3 结果
        4.3.1 农达急性经口暴露对孕鼠D9胚胎植入影响
        4.3.2 农达急性经口暴露对F1代新生幼鼠窝仔数的影响
        4.3.3 农达急性经口暴露对F1代新生幼鼠体重的影响
    4.4 本章小结与讨论
第五章 结论与讨论
    5.1 结论
    5.2 讨论
参考文献
附录
致谢
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本文编号：3798478