简单芽孢杆菌Sneb545诱导大豆抗胞囊线虫活性物质分离与鉴定

发布时间：2023-10-26 18:33

　　大豆胞囊线虫病(Heterodera glycines,SCN)是大豆生产中最重要的病害之一,生物防治因其持效长、对环境友好和低毒低残留等优点在大豆胞囊线虫防治中具有广阔的应用前景。微生物在防治植物病害过程中具有多种作用方式,其代谢物具有广泛的生物活性,在诱导植物抗病性过程中起到了重要的作用。有研究已经证明简单芽孢杆菌Sneb545发酵液包衣大豆种子具有诱导大豆抗胞囊线虫的作用,但其具诱导活性的成分尚不清楚,因此,本试验对简单芽孢杆菌Sneb545诱导大豆抗性活性物质进行分离纯化和结构鉴定,并通过盆栽试验验证活性物质诱导大豆对胞囊线虫的防效,分析水杨酸途径与茉莉酸途径相关抗病基因的表达,研究结果如下:1.通过活性追踪和系统分离从Sneb545发酵液中分离获得了6个通过种子包衣具有诱导大豆产生抗大豆胞囊线虫活性的组分。利用发酵罐大量培养发酵液,离心去除菌体,冷冻干燥上清液进行浓缩,乙醇进行沉淀和有机溶剂分级萃取发酵上清液,得到具有活性的正丁醇层粗提物。利用硅胶柱层析分离,凝胶Sephadex LH-20柱层析分离,半制备液相色谱分离,得到6个活性化合物,分别为S5-1、S5-2、S5-3...

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第一章 微生物源代谢物防治大豆胞囊线虫研究进展
    1.1 大豆胞囊线虫的研究进展
        1.1.1 大豆胞囊线虫的概述
        1.1.2 大豆胞囊线虫的发生与危害
        1.1.3 大豆胞囊线虫的综合防治
    1.2 微生物源代谢物防治植物寄生线虫研究进展
        1.2.1 微生物源代谢物杀线虫活性
        1.2.2 微生物源杀线虫挥发物
        1.2.3 微生物源代谢物诱导植物抗线虫活性
    1.3 环二肽类物质的研究进展
        1.3.1 环二肽类物质的简述
        1.3.2 微生物源环二肽及其生物活性
    1.4 简单芽孢杆菌研究进展
        1.4.1 简单芽孢杆菌Sneb545研究现状
    1.5 问题与展望
第二章 简单芽孢杆菌Sneb545诱抗活性物质分离纯化
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 诱导大豆抗胞囊线虫物质的初步筛选
        2.2.2 有机溶剂处理筛选诱导大豆抗胞囊线虫物质
        2.2.3 正丁醇萃取物的硅胶柱层析分离
        2.2.4 S5组分半制备高效液相色谱分离纯化
        2.2.5 S11组分Sephadex LH-20柱层析分离纯化
        2.2.6 S11-6组分半制备高效液相分离纯化
    2.3 小结
第三章 Sneb545 诱抗活性物质的结构解析及活性测试
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 6个化合物结构鉴定
        3.2.2 6个化合物活性测定
    3.3 小结
第四章 活性物质诱导大豆抗病相关基因响应研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 活性物质诱导大豆水杨酸途径抗性基因响应
        4.2.2 活性物质诱导大豆茉莉酸途径抗性基因响应
    4.3 小结
第五章 结论与讨论
    5.1 简单芽孢杆菌Sneb545 诱抗活性物质分离纯化
    5.2 Sneb545诱抗活性物质的结构解析及活性测试
    5.3 活性物质诱导大豆相关抗病基因响应研究
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文



本文编号：3856731