中华蜜蜂和意大利蜜蜂takeout基因的克

发布时间：2024-04-09 01:10

　　Takeout(to)基因是一种节律调控输出基因,广泛存在于昆虫的营养功能和化学感受等相关组织。to基因主要参与昆虫的生长发育、行为调节及多种生理代谢过程。为探究to基因在蜜蜂中的表达规律和相关生物学功能,我们克隆了中华蜜蜂Apis cerana cerana和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的to基因,分析该基因在哺育蜂和采集蜂各组织的mRNA表达规律,并利用RNA干扰技术进一步探讨了其生物学功能。主要研究结果如下:通过反转录多聚酶链式反应技术(RT-PCR)首次克隆获得了中华蜜蜂和意大利蜜蜂to基因的cDNA序列分别为1058 bp和783 bp,依次命名为AcTO1和AmTO1,其开放阅读框(ORF)长度均为738 bp,均编码246个氨基酸,预测的蛋白质分子质量分别为27.09和27.07 kDa,等电点pI均为8.40。生物信息学分析结果表明,AcTO1和AmTO1蛋白在N端均有一段信号肽序列,无跨膜结构,均为分泌蛋白。此外,2种蛋白的氨基酸序列中都存在一个保幼激素结合蛋白(JHBP)超家族的保守结构域。采用荧光定量PCR技术qRT-PCR对中华蜜蜂...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－２?ＰＣＲ产物电泳分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２．?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ??

３结果与分析??３．?１中华蜜蜂和意大利蜜蜂总ＲＮＡ质量鉴定??部分样本ＲＮＡ经１．５％琼脂糖凝胶电泳检测（见图２－〗），左边两个泳道为中华蜜蜂??样品，右边两个泳道为意大利蜜蜂样品，电泳图可清晰地看到三条带，从上到下依次为??２８Ｓ，１８Ｓ和５Ｓ。总体上来看，所提取的蜜蜂总ＲＮ....

图２－４?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ蛋白的信号肷预测结果??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｆｏｒ?ｓｉｎｇａｌ?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｉｎ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??

??图２－５?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ蛋白跨膜结构的预测??Ｆｉｇｕｒｅ?２－５．?Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??２０??

图２－６?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的保守结构区域??Ｆｉｇｕｒｅ?２－６．?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ?ｏｆ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??

?３．３．４?保守结构区域的分析??２个ＴＯ蛋白的保守结构域预测采用ＮＣＢＩ?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ对（图２－６），??结果表明它们均具有ＪＨＢＰ?ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ家族的保守结构域。ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的??保守结构区域都位于第７－２４４位氨基酸之间，Ｅ－ｖａ....

图２－７?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的功能结构域??－

?３．３．４?保守结构区域的分析??２个ＴＯ蛋白的保守结构域预测采用ＮＣＢＩ?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ对（图２－６），??结果表明它们均具有ＪＨＢＰ?ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ家族的保守结构域。ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的??保守结构区域都位于第７－２４４位氨基酸之间，Ｅ－ｖａ....

本文编号：3949085