大巴山粉葛组织培养及低磷对其试管苗生长和生理特征的影响

发布时间：2017-07-18 23:17

  本文关键词：大巴山粉葛组织培养及低磷对其试管苗生长和生理特征的影响

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【摘要】：葛是一种集水土保持、生物质能源、药食两用等多用途为一体的优良栽培植物。为了解决四川乡土新品种大巴山粉葛(Pueraria lobata (wild) Ohwi 'Dabashan')在扩大栽培中对种苗的需求,以其带芽茎段为外植体,采用完全组合设计、正交设计,并结合方差分析、多重比较等方法,研究了无菌培养物建立、初代培养、芽苗增殖和生根培养等技术环节,并利用获得的芽苗进行了低磷胁迫对大巴山粉葛生长和生理特征影响的研究。结果表明：(1)将田间优良大巴山粉葛块根进行盆栽,置于温室大棚中,并在春季生长初期使用0.1%多菌灵对材料进行灭菌等预处理,有助于无菌培养物的建立。(2)将带芽茎段流水下冲洗30min,用洗衣粉液浸泡30min,然后用软刷刷洗茎段后再置流水下冲洗2h。再用75%酒精和0.1%氯化汞分别灭菌20s和10min后,用无菌水冲洗5次,存活率为67.34%,可以建立无菌培养物。(3)初代培养最佳培养基为：1/2MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.3mg/L,诱导率可达92.2%。(4)初代培养获得的芽苗在MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+ IBA 0.05 mg/L培养基上有较好的增殖效果,增殖系数为5.0。(5)以增殖培养获得的苗高大于2cm的芽苗用于生根,其最佳培养基配方为：1/2MS+NAA0.01 mg/L+IBA0.1 mg/L,生根率可达96.0%。(6)大巴山粉葛幼苗在低磷胁迫下株高、生物量都降低,而根冠比增加,保护酶(SOD、POD、CAT)活性均升高、MDA含量上升、可溶性糖含量增加以及可溶性蛋白含量降低。利用模糊数学隶属函数法进行耐低磷能力综合评价结果表明,轻度缺磷(P8)处理能够提高大巴山粉葛的耐低磷能力,中度缺磷(P6)与重度缺磷(P3)处理在初期能够提高耐低磷能力,但随缺磷时间延长耐低磷能力降低,对生长造成伤害。表明大巴山粉葛在低磷胁迫下生长受到一定抑制,但同时表现出一定的形态和生理适应性。综上,本研究建立的大巴山粉葛组织培养技术体系及其低磷胁迫对大巴山粉葛生长和生理特征的影响研究,可为大巴山粉葛种苗的扩大化生产提供技术基础和生产栽培中的磷肥管理提供理论参考。
【关键词】：大巴山粉葛 组织培养 低磷胁迫 生长 生理特征
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S567.239
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 前言9-10
• 1 文献综述10-18
• 1.1 葛生物学特性与应用价值10-13
• 1.1.1 葛生物学特性10-11
• 1.1.2 葛开发利用价值11-13
• 1.2 葛属繁殖方法13-16
• 1.2.1 常规繁殖13
• 1.2.2 葛属组织培养研究现状13-16
• 1.3 植物对低磷胁迫的响应16-18
• 1.3.1 土壤缺磷现状及对策16-17
• 1.3.2 低磷对植物形态特征的影响17
• 1.3.3 低磷对植物生理特征的影响17-18
• 2 研究目的及意义18-19
• 3 研究方案19-24
• 3.1 研究内容19
• 3.2 研究路线19
• 3.3 材料与方法19-23
• 3.3.1 组织培养技术体系建立19-22
• 3.3.2 低磷胁迫对大巴山粉葛苗期的影响22-23
• 3.4 数据处理与统计分析23-24
• 4 结果与分析24-35
• 4.1 组织培养技术体系建立24-30
• 4.1.1 消毒处理对大巴山粉葛茎段灭菌效果的影响24
• 4.1.2 初代培养基筛选24-26
• 4.1.3 增殖培养基筛选26-28
• 4.1.4 生根培养基筛选28-30
• 4.2 低磷胁迫对大巴山粉葛苗期的影响30-35
• 4.2.1 低磷胁迫对大巴山粉葛形态特征的影响30-31
• 4.2.2 低磷胁迫对大巴山粉葛抗氧化保护酶活性的影响31-33
• 4.2.3 低磷胁迫对大巴山粉葛MDA含量的影响33
• 4.2.4 低磷胁迫对大巴山粉葛渗透调节物质的影响33-34
• 4.2.5 耐低磷能力综合评价34-35
• 5 讨论35-39
• 5.1 大巴山粉葛组织培养35-37
• 5.1.1 母株预处理与二次灭菌35-36
• 5.1.2 基本培养基的选择36-37
• 5.1.3 植物生长调节剂的影响37
• 5.1.4 生根培养37
• 5.2 组培苗低磷胁迫37-39
• 5.2.1 形态水平的影响37-38
• 5.2.2 保护酶活性的影响38
• 5.2.3 渗透调节物质影响38-39
• 6 结论39-41
• 6.1 大巴山粉葛组织培养技术体系的建立39
• 6.2 低磷胁迫对大巴山粉葛的影响39-41
• 参考文献41-46
• 致谢46-47
• 附图47-48

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本文编号：560251