Cry1Ab蛋白对稻田蜘蛛优势种的生态安全评价

发布时间：2017-08-12 17:21

  本文关键词：Cry1Ab蛋白对稻田蜘蛛优势种的生态安全评价

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【摘要】：采用酶联免疫技术(ELISA)测定果蝇体内的CrylAb蛋白含量,运用紫外分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px).乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性,探讨了果蝇体内CrylAb蛋白含量与其体内3种保护酶活性的关系。结果表明,在0-10d内CrylAb蛋白在果蝇体内不断累积,果蝇体内的AChE.SOD和GSH-Px酶活性与对照相比均受到抑制,SOD和GSH-Px酶活性的抑制程度随其体内毒蛋白含量的增高而降低,AchE酶活性的抑制程度则随之而升高；但10d后果蝇体内CrylAb蛋白含量逐渐降低,其体内3种酶的活性均随体内毒蛋白含量的降低而逐渐升高,但仍低于对照。该研究证明CrylAb蛋白在果蝇体内具有富集效应,并且其体内CrylAb蛋白含量对其体内SOD. GSH-Px. AchE具有抑制作用。用CrylAb蛋白处理的果蝇喂养拟环纹豹蛛(Pardosa pseudoannulata),在第1d、3d、5d、7d、9d、11d用酶联免疫(ELISA)检测技术测定实验组和对照组拟环纹豹蛛体内CrylAb蛋白含量,运用紫外分光光度法检测拟环纹豹蛛体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性,探讨拟环纹豹蛛体内CrylAb蛋白的富集作用与其体内3种酶活性的关系。结果表明,从第1d至第7d CrylAb蛋白在拟环纹豹蛛体内均具富集作用(p0.05),到第7d的时候达到最高值,达极显著差异(p0.01),然后逐渐降低,但仍显著高于对照(p0.05)。SOD酶活性总体趋势是降低的,在第7d达到最低；用CrylAb蛋白处理拟环纹豹蛛后其体内的AChE和GSH-Px酶活性随饲养时间的延长而增加,并均高于对照组(p0.05)。该研究证明Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛体内具有富集效应,并且其体内Cry1Ab蛋白对其体内GSH-Px、AChE具有一定诱导作用,对SOD酶具有一定程度的抑制作用。通过对照观察Cry1Ab蛋白对拟环纹豹蛛体重及一些生长指标(体长、背甲宽、中眼域宽、腿长等)的影响。采用酶联免疫技术(ELISA)测定Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛和果蝇中的含量,以探明Cry1Ab蛋白通过培养基—果蝇—拟环纹豹蛛这一食物链的传递,最终在拟环纹豹蛛体内的富集情况以及毒蛋白随食物链的传递在各营养级中的变化规律。结果表明,Cry1Ab蛋白对不同龄期拟环纹豹蛛的体长、背甲宽、中眼域宽、腿长等生长指标不存在显著性差异,但对体重产生一定的影响,使得其体重略有下降的趋势。在0-10d内Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛体内不断累积,但10d后拟环纹豹蛛体内Cry1Ab蛋白含量逐渐降低,该研究证明Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛体内具有富集效应。
【关键词】：拟环纹豹蛛 果蝇 Cry1Ab蛋白 保护酶 生长
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S511;S185
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第1章 文献综述10-14
• 1.1 研究意义10-11
• 1.2 国内外研究动态11-14
• 第2章 Cry1Ab蛋白在果蝇体内的富集作用及对其体内保护酶活性的影响14-24
• 2.1 材料和方法14-19
• 2.1.1 供试果蝇14
• 2.1.2 其他试剂14
• 2.1.3 主要试剂配制14-15
• 2.1.4 主要实验仪器15-16
• 2.1.5 实验方法16-19
• 2.2 结果与分析19-22
• 2.2.1 果蝇体内Cry1Ab蛋白含量测定19
• 2.2.2 酶活力测定19-21
• 2.2.3 GSH-P_x活力测定结果分析21-22
• 2.3 讨论22-24
• 第3章 Cry1Ab蛋白在拟环纹豹蛛体内的富集及对其体内保护酶活力的影响24-30
• 3.1 材料和方法24-26
• 3.1.1 主要试剂24
• 3.1.2 供试果蝇及培养24-25
• 3.1.3 供试蜘蛛及培养25
• 3.1.4 蜘蛛体内Cry1Ab蛋白提取与测定25
• 3.1.5 酶源制备25
• 3.1.6 蜘蛛体内可溶性蛋白测定25
• 3.1.7 酶活力测定25
• 3.1.8 数据分析25-26
• 3.2 结果与分析26-28
• 3.2.1 蜘蛛体内Cry1Ab蛋白含量测定26
• 3.2.2 Cry1Ab蛋白对拟环纹豹蛛体内三种保护酶活力的影响26-28
• 3.3 讨论28-30
• 第4章 Cry1Ab蛋白对拟环纹豹蛛生长发育的影响研究30-37
• 4.1 材料和方法30-34
• 4.1.1 供试拟环纹豹蛛30
• 4.1.2 其他试剂30-31
• 4.1.3 主要试剂配制31-32
• 4.1.4 主要实验仪器32
• 4.1.5 实验方法32-34
• 4.2 结果与分析34-36
• 4.2.1 正常组和实验组的生长指标结果分析34-35
• 4.2.2 正常组和实验组的重量结果分析35
• 4.2.3 ELISA方法测定Cry1Ab蛋白含量测定结果分析35-36
• 4.3 讨论36-37
• 参考文献37-44
• 致谢44-45
• 作者简介45

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本文编号：662750