Visfatin对蛋公雏采食量和下丘脑食欲调控因子的影响

发布时间：2017-08-13 22:03

  本文关键词：Visfatin对蛋公雏采食量和下丘脑食欲调控因子的影响

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【摘要】：Visfatin是利用差显PCR(DD-PCR)技术从人的内脏脂肪组织中分离出的一种新型脂肪因子,最新研究表明,其在动物食欲调控中扮演关键作用,但其作用机制尚不明确。本研究主要通过血清生化指标检测、实时定量PCR(qRT-PCR)、代谢组学分析等技术探测中枢注射Visfatin对蛋公雏采食量及下丘脑食欲调控因子的影响,以期为完善家禽食欲调控理论奠定基础。试验一Visfatin对蛋公雏采食量及相关血液生化指标的影响本试验通过给13日龄蛋公雏脑室注射0ng、40ng和400ng重组人内脂素(Human Recombinant Visfatin),分别记录注射后30min、60 min和90 min的累计采食量,并分别于注射后30min、60min和90min进行颈静脉采血,测定血清中葡糖糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的含量。结果显示,脑室注射40ng和400ng的Visfatin,可以显著提高蛋公雏60min和90min内的累计采食量(P0.05);脑室注射40ng和400ng的Visfatin 60min和90min后,蛋公雏血清中的葡糖糖含量有上升趋势,并呈现出剂量依赖性;同时,脑室注射60min后,血清中的甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均发生显著变化(P0.05)。说明Visfatin能够促进蛋公雏的采食量,并且参与血清中的糖类物质和脂类物质的调节。试验二Visfatin对蛋公雏下丘脑中采食相关基因表达量的影响应用荧光定量PCR技术,检测Visfatin对蛋公雏下丘脑中NPY、AgRP、POMC、CART和AMPK等主要采食调控因子表达量的影响。结果显示,脑室注射40ng的Visfatin30min和60min后,蛋公雏下丘脑中促进采食神经肽NPY和AgRP的基因相对表达量显著升高(P0.05),而抑制采食神经肽CART的基因相对表达量显著降低(P0.05),且作用效果一直持续至脑室注射后90min内;同时,脑室注射40ng和400ng的Visfatin 30min和60min后,下丘脑中AMPK的基因相对表达量相对于均有显著提高(P0.05),且高剂量组表达量在注射30min后显著高于低剂量组(P0.05)。由此可知,Visfatin能够上调下丘脑中促进采食因子NPY、AgRP,以及能量感受因子AMPK的表达量,并下调抑制采食因子CART的表达量。试验三Visfatin对蛋公雏下丘脑中相关代谢产物的影响应用UPLC-MS技术,检测Visfatin对蛋公雏下丘脑中相关代谢产物的影响。结果显示,脑室注射不同剂量的Visfatin后可以引起蛋公雏下丘脑中代谢状态的变化。通过模式识别分析,筛选出了与糖脂代谢和能量平衡作用相关的葡萄糖、β-羟基丁酸、二羟基丙酮、苏氨酸、亮氨酸和γ-氨基丁酸等差异代谢物,且这些代谢物在下丘脑中的含量相对于对照组均显著升高(P0.05)。综上,脑室注射Visfatin可以提高蛋公雏的采食量,调控下丘脑中中枢食欲调节因子的表达,并参与血清和下丘脑糖脂代谢和能量平衡的调节。但同一浓度Visfatin对不同检测指标的作用效果强弱,以及作用时间长短存在一定差异。
【关键词】：内脂素 采食量 下丘脑 调控机制
【学位授予单位】：河南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S816
【目录】：

• 致谢4-10
• ABSTRACT10-12
• 摘要12-14
• 1 文献综述14-22
• 1.1 家禽下丘脑采食调控机制及其研究进展14-18
• 1.1.1 家禽的采食量及其主要影响因素14
• 1.1.2 家禽下丘脑食欲中枢的结构和功能14-15
• 1.1.3 家禽下丘脑中主要的采食调节因子15-16
• 1.1.4 家禽下丘脑的采食调控机制16-18
• 1.2 Visfatin及其生物学功能的研究18-22
• 1.2.1 Visfatin的来源及结构特征18-19
• 1.2.2 Visfatin的生物学功能研究19-21
• 1.2.3 Visfatin在家禽领域的研究21-22
• 2 引言22-23
• 3 试验一 Visfatin对蛋公雏采食量及相关血液生化指标的影响23-31
• 3.1 试验材料23-24
• 3.1.1 试验动物与管理23
• 3.1.2 主要试剂及溶液配制23-24
• 3.1.3 主要仪器24
• 3.2 试验方法24-26
• 3.2.1 脑室注射模型的建立24-25
• 3.2.2 样品的采集及检测25
• 3.2.3 数据处理25-26
• 3.3 结果与分析26-28
• 3.3.1 脑室注射Visfatin对蛋公雏采食量的影响26
• 3.3.2 脑室注射Visfatin对蛋公雏血清中相关生化指标的影响26-28
• 3.4 讨论28-29
• 3.5 小结29-31
• 4 试验二 Visfatin对蛋公雏下丘脑中采食相关基因表达量的影响31-39
• 4.1 试验材料31-32
• 4.1.1 试验动物与管理31
• 4.1.2 主要试剂及溶液配制31-32
• 4.1.3 主要仪器32
• 4.2 试验方法32-34
• 4.2.1 目的基因引物的合成32-33
• 4.2.2 荧光定量PCR反应33
• 4.2.3 数据处理33-34
• 4.3 结果与分析34-36
• 4.3.1 RNA的质量检测34
• 4.3.2 c DNA的质量检测34
• 4.3.3 引物特异性的检测34-35
• 4.3.4 脑室注射Visfatin对蛋公雏下丘脑中采食相关基因表达量的影响35-36
• 4.4 讨论36-37
• 4.5 小结37-39
• 5 试验三 Visfatin对蛋公雏下丘脑中相关代谢产物的影响39-45
• 5.1 试验材料39
• 5.1.1 试验动物与管理39
• 5.1.2 主要试剂39
• 5.1.3 主要仪器39
• 5.2 试验方法39-40
• 5.2.1 样品前处理39-40
• 5.2.2 色谱条件40
• 5.2.3 质谱条件40
• 5.2.4 数据处理40
• 5.3 结果与分析40-43
• 5.3.1 数据的可靠性评价分析40-41
• 5.3.2 多元统计分析41-42
• 5.3.3 差异代谢物分析42-43
• 5.4 讨论43-44
• 5.5 小结44-45
• 6 全文结论及进一步工作45-46
• 6.1 结论45
• 6.2 进一步工作45-46
• 参考文献46-52
• 附录52-55

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本文编号：669201