土壤根肿病菌FQ-PCR定量检测、根肿病发生与土壤特性的关系及综合防控技术研究

发布时间：2017-09-08 13:43

  本文关键词：土壤根肿病菌FQ-PCR定量检测、根肿病发生与土壤特性的关系及综合防控技术研究

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【摘要】：根肿病是受芸薹根肿菌侵染引发的一种毁灭性土传病害,该病原菌的休眠孢子存活能力极强,防治难度大。目前根肿病已成为世界范围内的十字花科作物的重要病害之一,湖南蔬菜产业的发展也受到较严重的影响。因此,本研究开展了土壤根肿病菌休眠孢子实时荧光定量PCR检测技术、根肿病发病与土壤理化特性的关系及综合防控技术三个方面的研究,主要结果如下。1、本研究以PbF和PbR为引物,进行PCR扩增,构建标准重组质粒制作标准曲线,在此基础上对来自湖南省湘潭县响水乡、长沙县路口镇、桃江县桃花江镇十字花科作物根肿病发生地的109份土样进行了FQ-PCR定量检测。采集的土样中根肿病菌含量介于104～106个休眠孢子/g土,休眠孢子含量≥104个/g的土样对应的田块均明显发生根肿病,含量为102个/g的土样采集地未发生根肿病,检测结果与采集地发病情况相符。由此可见,当土壤中根肿病菌休眠孢子量≥104个／g土时,该地区发病风险较大,需采取相应措施降低根肿病的危害。2、对采集自湖南根肿病多发地区的30份病土样进行了根肿病菌休眠孢子含量、pH值、阳离子交换量、全氮含量、全磷含量、交换性钙含量和有效硅含量7项指标的检测,并用该土样重新种植感病品种得到相应的病情指数,初步探究这些土壤理化指标与根肿病发生的关系。结果表明,土壤中根肿病菌休眠孢子的含量与病情指数呈正相关关系,整体上含量级越高,发病越严重,但处于相同含量级的土样的病情指数不一定随着孢子浓度的升高而升高,但其病情指数仅会在一定范围内发生变化。根肿病菌喜好偏酸性的土壤,在偏酸性环境中发病明显；土壤中的交换性钙离子和有效硅含量与根肿病的发生呈负相关关系,全氮含量与根肿病发病率呈正相关,而阳离子交换量和全磷含量与根肿病发病无明显的相关性。同时,土壤的pH值与有效硅含量呈正相关关系,以此推断pH值与有效硅可能协同影响根肿病菌的发生。3、研究并应用了药剂防治、抗病品种利用、生防菌和施用石灰等综合防治技术。药剂防治,评价了8种化学药剂对红菜苔根肿病的防治效果,红菜苔苗床期共施药2次,防治根肿病效果达90%以上的药剂有81%甲霜·百菌清WP、75%异菌·多·锰锌WP、69%烯酰·锰锌WP和75%百菌清WP 4种,；红菜苔移栽后再施药2次,成株阶段防治效果高于90%有81%甲霜·百菌清WP、75%异菌·多·锰锌WP、85%波尔·甲霜灵WP、69%烯酰·锰锌WP、75%百菌清WP 5种药剂。但其中22%嘧菌·戊唑醇SC药害严重,不适宜在田间施用。抗性品种运用,选取本课题组已筛选鉴定出的20个抗病品种进行小范围田间试验,结果显示紫甘2号、夏宝甘蓝、盛杂优和湘杂优4个抗病品种在苗期和成株期均对根肿病产生免疫,其余品种均表现为高抗。并运用了施石灰、4%绿色木霉·哈茨木霉WP和芽孢杆菌三种措施田间防治红菜苔根肿病,结果显示4%绿色木霉·哈茨木霉WP苗期和成株期对根肿病的防效均达到了90%以上,效果突出且稳定。综上所述,81%甲霜·百菌清WP、75%异菌·多·锰锌WP、69%烯酰·锰锌WP、75%百菌清WP、4%绿色木霉·哈茨木霉WP 5种化学药剂和生防菌防治红菜苔根肿病效果突出,可用于田间防治根肿病,紫甘2号、夏宝甘蓝、盛杂优和湘杂优4个抗病品种对根肿病表现免疫,可在病区种植,减少根肿病对作物的危害。
【关键词】：根肿病 十字花科作物 FQ-PCR 理化指标 综合防治
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S432.4
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一章 文献综述11-23
• 1 根肿病菌定量检测技术研究进展12-16
• 1.1 FQ-PCR技术基本原理12-13
• 1.2 FQ-PCR类型13-15
• 1.3 FQ-PCR技术的优势15
• 1.4 FQ-PCR技术的定量方法15-16
• 2 土壤理化特性与根肿病病情之间的关系16-19
• 2.1 根肿菌的生活史16-17
• 2.2 土壤的特性17-19
• 3 根肿病综合防控技术19-22
• 3.1 抗性品种选育19-20
• 3.2 农业措施20-21
• 3.3 消毒灭菌21
• 3.4 化学药剂防治21
• 3.5 生物防治21
• 3.6 综合防治21-22
• 4 本研究的目的及意义22-23
• 第二章 土壤根肿病菌休眠孢子实时荧光定量PCR检测技术研究23-36
• 1 材料与方法23-31
• 1.1 试验材料23-27
• 1.2 试验方法27-31
• 2 结果与分析31-34
• 2.1 标准曲线的构建31
• 2.2 扩增产物特异性检测31-32
• 2.3 FQ-PCR对109份土样的检测结果32-34
• 2.4 检测土样当茬作物根肿病发生与菌量的关系34
• 3 小结与讨论34-36
• 第三章 土壤特性与根肿病发病的关系36-44
• 1 材料与方法36-38
• 1.1 材料36-37
• 1.2 试验方法37-38
• 2 结果与分析38-42
• 2.1 土壤的理化特性与病情指数的关系38-41
• 2.2 土壤根肿病菌休眠孢子含量与病情指数的关系41-42
• 3 小结与讨论42-44
• 第四章 红菜苔根肿病综合防控技术研究44-55
• 1 材料与方法44-49
• 1.1 试验材料44-45
• 1.2 试验方法45-49
• 2 结果及分析49-53
• 2.1 杀菌剂的安全性分析49
• 2.2 化学药剂防效49-51
• 2.3 田间抗病品种表现51-52
• 2.4 生防菌与施用石灰防效52-53
• 3 结论与讨论53-55
• 第五章 结论与创新点55-57
• 1 结论55-56
• 1.1 土壤根肿病菌休眠孢子实时荧光定量PCR检测技术研究55
• 1.2 土壤特性与根肿病发病的关系55
• 1.3 根肿病综合防控技术研究55-56
• 2 创新点56-57
• 参考文献57-67
• 致谢67-68
• 作者简介68

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