应用芳环羟基化法研究锰离子参与类Fenton反应

发布时间：2020-07-11 17:36

【摘要】：采用L-苯丙氨酸为探针,研究了用芳环羟基化法(aromatic hydroxylation)检测·OH的可行性。结果表明:使用液相色谱仪的荧光检测器(FLD)和荧光分光光度计的荧光光谱(FS)两种方法平行检测Cu~(2+)-H_2O_2体系中产生的。试验采用的激发波长277nm,发射波长306nm。体系在反应前后的荧光变化,可反映·OH产生量。对FLD与FS所得数据进行了比较分析,结果显示两种方法具有较高一致性。由于FS使用混合体系检测,易对荧光的产生造成干扰,故此法虽然经济简便,但应用范围受到一定限制;而FLD法无上述干扰。同时使用HPLC—FLD检测了7种过渡金属离子参与类Fenton反应产生·OH的能力。实验结果表明Cr~(3+)、Fe~(2+)、Co~(2+)、Cu~(2+)、Pb~(2+)产生·OH的能力较强,而Ni~(2+)和Cd~(2+)产生·OH的能力极弱。·OH清除剂脱铁敏(desferrioxamine,DFO)或甘露醇,能明显抑制产物L-Tyr的荧光强度变化,说明·OH的产生受到抑制,结果表明HPLC方法准确可靠。使用分光光度法对上述离子参与类Fenton反应产生·OH的实验进行了验证,得到了基本一致的结果,但芳环羟基化荧光法的结果更稳定,灵敏度更高,故此方法对于·OH检测以及抗·OH机理和应用研究等方面具有较高应用价值。基于Mn~(2+)和Mn~(3+)是抑制还是促进·OH产生的争论,利用电子自旋共振法、芳环羟基化法和电泳法研究了Mn~(2+)和Mn~(3+)参与类Fenton反应的情况。结果表明Mn~(2+)和Mn~(3+)在离子浓度较高时抑制·OH的产生,而降低Mn~(2+)和Mn~(3+)的离子浓度,·OH的产生明显受到促进,·OH清除剂能明显抑制Mn~(2+)
【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R341
【图文】：

浓度,电泳法,损伤程度,时基

Mn+2的促进·OH产生的能力将受到抑制，如图n所示。从图n可以看出，在相同的Mn+2浓度下，当增加Phe、H20:和反应缓冲液的浓度时，促进作用变为抑制作用。2.3.1.4MnZ气HZo:体系对DNA的损伤同样的结果在电泳法中也有所体现，如图12所示。从图中我们可以看出:DNA链的损伤程度与Mn+2浓度有关，Mn+2浓度为1400x1o一6mofL/时，DNA链的损伤情况最明显，而当MnZ+浓度为Z000xio一6mol凡时，DNA链的损伤情况与不加MnZ+时基本相同。

9hjk0PV丫V图15RZ+浓度为一5、10一喻。呱，Mn+2浓度对混合体系DNA链的降解的影响a.puelsn队+HZoZ;b.puelsDNA+HZoZ+RZ+;e一u+erZ++MnZ+，MnZ+浓度分别为isxio一6mo呱、17x一0一6mo比、19xio一‘场oL/l、Puel8DNA+H20220xl0一01L/八22x10一mo比、25xl-o6mo比、IO0x10一。比、140xio一6mo呱、29xl0一6mo呱、180x10一6moL/l、33xz0一6mo比、220x10一。比、soxlo一nlo比、印xlo一6mo呱、260xl0·喻。呱、34oxlo一喻01几、3soxio一6mol几、3sooxlo一mo呱;v:puelsDN^+H::02+MnZ+300x10一01几、，M+nz浓度为15xlrmol几;w:makeL.23.3Mn+3一HZO:体系产生.OH的情况23入1M+ns浓度对反应的影响实验结果显示Mn3+是否促进·oH的产生受其浓度的影响，总的来说在较高的浓度下Mn+3将会抑制.oH的产生，而在较低的浓度下促进.oH的产生，如图16所示。图16显示用HPLc一芳环轻基化法测得的在不同的Mn+3浓度下体系中相对荧光强度的情况，结果表明:当Mn+3浓度在。一15x10一6m0比之间时

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