福尔马林炎性痛诱导大鼠脊髓后角和海马PKC表达上调

发布时间：2020-08-05 08:11

【摘要】： 疼痛是临床上常见的症状，常给病人带来极大的痛苦。组织损伤及外周神经损伤后可导致痛及痛过敏。目前认为，痛及痛过敏的发生机制有两方面：一是外周伤害性信息不断传入，二是脊髓内感觉神经元兴奋性发生改变。但其详细机制并未完全阐明。近年来研究表明，脊髓后角神经元内蛋白激酶C(PKC)的激活和位移与痛感觉及痛过敏的形成有关。鞘内注射PKC激动剂如PMA，动物表现出明显的痛过敏和自发性疼痛。而给予PKC抑制剂如H-7，动物对伤害性刺激反应迟钝，明显减轻福尔马林足底注射引起的热痛觉过敏现象，热辐射实验潜伏期延长。而在缺乏PKCγ的小鼠神经损伤后完全不产生痛觉过敏。可见，PKC的激活是产生痛及痛过敏的重要因素。海马作为边缘系统的重要部分，其功能尚未完全阐明。虽然已有较多的研究证明海马参与情绪，记忆及应激调节，但是有关海马与疼痛关系研究报道较少。近年来的一些研究表明，海马有可能参与痛感觉及痛调制过程，但其详细机制尚不清楚。 因此，本实验目的有两方面，一是系统观察福尔马林炎性痛时脊髓后角PKC激活的时间过程及其分布特征；二是观察福尔马林炎性痛及痛过敏过程中海马PKC表达的变化及其区域特征，为进一步阐明海马在痛感觉及痛调制方面的功能提供依据。研究结果如下： 1．大鼠福尔马林炎性痛及痛过敏时脊髓后角PKC的变化及时 中文摘要 间特征 健康SD大鼠42只，雌雄不拘，酬颁7组，分另为对 照绷D猕马林致痛后＊，3h，12h，2仇 3d及7d组（每组 n＝6人对照组大鼠经右后掌皮下注射生理盐水0．IInl，其余各 组大鼠注射 sed尔马林溶液 0．Inil，对照组于注射后 24h，其 余各组于注射福尔马肪相应时间点耿LS脊髓节段做PKC免 疫组织化学观察。 结果发现，对照组PKC阳性细胞较少，免疫阳性产物均 匀分布在细胞膜、细胞撅D细胞核。而且左右两侧对比PKC 的阳性细胞数无差异中Deo．05人注射福尔马林后各实验组脊 髓后角PKC阳性细胞数增加，而且同侧仰勤Uu明显。与此 同时PKC阳性产物在细胞内分布也鞭破，表现为：细胞核 几乎无表达，主要分俪雏脚位；而且期钞翱弛拗耐照组显 著增加巾＜0．05人PKC a＠性的增加在时间上表现为两个 高峰，邢IJ为注射福尔马肪 lh 和 24h，而又以 24h更为显著 巾．of人肋后 7d M的阳性细胞数目及染色髓恢复到 对照组水平。 以上结鞭明，福尔马林赃性痛及痛过敏过程中，脊髓 后角PKC被激活脓移￥鹏部位，娜蜘旷于福尔马林注射后 24h的同侧脊髓后角最明显。 2．大鼠福尔马林炎性痛诱导海马神经元形态及PKC的变化 健康SD大鼠42只，雌雄不拘，酬蛐7组，分别为对 照绷D猕马硼后＊，3h，12h，24h，3d禾 7d组（IFi）。 对照组大鼠经右后掌皮下注射生理盐水0．IInl，其余各组注射 5蝴马林溶液0．IITil。对照组动物于注射后24h，其余各组 于注射后相应时间点断头取脑，冠状切取视交叉后 1至4mm 2 中文摘要 脑胭，10％中牲甲醛固定，敝HE常顺色和PKC免翩 化染色，观察海马神经元的形态学变化及M 倩况。 结果发现，对照组海马PKC阳性细胞较少，阳性产物在 细胞内均匀分布，染色深度浅。M马林后各实验组PKC 阳。喇撇均增加，附胜吨脏…靴，而细胞核 无明显表达。PKC的兔疫活性的增加在时间上表现为两个高 峰，分别为＊ 和 24h，以 24h最明显（pwto．of），之后即开始 下降，于注射后7d f恢复￥侧股组水平。这种免疫活性的增 加，主要表现在CA3及CA4区，以CA3区最明显；而CAI 区无论阳性细胞数及染色深度都与对照组无显著性差异。HE 常舰染色发现对照组海躺体细舱由刚整齐，胞核清晰：注射 福尔马林后可见部分海马锥喇娜一＋胀，深染：在注 射福尔马林后3d组海马锥喇胞变化最明显，可见细脚P列紊 乱，胞体月＋服核仁消失，部分锥体细胞胞体皱缩，胞浆浓缩及 胞核固缩；＿掖形态学改变可于注射福尔马林后7天恢复。 以上结果表明，福尔马敝性痛及痛过敏贿马锥喇胞 M的表达增强，娜靴的时间特征与脊髓是一致的，说明 海马参与了伤害账息的传递与感受过程。海马PKC触强 主要出赃CA3区，说明CA3区可能题马感受痛觉的主要 珊。而且在PKC的免疫活胜增强之后发生部分细胞可逆胜损 伤变化，表明伤害性信层的传入可致海马神经元形态学发生可 逆性改变。 结论：大鼠右后掌注射福尔马湘能G！起脊髓后角神a 内PKC兔疫活性增强，膜结合PKC谢，这种变化于注射福 尔马林后24h最为显著：与此同时海马神经元细胞内PKC免疫 活哪增强，表明伤害 急同时传谢u了海马。顾？变化以
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2002
【分类号】：R363

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本文编号：2781267