广西融水并殖吸虫种型基因差异的分子生物学研究

发布时间：2020-09-08 09:41

　　目的：对广西融水并殖吸虫进行分子生物学鉴定，并揭示其亲缘种之间的基因差异和遗传分化。方法：提取融水大囊、小囊肺吸虫成虫的基因组DNA，应用PCRdesn软件设计特异引物对其进行基因体外克隆并测出其rRNA ITS2的基因序列，通过GenBank的Blast程序进行基因的同源性比较，通过Primer Premier软件和PHYLIP软件的NEIGHBOR程序进行基因序列的基因差异比较和基因进化树的构建。结果：基因同源性比较结果显示，融水大囊、小囊肺吸虫成虫的ITS2基因同源性：Identities=100％(389/389)，Score=748 bits；大囊肺吸虫成虫与斯氏狸殖吸虫、巨睾并殖吸虫的ITS2基因同源性分别为：Identities=100％(334/334)，Score=662 bits；Identities=91％(308/336)，Score=436bits；小囊肺吸虫成虫与斯氏狸殖吸虫、巨睾并殖吸虫的ITS2基因同源性分别为：Identities=99％(360/361)，Score=710 bits；Identities=92％(334/363)，Score=484 bits；基因序列的基因差异比较显示，大囊、小囊肺吸虫成虫与斯氏狸殖吸虫ITS2基因的碱基差异位点为0，与P.miyazakii、P.ohirai、Pharinasutai、P.kellicotti、P.mexicanus、P.siamensis、P.westermani、P.heterotremus、P.macrorchis的ITS2基因碱基差异位点分别为0、28、26、28、33、 — — 35、25、20、28；基因进化树显示，融水大囊、小囊肺吸虫成虫与斯氏狸殖吸虫处在遗传树的同一位置，与巨罪并殖吸虫的遗传树距离却较远。结论：根据基因同源性分类标准和比较结果，认为融水大囊、小囊肺吸虫成虫和斯氏狸殖吸虫1＊亚基因高度同源：大囊、小 ‘囊肺吸虫成虫与巨睾并殖吸虫1＊SZ基因同源：根据基因序列基因差异比较结果，认为大囊、小囊肺吸虫成虫与斯氏狸殖吸虫三者没有明显基因差异，与巨睾并殖吸虫的基因差异明显；根据基因进化树结果，大囊、小囊肺吸虫成虫和斯氏狸殖吸虫三者没有明显遗传分化，与巨睾并殖吸虫的遗传分化则较明显；其它亲缘种中，宫崎并殖吸虫与斯氏狸殖吸虫的亲缘关系最近。综合基因同源性比较结果。基因序列基因差异比较结果和基因进化树结果，认为融水大囊肺吸虫成虫、小囊肺吸虫成虫和斯氏狸殖吸虫为同一物种，小囊肺吸虫成虫并非巨睾并殖吸虫。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2002
【中图分类】：R346

【参考文献】