神经生长因子对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型的影响及机制

发布时间：2020-11-05 00:53

　　 目的观察神经生长因子(NGF)对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化的影响,并初步探讨其在抗肝纤维化中的作用机制。方法用CCl4诱导形成小鼠肝纤维化模型。将30只雌性昆明小鼠随机分成A、B、C3组,每组10只。A、B组均予CCl4皮下注射纤维化模型,B组加予NGF干预;C组以等量生理盐水代替CCl4皮下注射。8周时采集标本,用全自动生化分析仪检测ALT、AST、TBIL、Alb;放射免疫法检测肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)。肉眼及组织病理形态学法(常规HE染色、网状纤维染色及Masson染色)观察肝组织标本,并采用Ishaki评分系统对小鼠肝组织炎症活动度及纤维化程度进行评分。半定量RTPCR分析Bax基因在小鼠肝组织中的表达情况。结果成功建立小鼠肝纤维化模型,表现为汇管区周围纤维化明显,有芒状纤维和纤维间隔形成。A、B组ALT、AST、HA、LN均明显高于C组(P0.05);B组ALT、AST、LN均明显低于A组(P0.05)。HE染色、网状纤维染色及Masson染色显示,A组肝组织炎症及纤维化程度最明显,B组肝组织炎症较A组显著减轻,未形成纤维间隔,纤维组织细短,C组肝组织未见明显炎症细胞浸润及纤维形成。3组炎症活动度得分、纤维化得分差异均有统计学意义(HC=12.09,P0.05;HC=17.95,P0.05)。RT-PCR结果示:A、B、C 3组之间Bax/β-actin相对吸光度比值分别为0.677±0.193、1.234±0.027、1.525±0.037,各组之间差异有统计学意义(F=2 227.16,P0.05)。结论 NGF可以阻断CCl4诱导的小鼠肝纤维化,减轻肝组织炎症;其抗纤维作用与减轻肝组织炎症及上调Bax基因的表达相关。
【部分图文】：

图1各组8周时肝组织病理表现(×100)表4各组肝脏炎症活动度评分情况只组别0～3分4～6分7～9分10～14分15～18分A组00361B组02530C组73000表5各组肝脏纤维化评分情况只组别01分2分3分4分5分6分A组0002242B组0016210C组7300000M:Marker;1:C组;2:B组;3:A组图2各组肝组织中BaxmＲNA的表达结缔组织增生，逐渐形成肝纤维化［8］。然而，肝纤维化可进展为肝硬化，甚至肝癌，直接威胁到肝病患者的生命。如能阻断或逆转肝纤维化，就可减少严重后果的发生，这是肝病治疗的关键，也是目前国内外医学研究的热点之一。NGF作为一种神经营养因子，在神经系统的中的应用已经很成熟了。近年来，NGF在肝脏疾病中的作用亦崭露头角。一方面，肝损伤时，肝细胞可表达NGF，而NGF可抑制核转录因子－κB(NF－κB)的激活，减少促炎因子的产生，进而抑制肝脏炎症反应，减缓肝纤维化的进展［9］。另一方面，NGF与肝纤维化密切相关，特别是对肝纤维化的中心环节，即HSC的活化及增殖，其在肝纤维化中扮演重要的角色。NGF可抑制HSC的增殖，作用机制可能是通过诱导凋亡来调节HSC的数量［10］。另外，NGF可抑制HSC合成Ⅰ、Ⅲ型胶原，诱导HSC凋亡，抑制HSC胶原分泌，可能是NGF抗肝纤维化的作用机制［11］。学者们通过体外实验逐渐认识到NGF在抗肝纤维化中的作用，为此本课题就NGF与抗肝纤维化作用的体内实验效果进行了深入研究。本研究结果发现，实验8周后，3组间生化指标·3644·广东医学2014年12月第35卷第23期GuangdongMedicalJournalDec．2014，Vol．35，No．23

图1各组8周时肝组织病理表现(×100)表4各组肝脏炎症活动度评分情况只组别0～3分4～6分7～9分10～14分15～18分A组00361B组02530C组73000表5各组肝脏纤维化评分情况只组别01分2分3分4分5分6分A组0002242B组0016210C组7300000M:Marker;1:C组;2:B组;3:A组图2各组肝组织中BaxmＲNA的表达结缔组织增生，逐渐形成肝纤维化［8］。然而，肝纤维化可进展为肝硬化，甚至肝癌，直接威胁到肝病患者的生命。如能阻断或逆转肝纤维化，就可减少严重后果的发生，这是肝病治疗的关键，也是目前国内外医学研究的热点之一。NGF作为一种神经营养因子，在神经系统的中的应用已经很成熟了。近年来，NGF在肝脏疾病中的作用亦崭露头角。一方面，肝损伤时，肝细胞可表达NGF，而NGF可抑制核转录因子－κB(NF－κB)的激活，减少促炎因子的产生，进而抑制肝脏炎症反应，减缓肝纤维化的进展［9］。另一方面，NGF与肝纤维化密切相关，特别是对肝纤维化的中心环节，即HSC的活化及增殖，其在肝纤维化中扮演重要的角色。NGF可抑制HSC的增殖，作用机制可能是通过诱导凋亡来调节HSC的数量［10］。另外，NGF可抑制HSC合成Ⅰ、Ⅲ型胶原，诱导HSC凋亡，抑制HSC胶原分泌，可能是NGF抗肝纤维化的作用机制［11］。学者们通过体外实验逐渐认识到NGF在抗肝纤维化中的作用，为此本课题就NGF与抗肝纤维化作用的体内实验效果进行了深入研究。本研究结果发现，实验8周后，3组间生化指标·3644·广东医学2014年12月第35卷第23期GuangdongMedicalJournalDec．2014，Vol．35，No．23
【参考文献】

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本文编号：2870864