9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液中游离多糖含量检测方法的建立

发布时间：2020-11-09 00:54

　　 目的建立测定9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液中游离多糖含量的检测方法。方法对9V型肺炎球菌多糖溶液进行不同浓度的脱氧胆酸钠(NaDOC)酸沉处理,选择仅沉淀结合物而不沉淀多糖的最佳处理条件,筛选出所能沉淀蛋白的最大浓度;对建立的方法进行准确度、精密度、专属性及线性验证。结果 9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液的最佳NaDOC酸沉处理条件为2%NaDOC-0. 05 mol/L HCl;蛋白浓度低于200μg/m L时,NaDOC酸沉处理条件沉淀蛋白的效果最佳。准确度试验的回收率在90%～99%之间;实验内及实验间均具有良好的精密度(CV均小于10%);在10～100μg/mL范围内采用蒽酮硫酸法测定糖浓度的曲线,线性良好,r~2 0. 998;NaDOC的终浓度在0. 25%以下,对蒽酮硫酸法检测无干扰。结论 NaDOC酸沉淀法能很好地分离结合物原液中的结合物与游离多糖,具有良好的重复性和准确性,可用于测定9V型肺炎球菌多糖蛋白结合物原液中的游离多糖含量。
【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 多糖及其蛋白结合物
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 蛋白浓度检测
    1.4 多糖浓度检测
    1.5 Na DOC含量检测
    1.6 游离糖含量检测方法的建立
        1.6.1 游离糖分离条件
        1.6.2 重复性及NaDOC含量测定
        1.6.3 不同蛋白浓度结合物的沉淀效果
    1.7 方法的验证
        1.7.1 准确度
        1.7.2 精密度
        1.7.3 线性
        1.7.4 专属性
2 结果
    2.1 方法的建立
        2.1.1 游离糖分离条件
        2.1.2 重复性及NaDOC含量
        2.1.3 不同蛋白浓度结合物的沉淀效果
    2.2 方法的验证
        2.2.1 准确度
        2.2.2 精密度
        2.2.3 线性
        2.2.4 专属性
3 讨论

【参考文献】

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2 王晶;于旭博;刘方蕾;孔素娟;袁菲;刘爱萍;吴兵;侯亚莉;谢贵林;赵志强;;A群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离糖含量测定方法的建立及其验证[J];中国生物制品学杂志;2014年10期

3 沈坚;梁芳;方曼莉;王伟;赵菲琼;马相虎;;测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗游离多糖的脱氧胆酸钠沉淀法的建立[J];国际生物制品学杂志;2014年05期

【共引文献】

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1 尹珊珊;邓海清;高宇皎;刘杨;郝倩;张艳红;刘建凯;;19A型肺炎链球菌多糖结合物中游离多糖含量测定方法的建立[J];国际生物制品学杂志;2017年04期

2 侯亚莉;于旭博;刘方蕾;杨英英;吴兵;刘佳;王晶;毛睿;谢贵林;;差异火箭免疫电泳定量检测四价脑膜炎球菌结合疫苗游离多糖方法的建立及验证[J];中国生物制品学杂志;2015年11期

3 于旭博;孔素娟;袁菲;王晶;罗树权;王欣茹;李阿妮;方红春;赵志强;谢贵林;;C群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物制备方法的比较[J];中国生物制品学杂志;2015年09期

【二级参考文献】

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2 吴凯;陈磊;周红军;樊会兰;周燕美;包南艳;徐娅妮;袁琳;张益丽;黄镇;;肺炎链球菌18C型多糖结合物中游离多糖含量检测方法的建立[J];中国生物制品学杂志;2009年09期

3 张莉,杨展澜,熊尧,彭疼疼,翁诗甫,吴瑾光;H~+对水溶液中脱氧胆酸钠聚集体的影响[J];物理化学学报;2004年10期

4 张娜;张萍;肖詹蓉;;细菌多糖-蛋白结合疫苗研究进展[J];国际生物制品学杂志;2011年05期

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4 曾常茜,尹学念,王琰;ABEI-CEA McAb结合物的制备[J];中国现代医学杂志;1997年08期

5 薛小平,李秋瑾,田红,李彤;发光剂标记物的制备及质量鉴定[J];上海免疫学杂志;1988年02期

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