建立胸腺瘤型重症肌无力裸鼠模型可行性的研究

发布时间：2017-04-07 07:16

  本文关键词：建立胸腺瘤型重症肌无力裸鼠模型可行性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的初步探索移植的瘤组织在BALB/c裸鼠体内存活情况,检测裸鼠总补体活性、T淋巴细胞及亚群,探讨胸腺瘤合并重症肌无力动物模型建立的可行性,为研究胸腺瘤及重症肌无力的发病机制提供可能的动物模型基础。方法选择2014年07月至2015年01月天津医科大学总医院心胸外科收治的重症肌无力合并胸腺瘤患者6例,术后病理诊断均为B型胸腺瘤。移植前经剪尾取血法分别采集裸鼠外周血用于流式细胞学检测T淋巴细胞及其亚群和酶联免疫吸附分析法检测外周血清总补体水平。在无菌条件下,获取瘤组织标本,用无菌手术刀将其切割成1-2mm3的组织块,通过手术方式将组织块分别移植到36只BALB/c裸鼠的左侧肾被膜下,移植后90天分别经摘眼球法采取外周血进行检测T淋巴细胞及其亚群和总补体含量变化。实验结束后采取颈椎脱臼法处死裸鼠,取出其左侧肾脏,观察移植瘤组织块成活情况。应用配对t检验方法对瘤组织块成活的裸鼠移植前后外周血T淋巴细胞及其亚群和总补体含量变化进行统计学分析。结果1、移植的胸腺瘤组织块在BALB/c裸鼠左侧肾被膜下存活:成活的瘤组织块位于肾被膜下,结构清晰,无缺血、坏死,无明显增大,HE染色及免疫组化显示胸腺瘤组织块在肾被膜下存活,移植成功率61%。2、移植前后BALB/c裸鼠外周血T淋巴细胞及其亚群的变化:移植后CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞比例与移植前比较明显升高,差异有统计学意义(P0.05);CD8+T淋巴细胞比例移植后与较移植前比较明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。3、BALB/c裸鼠外周血清中总补体含量的变化:移植后外周血清中总补体含量与移植前比较降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论1、人源性胸腺瘤作为异体移植物能够在BALB/c裸鼠体内长期存活。2、BALB/c裸鼠有完整的补体系统,且能发挥作用。3、移植的胸腺瘤组织块对BALB/c裸鼠外周血T淋巴细胞及其亚群产生影响,CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞比例升高,CD8+T淋巴细胞比例降低,T淋巴细胞亚群比例处于失衡状态。说明移植的胸腺瘤组织在裸鼠体内发挥部分胸腺功能,影响了裸鼠的细胞免疫,可能重建了其细胞免疫,后续需针对CD4+T细胞亚群进行研究,了解其亚群细胞组成比例和功能的发挥。4、TAMG动物模型建立具有一定的可行性,可为研究胸腺瘤和重症肌无力的发病机制提供动物模型基础。
【关键词】：重症肌无力 胸腺瘤 T淋巴细胞亚群 补体 动物模型
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R-332;R746.1
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-12
• 前言12-18
• 研究现状、成果12-16
• 研究目的、方法16-18
• 一、对象和方法18-26
• 1.1 研究对象18
• 1.1.1 实验资料18
• 1.1.2 实验动物18
• 1.2 实验试剂与仪器18-20
• 1.2.1 主要试剂18-19
• 1.2.2 主要实验仪器及设备19-20
• 1.2.3 主要溶液配制20
• 1.3 实验方法20-25
• 1.3.1 胸腺瘤组织BALB/c裸鼠移植20-21
• 1.3.2 裸鼠采血及处死21
• 1.3.3 流式细胞术检测裸鼠外周血T淋巴细胞及其亚群21-22
• 1.3.4 ELISA法检测裸鼠外周血清中总补体（CH50）的含量22-23
• 1.3.5 裸鼠肾组织HE染色及免疫组化23-25
• 1.4 统计学分析方法25-26
• 二、结果26-33
• 2.1 胸腺瘤合并重症肌无力患者组织块BALB/c裸鼠移植结果26-28
• 2.2 选取瘤组织块成活裸鼠外周血T淋巴细胞及其亚群数据进行分析28-31
• 2.2.1 裸鼠移植前外周血T淋巴细胞及其亚群流式细胞图28-29
• 2.2.2 裸鼠移植后外周血T淋巴细胞及其亚群流式细胞图29-30
• 2.2.3 裸鼠外周血T淋巴细胞及其亚群移植前、后结果统计学分析30-31
• 2.3 ELISA法检测裸鼠外周血清中总补体（CH50）含量的结果分析31-33
• 三、讨论33-38
• 结论38-39
• 参考文献39-45
• 发表论文和参加科研情况说明45-46
• 附录46-48
• 综述 重症肌无力相关动物模型的研究现状48-60
• 综述参考文献55-60
• 致谢60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李倩如;杜英;赵航;高峰;张清勇;李国喜;胡祥;张钦宪;;MG患者胸腺移植BALB/c nu/nu裸鼠模型的建立及其功能研究[J];中国免疫学杂志;2009年04期

  本文关键词：建立胸腺瘤型重症肌无力裸鼠模型可行性的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：289923