表达hVEGF 121 /EGFP的间充质干细胞制备及缺氧对其表达影响

发布时间：2020-12-08 20:59

　　目的:构建携带绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的人血管内皮细胞生长因子121(hVEGF₁₂₁)的真核表达质粒并在骨髓间充质干细胞中表达。测定表达hVEGF₁₂₁/EGFP融合蛋白的骨髓间充质干细胞及空白骨髓间充质干细胞在不同时间段的缺氧后VEGF的表达水平,探讨二者的区别和意义。方法:一、设计带酶切位点的hVEGF₁₂₁全长扩增引物。正义引物5’端加接XhoⅠ酶切位点,反义引物5’端加接EcoRⅠ酶切位点。使用该引物通过PCR技术扩增pCD2/ hVEGF₁₂₁质粒中的hVEGF₁₂₁编码基因全序列。将PCR产物即带有相应酶切位点的hVEGF₁₂₁编码片段,以及载体质粒pEGFP-N₂用XhoⅠ、EcoRⅠ限制性核酸内切酶酶切后,再以粘端连接克隆法将hVEGF₁₂₁编码片段定向连接入载体pEGFP-N₂的多克隆位点中,构建成pEGFP-N₂-hVEGF_121... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

XhoI、EcoRI双酶切鉴定100bp

HincII酶切鉴定500bp100bp250bp

测序结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]同种异体骨髓间充质干细胞在大鼠心脏的迁移及分化[J]. 牛丽丽,郑敏,曹丰,谢超,李海民,岳文,高艳红,白慈贤,祝善俊,裴雪涛.  中华医学杂志. 2004(01)



本文编号：2905677