6种疱疹类病毒特异性酶切图谱的建立及其应用研究

发布时间：2020-12-25 10:25

　　疱疹病毒属中具有代表性的是单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型（HSV Ⅰ／Ⅱ）、爱泼斯坦-马尔病毒（EBV）、人巨细胞病毒（CMV）、水痘-带状疱疹病毒（VZV）和人类疱疹病毒6型（HHV6）这6种病毒，它们是免疫功能低下者临床常见的病原体，尤其儿童细胞、体液免疫系统不成熟，易导致疱疹类病毒感染。疱疹类病毒感染后其临床症状和体征没有特异性，而且临床又缺乏有效的诊断方法。在本研究中，我们在疱疹类病毒较保守的DNA多聚酶基因上自行设计两对共用引物，分别对6种病毒进行聚合酶链反应（PCR）及限制性内切酶片段长度多态性分析（RFLP），最终建立了PCR-RFLP方法快速检测病毒DNA的方法，并对临床标本进行检测取得较好结果。 第一部分 疱疹类病毒特异性酶切图谱的建立 方法：在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物，一对扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型、爱泼斯坦—马尔病毒、人巨细胞病毒四种病毒，另一对扩增水痘—带状疱疹病毒和人类疱疹病毒6型两种病毒。对标准病毒株HSV Ⅰ（F株）、 2003浙江大学硕士学位论... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【图文】：

种疙疹病毒PCR扩增结果

而P3、P;这对引物只对vzv、HHv6扩增，不能扩增其他四种疮疹病毒，同时两对引物对乙肝病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、新型隐球菌和人类基因组均不能扩增(图1一2)。二、PCR扩增的敏感性P;、P:这对引物在加二甲基亚飒(DMSO)的PCR反应体系中扩增CMV，检测其灵敏度为0.1龟(图1一3)，在未加二甲基亚矾(DMSO)的PCR反应体系中扩增，其灵敏度为IOfg(图1一4);p3、p4这对引物在加和未加二甲基亚矾(DMSO)的PcR反应体系中扩增Vzv，检测其灵敏度均为lfg(图1一5，图1一6)。图1一16种疙疹病毒PCR扩增结果M:分子量对照l:CMVPCR扩增结果2:HSVIPCR扩增结果3:HSVllPCR扩增结果4:EBVPCR扩增结果5:VZVPCR扩增结果6:HHV6PCR扩增结果

2003浙江大学硕士学位论文图1一26种疙疹病毒PCR扩增的特异性M:分子量对照l:CMVPCR扩增结果2:HSVIPCR扩增结果3:HSVllPCR扩增结果4:EBVPCR扩增结果5:VZVPCR扩增结果6:HHV6PCR扩增结果7:乙肝病毒8:大肠杆菌9:金黄色葡萄球菌10:新型隐球菌11:人类基因组12:空白对照

【参考文献】：
期刊论文
[1]套式聚合酶链反应加限制酶分析检测母婴巨细胞病毒感染[J]. 尚世强,洪文澜,石一复,余钟声,顾佩宝.  中华儿科杂志. 1997(11)



本文编号：2937469