Walvax-2细胞基质培养甲型肝炎病毒YN5株的遗传稳定性分析

发布时间：2021-03-01 03:36

　　目的分析Walvax-2细胞基质培养甲型肝炎病毒（hepatitis A virus,HAV）YN5株的遗传稳定性。方法将HAV YN5株在Walvax-2细胞中于35℃连续适应培养,取P24、P27、P29、P35和P40代病毒,提取RNA,以其为模板进行RT-PCR扩增,并测序。采用生物信息学软件DNAMAN、Vector NTI、BioEdit等进行序列分析,与GenBank中登录的标准株HM175（M14707）进行同源性比较。结果 5代病毒全基因组间的核苷酸序列同源性为100%。与标准株HM175比较,5代病毒基因组5′-NCR（101～200 bp）片段的124和152位发生突变,且存在134～137 bp缺失;2A（3 012～3 210 bp）片段的3 025和3 196位发生突变,其中,3 025位点A变为T,与标准株HM175 VP1/2A（3 024～3 191 bp）的差异小于7. 5%,基因亚型与其相同,均为IB型;2C（3 986～4 960 bp）片段的4 043、4 087、4 185、4 222、4 563、4 802、4 880位点发生突变。5代病毒... 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2019,32(05)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞及毒株
    1.2 主要试剂
    1.3 病毒的培养及传代
    1.4 病毒基因扩增
    1.5 病毒基因序列分析
2 结果
    2.1 各代次毒株基因组核苷酸序列的同源性
        2.1.1 全基因组
        2.1.2 5′-NCR （101～200 bp） 片段
        2.1.3 2A （3 012～3 210 bp） 片段
        2.1.4 2C （3 986～4 960 bp） 片段
    2.2 各代次毒株氨基酸序列同源性及变异情况
    2.3 各代毒株主要抗原位点与标准株HM175的比较
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]基于时空大数据的甲型肝炎发病率分布特征分析及预测模型[J]. 朱佳佳,胡登利,洪秀琴,查文婷,吕媛.  中华疾病控制杂志. 2018(11)
[2]甲型肝炎的流行病特征及甲肝疫苗的保护效果研究进展[J]. 韩思阳.  生物化工. 2018(05)
[3]甲肝病毒YN5D株在人二倍体细胞系W2上的适应性[J]. 徐道俊,陆伟,钱雯,段清堂,马波,刘馨.  中国生物制品学杂志. 2018(04)
[4]甲肝病毒及其疫苗研究现状[J]. 王艺博,孙小雨,徐艳玲,刘令九.  中国生物制品学杂志. 2018(03)
[5]甲型肝炎疫苗的使用现状及研究进展[J]. 夏青娟,侯丽娟,徐艳玲.  国际生物制品学杂志. 2017 (03)
[6]甲型肝炎病毒Js-4株经人二倍体细胞传代后的核苷酸序列分析[J]. 胡艳灵,陈统球,黄明,戚凤春,崔燕萍,潘翔.  中国生物制品学杂志. 2012(09)

博士论文
[1]人胚胎二倍体细胞株Walvax-2的建立、检定及应用[D]. 马波.武汉大学 2015
[2]甲型肝炎病毒在人源二倍体细胞的分子进化研究[D]. 唐彩华.浙江大学 2007

硕士论文
[1]两株新建人胚肺二倍体细胞株的细胞生物学研究[D]. 高垚.昆明医科大学 2016



本文编号：3056905